漿膜腔積液脫落細(xì)胞檢查的質(zhì)量控制

曲燦華,馬 雷,李 瑩

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,黑龍江 佳木斯 154003)

漿膜腔積液脫落細(xì)胞檢查在惡性腫瘤漿膜轉(zhuǎn)移診斷中應(yīng)用廣泛,積液中大多數(shù)惡性腫瘤細(xì)胞是轉(zhuǎn)移的,而漿膜原發(fā)的惡性間皮瘤極少見。該診斷方法簡便、快速、準(zhǔn)確而被患者接受。診斷過程包括標(biāo)本的采集送檢、制片、染色、鏡檢、診斷等環(huán)節(jié)。細(xì)胞學(xué)診斷首先是鑒別積液的良惡性質(zhì),其次識(shí)別病變組織類型,同時(shí)探討腫瘤的原發(fā)部位[1]。為提高陽性檢出率,對(duì)各個(gè)環(huán)節(jié)實(shí)施質(zhì)量控制,從以下幾個(gè)方面進(jìn)行敘述。

1 標(biāo)本采集、送檢

漿膜腔積液由臨床醫(yī)師采集。采集到的標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送檢,最多不能超過 1h,否則其中的各種細(xì)胞因自溶而破壞,嚴(yán)重影響診斷,實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后應(yīng)立即離心處理。

2 制片

標(biāo)本采取自然沉淀和離心沉淀相結(jié)合的方法。將標(biāo)本容器上部液體棄去,取底部標(biāo)本,分別注入兩只試管,每管約10mL,2000r/min,離心 5min為宜。離心速度過高或時(shí)間過長,使細(xì)胞異常堆集,互相重疊;過低則使細(xì)胞不易集中。若血液成分多 ,離心后標(biāo)本,用吸管將上清液體吸出棄去,取白細(xì)胞層涂片(同血涂片)3張,若沉淀物量少,快速將試管底向上棄去上清液,管底沉淀物用脫脂干棉簽沾取,在玻片上輕輕印片 2～ 3張,自然干燥后染色。涂片不易過厚或過薄,太厚細(xì)胞重疊,太薄細(xì)胞稀少,均不適合觀片。

3 染色

將自然干燥的標(biāo)本片,瑞氏—姬姆薩染色,根據(jù)涂片厚薄及環(huán)境溫度,適量加緩沖液及控制染色時(shí)間,我們經(jīng)多年體會(huì),如為血涂片 ,涂片外觀呈紫紅色 ,鏡下細(xì)胞核、漿及染色質(zhì)結(jié)構(gòu)較清晰,適合鑒別腫瘤細(xì)胞。

4 鏡檢

每一標(biāo)本片,低倍鏡下按“弓”字形行走 ,觀察全片 ,特別是邊緣和尾部,尋找有診斷意義的細(xì)胞成分。見異常細(xì)胞,轉(zhuǎn)向油鏡辯認(rèn)。

5 診斷

由于漿膜腔積液是自然培養(yǎng)基,細(xì)胞在其內(nèi)可繁殖、生長,也可退化、變性,發(fā)生腫脹性退變和固縮性退變。脫落的間皮細(xì)胞因時(shí)間久而退化呈空泡變性或有些細(xì)胞死亡而大量聚集,因此良性細(xì)胞形態(tài)變化范圍較大,較其它涂片內(nèi)的良性細(xì)胞更難與惡性細(xì)胞區(qū)別。惡性腫瘤細(xì)胞呈惡性增殖,失去或改變其基本特征,有時(shí)也不易與良性細(xì)胞區(qū)別,因此,當(dāng)發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞時(shí),應(yīng)從以下幾方面進(jìn)行鑒別:

5.1 惡性腫瘤細(xì)胞核增大,直徑大于 20 μm、核畸形、核仁增大等特點(diǎn),n/N大于 0.3(n為核仁最長直徑,N為核最長直徑)。

5.2 與小淋巴細(xì)胞作比較,若異常細(xì)胞核大于小淋巴細(xì)胞核的 3倍以上 ,提示惡性細(xì)胞的可能性大 ,而且具有核染色質(zhì)濃集成塊、核仁增大等特點(diǎn)。小細(xì)胞未分化癌以小簇狀細(xì)胞團(tuán)分布 ,呈鑲嵌狀結(jié)構(gòu),核形不規(guī)則,似裸核、核染色質(zhì)粗、核仁、核膜不明顯等特征。

5.3 對(duì)于核較大或明顯退變,染色質(zhì)結(jié)構(gòu)不清,呈溶解狀態(tài)的異常細(xì)胞,應(yīng)與典型的間皮細(xì)胞比較 ,若差異明顯 ,多提示惡性。若二者有明顯的過渡形態(tài),則考慮是異形間皮細(xì)胞。在觀察時(shí)應(yīng)注意核膜是否清楚、細(xì)胞外緣是否明顯、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)是否清楚、核仁是否隨著核同步增大、胞漿顏色是否偏堿,對(duì)其惡性細(xì)胞診斷意義最大[2]。

5.4 細(xì)胞排列對(duì)診斷有一定幫助,細(xì)胞排列紊亂、重疊明顯、細(xì)胞團(tuán)之間核大小相差 2倍以上,核仁大而清晰,可確定惡性。典型的腺腔樣、桑椹樣、花邊樣細(xì)胞、印戒樣細(xì)胞出現(xiàn)時(shí),多提示腺癌;若細(xì)胞分散、畸形怪狀,如蝌蚪形、蛇形、纖維形、巨大不規(guī)則圓形、典型角化細(xì)胞出現(xiàn),并且核增大,核仁特點(diǎn)明顯多提示鱗癌;若見裸核、核畸形,如三角形、瓜籽仁狀核,成堆成簇聚集在一起,核明顯增大,有鑲嵌狀結(jié)構(gòu),多提示未分化癌;若大量散在彌散分布巨大間皮細(xì)胞,核增大,一般為間皮細(xì)胞核 2倍以上,異常核分裂、巨大核仁、核染色質(zhì)疏松粗顆粒狀、核仁位于細(xì)胞中央,多提示惡性間皮瘤[2]。

6 診斷的質(zhì)量保證

①制定相應(yīng)嚴(yán)格的操作規(guī)程,在標(biāo)本的采集送檢、制片、染色、鏡檢各個(gè)環(huán)節(jié)上嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。②提高診斷人員的業(yè)務(wù)素質(zhì)和責(zé)任心,細(xì)胞學(xué)診斷技術(shù)人員應(yīng)經(jīng)過 3～5年高水平及標(biāo)準(zhǔn)化培訓(xùn)[3]。③積極與臨床醫(yī)生溝通,掌握患者臨床資料,為診斷提供依據(jù)。④對(duì)細(xì)胞學(xué)診斷可疑陽性病例,應(yīng)進(jìn)一步做相關(guān)檢查,并盡可能地與病理組織學(xué)診斷相對(duì)照。⑤建立審核制度,每一例診斷報(bào)告應(yīng)有兩位診斷醫(yī)師簽字,避免主觀意見。⑥建立會(huì)診制度 ,對(duì)疑難標(biāo)本采取會(huì)診制度。⑦建立標(biāo)本復(fù)查制度,對(duì)可疑標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢,及時(shí)發(fā)現(xiàn)糾正可能出現(xiàn)的誤診。⑧建立隨訪制度,觀察病人的病情變化,以確定診斷的準(zhǔn)確性[3]。

總之,漿膜腔積液脫落細(xì)胞檢查的質(zhì)量控制慣穿于標(biāo)本的取材、送檢、制片、染色、鏡檢、診斷等過程,它是沒有建立在牢固的、定量的、有統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上[4],更多的取決于人的主觀經(jīng)驗(yàn),因此,首先應(yīng)加強(qiáng)業(yè)務(wù)學(xué)習(xí),經(jīng)常與臨床醫(yī)師溝通,及時(shí)反饋患者信息,拓寬知識(shí)面,以及與病理組織學(xué)相對(duì)照,不斷提高診斷人員的業(yè)務(wù)水平;嚴(yán)格操作規(guī)程;建立相關(guān)制度;盡量避免可能造成診斷誤差的各種因素,以提高陽性檢出率。

[1]馬正中,闞秀,劉淑范.診斷細(xì)胞病理學(xué) [M].鄭州:河南科學(xué)技術(shù)出版社,2000,250

[2]王永才.穿刺脫落細(xì)胞診斷學(xué) [M].北京:科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,1993,439

[3]柏長銘.針吸細(xì)胞學(xué)檢查的質(zhì)量控制 [J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 2004,22(3):248

[4]柏長銘.針吸細(xì)胞學(xué)檢查的質(zhì)量控制 [J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2004,22(3):247