紫鵑茶和苦丁茶中功效成分的提取分離

隋秀芳，王玉株，黃 濤，秦禮康,*

(1.貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2.六盤水市第二實驗中學(xué)，貴州 六盤水 553001；3.六盤水三山食品有限公司，貴州 六盤水 553001)

紫鵑茶和苦丁茶中功效成分的提取分離

隋秀芳1，王玉株2，黃 濤3，秦禮康1,*

(1.貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2.六盤水市第二實驗中學(xué)，貴州 六盤水 553001；3.六盤水三山食品有限公司，貴州 六盤水 553001)

優(yōu)選降壓效果顯著的紫鵑茶和苦味特征明顯的苦丁茶為原料，采用微波輔助有機溶劑提取法對紫鵑茶和苦丁茶中的功效成分進行分離提取獲得茶提取物，通過添加茶提取物解決整米苦蕎茶熱加工過程中特征風(fēng)味和部分功效成分嚴(yán)重缺失的技術(shù)難題。結(jié)果表明，不同貯藏期的紫鵑茶除茶黃素含量差異不顯著外，其余功效成分差異顯著(P＜0.05)?？喽〔枥先~、嫩葉及其超微粉營養(yǎng)成分存在顯著性差異(P＜0.05)。通過正交試驗優(yōu)化，紫鵑茶提取最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)65%、微波功率540W、提取時間50s、液料比為10:1，其提取物富含花青素(Δ A示差值0.925)，茶多酚27.709%，茶黃素0.707%，茶紅素15%，兒茶素259.735mg/g，咖啡堿7.053%；苦丁茶提取最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)55%、微波功率360W、提取時間120s、液料比25:1，其提取物苦味濃烈，含黃酮30.79%、葉綠素0.699mg/g、茶多酚13.619%、咖啡堿4.812%、兒茶素26.161mg/g。紫鵑茶和苦丁茶提取物均可作為苦蕎茶風(fēng)味與功能強化用基料。

苦蕎茶；紫鵑茶；苦丁茶；超微粉碎；功效成分

紫鵑茶，是云南特有的一種茶葉，屬于純正云南大葉種喬木普洱茶系列，是經(jīng)千年以上的大葉喬木古茶樹變種而來。據(jù)分析，該茶富含茶多酚、氨基酸、水浸出物、茶黃素、茶紅素、花青素等營養(yǎng)功能成分。其中，花青素由于其卓越的抗氧化能力，可清除人體內(nèi)致病的自由基，減緩細胞死亡和細胞膜變性，延緩衰老；并且其能通過降低膽固醇水平，減少血管壁上的膽固醇沉積，提高血管壁彈性而達到降壓的功能，在預(yù)防和治療心血管疾病中發(fā)揮越來越大的作用[3]。

苦丁茶(Ileχ kudingcha)，屬冬青科冬青屬植物，含有多酚、黃酮、咖啡堿、蛋白質(zhì)等200多種成分，具有降血壓、降膽固醇、抑菌消炎、清除人體自由基、增強人體免疫力等功效，對它的研究與開發(fā)已成為近年來的熱點[4]。貴州苦丁茶，因其明顯的生理活性和獨特的苦后回甜風(fēng)味特征，深受消費者青睞。

本實驗以紫鵑茶和苦丁茶作為原料，旨在利用其降壓、抗氧化等保健功能和特征苦味，通過正交試驗，確定提取的最佳工藝方案，并跟蹤分析提取物的主要功能成分，為后續(xù)應(yīng)用于苦蕎茶風(fēng)味與功能強化提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

貯藏期分別為1年、2年、3年的蒸青紫鵑茶 云南茶葉研究所；苦丁茶老葉、苦丁茶嫩葉 貴州余慶縣。

茚三酮(AR)、甲醇(色譜級)、沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品(AR)天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；碳酸鈉(≥99.0%) 成都金山化學(xué)試劑有限公司；黃酮標(biāo)樣(蘆丁) 南京替斯艾么中藥技術(shù)研究所；其他化學(xué)試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

AK-98型流水式超細中藥粉碎機 東莞市創(chuàng)瑞工業(yè)實驗設(shè)備有限公司；TGL20M型臺式高速冷凍離心機 長沙邁佳森儀器設(shè)備有限公司；UV-7502 PC紫外可見分光光度計 上海欣茂儀器有限公司；HH-S6型電熱恒溫水浴鍋 北京科偉永興儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 紫鵑茶、苦丁茶測定指標(biāo)與方法

將不同貯藏期(分別為1、2、3年)的紫鵑茶，超微粉碎后得到超微紫鵑茶粉(320目)，后分別對所得超微紫鵑茶粉做功效成分測定；選擇不同成熟度的苦丁茶及其超微茶粉做營養(yǎng)功效成分測定，測定指標(biāo)與方法如下：茶多酚：GB/T 831 3—2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測方法》；兒茶素：香莢蘭比色法；可溶性糖含量：蒽酮比色法；水浸出物：GB/T 8305—2002《茶水浸出物測定》；葉綠素含量：丙酮分光光度法；咖啡堿：GB/T 8312—2002《茶咖啡堿測定》；游離氨基酸總量：茚三酮比色法；茶黃素、茶紅素：Roberts分光光度法。

1.3.2 紫鵑茶提取物制備的單因素試驗[5-8]

將不同儲藏期的紫鵑茶混合，超微粉碎得到紫鵑茶粉(320目)作為實驗原料，利用微波輔助有機溶劑法提取紫鵑茶粉中的花青素。參考文獻[7]，采用pH值示差法對紫鵑茶提取物中的花青素進行定量分析。具體方法如下：分別精確稱取1g紫鵑茶粉7份，按照表1安排，用不同體積分?jǐn)?shù)乙醇按照一定的料液比添加后(按照0.1% HCl-乙醇＝1:20)加入0.1%的鹽酸。微波輔助提取，離心(4000r/min，15min)，吸取提取液。取提取液1mL，分別加入pH1.0和pH4.5緩沖體系，定容至10mL，分別于530nm和700nm測定吸光度，以吸光度的差值表示花青素的提取量，用示差法按照公式計算：

表1 紫鵑茶提取物制備單因素試驗因素水平表Table 1 One-factor-at-a-time design for optimizing Zijuan Pu-erh tea extraction

1.3.3 紫鵑茶提取物制備的正交試驗

根據(jù)單因素試驗結(jié)果，設(shè)計正交試驗的因素水平表(表2)。設(shè)計采用L9(34)正交試驗，確定紫鵑茶花青素粗提取的最佳提取方案。后將提取液進一步濃縮干燥成粉末狀，密封保存。

表2 紫鵑茶提取物制備正交試驗因素與水平設(shè)計表Table 2 Factors and their levels in orthogonal array design foroptimizing Zijuan Pu-erh tea extraction

1.3.4 苦丁茶提取物的制備方法[9-11]

采用超微粉碎設(shè)備將苦丁茶老葉、嫩葉分別粉碎，得到超微粉(320目)。利用微波輔助有機溶劑法提取超微粉中的黃酮類物質(zhì)。

1.3.4.1 苦丁茶提取物制備的單因素試驗

精確稱取一定量干燥粉碎的苦丁茶粉，根據(jù)表3，按照一定液固比(固定液體體積為l00mL)加入不同體積分?jǐn)?shù)乙醇溶液，在設(shè)定的微波功率下加熱提取一定時間，取出提取液，經(jīng)離心分離(4000r/min，15min)后取上清液lmL定容，測定苦丁茶總黃酮含量。

表3 苦丁茶提取物制備的單因素試驗因素水平表Table 3 One-factor-at-a-time design for optimizing Kuding tea extraction

1.3.4.2 總黃酮含量測定

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精確稱取蘆丁標(biāo)樣36.6mg，用30%乙醇溶解定容于100mL棕色容量瓶中。分別吸取l、2、4、6、8mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入5個25mL容量瓶中，用30%乙醇溶液補充至12.5mL，加入0.7mL 5% NaNO2，搖勻，放置5min后加入0.7mL Al(NO3)3，6min后，加入5mL lmol/L NaOH，搖勻后用30%乙醇溶液稀釋至刻度。放置10min后于波長510nm處比色測定吸光度(以試劑為空白參比)。以標(biāo)準(zhǔn)蘆丁含量為縱坐標(biāo)，吸光度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。用最小二乘法，以蘆丁溶液質(zhì)量濃度(y)與吸光度(A)進行線性回歸得到回歸方程和相關(guān)系數(shù)。

總黃酮含量測定：取上清提取液lmL于25mL容量瓶中定容后，精確吸取lmL溶液，其余按“標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制”的方法操作后，在510nm處測定吸光度，代入上述所得回歸方程計算總黃酮含量。計算公式如下：

式中：X為總黃酮含量/%；m為查曲線所得黃酮含量/mg；M為待測樣品干基的質(zhì)量/g；n為樣品提取液測定時稀釋的倍數(shù)。

1.3.4.3 苦丁茶提取物制備的正交試驗

表4 苦丁茶提取物制備正交試驗因素與水平設(shè)計表Table 4 Factors and their levels in orthogonal array design for optimizing Kuding tea extraction

根據(jù)單因素結(jié)果，設(shè)計正交試驗的因素水平表(表4)。采用L9(34)正交試驗，確定苦丁茶黃酮粗提物的最佳提取方案。后將提取液進一步濃縮干燥成粉末狀，密封保存。

1.4 統(tǒng)計分析

所有試驗數(shù)據(jù)平行測定3次，采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件分析，用均值加標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同貯藏期超微紫鵑茶粉的抗氧化功能成分分析

表5 超微紫鵑茶粉抗氧化功能成分測定結(jié)果Table 5 Antioxidant components in Zijuan Pu-erh tea powder

由表5可知，貯藏期不同的紫鵑茶超微粉碎后得到的超微茶粉，主要營養(yǎng)成分中僅茶黃素含量不存在顯著性差異，其他均存在明顯差異。隨著紫鵑茶貯藏時間的延長，紫鵑茶粉中茶多酚、花青素、茶紅素、兒茶素、還原性糖總量呈現(xiàn)先降低后增長的變化趨勢；水浸出物、氨基酸總量和咖啡堿呈遞減趨勢；茶黃素含量變化不大。分析原因是：茶葉在儲藏過程中，其品質(zhì)成分在內(nèi)外因子的作用下會發(fā)生一系列變化。短時間貯藏時，茶多酚、花青素、兒茶素等功效成分會不同程度的氧化、降解和轉(zhuǎn)化，所以含量逐漸減少；隨著儲藏時間的延長，紫鵑茶自身發(fā)酵程度加深，部分營養(yǎng)成分反而因為某些物質(zhì)間的轉(zhuǎn)化，含量有所增加[12-13]，例如茶紅素的變化。因為茶葉中部分兒茶素經(jīng)過氧化聚合形成茶黃素，茶黃素進一步轉(zhuǎn)化，形成茶紅素[14-16]。這就是茶紅素含量先降低后增大的原因。此外造成此結(jié)果的原因還可能出自原料自身。本實驗選用的不同貯藏期的紫鵑茶可能并不是同個批次的茶葉。不同批次的茶葉會因為采摘時間、生長地域、生長條件的差異而造成自身營養(yǎng)功效成分保留的差異。本實驗中貯藏期為3年的紫鵑茶可能同其他紫鵑為不同批次茶葉，所以造成試驗結(jié)果的差異。

表6 苦丁茶抗氧化功能成分測定結(jié)果Table 6 Antioxidant components in Kuding tea

2.2 不同成熟度苦丁茶抗氧化功能成分分析

由表6可知，不同成熟度的苦丁茶各個營養(yǎng)功效成分的差異?？喽〔枥先~的茶多酚、葉綠素總量高于苦丁茶嫩葉的；苦丁茶老葉的水浸出物、兒茶素、氨基酸總量和咖啡堿的含量低于嫩葉的。因為茶多酚是茶湯澀味的主要成分，苦丁茶老葉中茶多酚含量較高，所以老葉茶湯與嫩葉茶湯比較，滋味略澀；茶葉的綠色主要是由葉綠素決定的，苦丁茶老葉中葉綠素的總量高于嫩葉，所以前者茶湯的顏色更深，呈現(xiàn)黃綠色，后者為淺綠色；水浸出物、兒茶素、氨基酸總量和咖啡堿又不同程度的決定了茶湯的“濃、強、鮮”，苦丁茶嫩葉中，這幾個營養(yǎng)功效成分含量較高，所以其茶湯滋味濃烈，苦味明顯。綜合比較，苦丁茶嫩葉浸泡后，感官評價好于苦丁茶老葉。

2.3 紫鵑茶提取物制備的單因素試驗

由圖1可見，表示花青素含量的ΔA值隨著微波提取時間的延長而增大，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的升高呈現(xiàn)增長趨勢，但在55%時略有下降。但是，ΔA值隨著微波功率的增大反而出現(xiàn)減少的趨勢，只在360W處略微增長。隨著乙醇體積的增加，ΔA值出現(xiàn)下降的趨勢。究其機理，微波提取利用了在微波場中，微波吸收能力的差異使得基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使得被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離，進入到具有較小介電常數(shù)、微波吸收能力相對較差的萃取溶劑中[3]。微波提取時間的延長利于紫鵑茶粉中花青素的溶出，但時間過長會造成溶劑溫度的升高和揮發(fā)，影響目標(biāo)物的提取，所以應(yīng)控制在一定范圍內(nèi)。體積分?jǐn)?shù)較少乙醇不宜于花青素的溶出，而且后續(xù)的過濾、干燥等操作困難且費時。其原因可能在于水的極性比較大，當(dāng)它作為溶劑時，容易浸提出蛋白質(zhì)和一些糖類物質(zhì)，因此造成后續(xù)處理的困難，但乙醇體積分?jǐn)?shù)過高又會增加雜質(zhì)的浸出量，影響結(jié)果。微波功率過大，會破壞花青素的結(jié)構(gòu)，使其分解，造成提取率的下降，當(dāng)微波功率增加到一定范圍時，花青素的含量變化趨于平緩。關(guān)于料液比對紫鵑茶粉中花青素提取率的影響，原因在于，溶劑與茶粉構(gòu)成的體系中，茶粉所占的比例越大，花青素提取率就越高。綜上所述，乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時間、微波功率、液料比均對紫鵑茶粉花青素的提取有著重要的影響。

圖1 乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時間、微波功率、料液比對紫鵑茶花青素提取率的影響Fig.1 Effects of ethanol concentration, extraction duration, microwave output power, and liquid-to-solid ratio on anthocyanin extraction rate from Zijuan Pu-erh tea

2.4 紫鵑茶提取物制備的正交試驗

由表7、8可知，影響超微紫鵑茶提取物花青素微波輔助提取效果的各因素主次關(guān)系為：液料比＞乙醇體積分?jǐn)?shù)＞提取時間＞微波功率。最佳條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)65%、微波功率540W、提取時間50s、液料比10:1，即為A3B3C2D1。正交試驗方差分析結(jié)果表明，修正模型的P值為0，小于0.05，說明正交試驗?zāi)Ｐ瓦m用，乙醇體積分?jǐn)?shù)、微波功率、提取時間、液料比的P值均小于0.01，對花青素提取的影響達到極顯著水平。按照最優(yōu)提取方案提取超微紫鵑茶粉中花青素，多次測定花青素含量，ΔA值均在0.9以上。將提取液進一步濃縮，冷凍干燥得到花青素粗提物干粉，提取率為19.5%。

2.5 紫鵑茶粗提物干粉的成分測定

表7 紫鵑茶提取物制備正交試驗設(shè)計及結(jié)果Table 7 Orthogonal array design and corresponding experimental results for optimizing Zijuan Pu-erh tea extraction

表8 紫鵑茶提取物制備正交試驗方差分析表Table 8 Variance analysis of anthocyanin extraction rate from Zijuan Pu-erh tea with various extraction conditions

表9 超微紫鵑茶粉及紫鵑茶粗提物干粉成分測定結(jié)果Table 9 Antioxidant components in Zijuan tea powder and extract

由表9數(shù)據(jù)可以得出，紫鵑茶提取物中的功效成分含量遠高于超微紫鵑茶粉，而且各個功效成分的提取率均在30%以上，其中茶黃素的提取率達到69.982%。茶黃素是一類多酚羥基具茶駢酚酮結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，具有“軟黃金”之稱。經(jīng)過臨床試驗，驗證茶黃素具有調(diào)節(jié)血脂、預(yù)防心血管疾病的功效，而且無毒副作用。茶黃素不但能與腸道中的膽固醇結(jié)合減少食物中膽固醇的吸收，還能抑制人體自身膽固醇的合成，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)上并制成有調(diào)節(jié)血脂保健功能的保健食品，市場前景十分廣闊[14]。本實驗所得粗提物中茶黃素含量較高，為后序?qū)⑵溆糜趶娀嗍w茶保健功能提供了科學(xué)依據(jù)。

2.6 苦丁茶提取物制備的單因素試驗

圖2表明，苦丁茶黃酮提取率隨著微波提取時間的延長而增大，但在120～150s處略下降；隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大提取率增加，但在95%處下降；提取率隨著微波功率的增大反而出現(xiàn)減少的趨勢，在360～540W之間提取率變化不大；料液比在1:30處，提取率最高。究其機理，微波提取時間的延長利于苦丁茶黃酮的浸出，但時間過長會造成溶劑內(nèi)部溫度的升高，目標(biāo)物提取率反而下降。試驗結(jié)果表明：低濃度的乙醇不益于黃酮的溶出，這與毛莉娟等[17]的研究結(jié)果相近。微波功率過大，會破壞苦丁茶黃酮的結(jié)構(gòu)，使其中的活性成分被破壞，雜質(zhì)溶出量增加。隨著料液比值的增大，提取率略微增長，在1:30處時提取率最高。綜合考慮提取量、溶劑用量、后續(xù)處理等因素，不宜選擇較大的料液比。綜上所述，乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時間、微波功率、液料比均對苦丁茶粉黃酮類物質(zhì)的提取有著重要的影響。

圖2 乙醇體積分?jǐn)?shù)(a)、提取時間(b)、微波功率(c)和料液比(d)對苦丁茶黃酮提取率的影響Fig.2 Effects of ethanol volume, extraction duration, microwave power, and liquid to solid ratio on Kuding tea flavonidos extraction rate

2.7 苦丁茶提取物制備正交試驗

由表10、11可知，影響超微苦丁茶粉黃酮微波輔助提取效果的各因素主次關(guān)系為：液料比＞乙醇體積分?jǐn)?shù)＞提取時間＞微波功率。最佳條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)55%、微波功率360W、提取時間120s、液料比為25:1，即A2B1C2D3。正交試驗方差分析結(jié)果表明，修正模型的P值為0，小于0.05，說明正交試驗?zāi)Ｐ瓦m用，乙醇體積分?jǐn)?shù)、微波功率、液料比、提取時間4個因素的P小于0.01，對黃酮提取率的影響均達極顯著水平。按照最優(yōu)提取方案提取超微苦丁茶粉中黃酮類物質(zhì)，提取次數(shù)為2次，測得黃酮提取率為30.79%。將提取液進一步濃縮，冷凍干燥得到黃酮類粗提物干粉，提取率為3.57%。

表10 苦丁茶提取物制備正交試驗設(shè)計及結(jié)果Table 10 Orthogonal array design and corresponding experimental results for optimizing Kuding tea extraction

表11 苦丁茶提取物制備正交試驗方差分析表Table 11 Variance analysis of flavonoids extraction rate from Kuding tea with various extraction conditions

2.8 苦丁茶老葉、嫩葉超微粉及黃酮粗提物功能成分測定

根據(jù)表12所示，苦丁茶老葉超微粉、嫩葉超微粉、老葉提取物、嫩葉提取物，它們所含有的營養(yǎng)成分含量不同。老葉超微茶粉中的水浸出物、茶多酚、咖啡堿、兒茶素、氨基酸總量高于老葉原葉，葉綠素含量略低于老葉原葉；嫩葉超微粉中的葉綠素、咖啡堿以及氨基酸總量均低于嫩葉原葉，茶多酚、兒茶素總量高于嫩葉原葉，水浸出物含量變化不大。這說明，苦丁茶超微茶粉仍保留著原茶的品質(zhì)特征。老葉提取物、嫩葉提取物中的葉綠素含量低于超微茶粉，這是由于在提取物的制備過程中，涉及到濃縮干燥等步驟，造成了葉綠素的損失[18-19]；其他營養(yǎng)成分則顯著高于超微茶粉。

表12 苦丁茶功能成分測定結(jié)果Table 12 Nutritional and functional components in young leaf Kuding tea, old leaf Kuding tea and their superfine powders

3 結(jié) 論

3.1 不同貯藏期對紫鵑茶及其超微茶粉的品質(zhì)有著重要影響。苦丁茶嫩葉的品質(zhì)好于苦丁茶老葉。

3.2 紫鵑茶提取物最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)65%、微波功率540W、提取時間50s、液料比為10:1，其提取物富含花青素、茶多酚、茶黃素等功效成分；苦丁茶提取物最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)55%、微波功率360W、提取時間120s、液料比25:1，其提取物苦味濃烈，富含黃酮、葉綠素、茶多酚等功效成分。紫鵑茶和苦丁茶提取物均可作為苦蕎茶風(fēng)味與功能強化用基料。

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Extraction of Flavor and Functional Components from Zijuan Pu-erh Tea and Kuding Tea

SUI Xiu-fang1，WANG Yu-zhu2，HUANG Tao3，QIN Li-kang1,*
(1. College of Life Science, Guizhou University, Guiyang 550025, China；2. Second Experimental Middle School of Liupanshui, Liupanshui 553001, China；3. Liupanshui Three Mountain Food Company, Liupanshui 553001, China)

In this study, the functional and flavor components in antihypertensive Zijuan Pu-erh tea and bitter Kuding tea, which can be added to whole buckwheat tea to compensate their deficiency, were extracted by microwave-assisted organic solvent extraction. The results showed that Zijuan Pu-erh tea samples stored for different times exhibited a significant difference in all investigated functional components except theaflavins (P＜0.05). Nutritional ingredients significantly differed among young leaf Kuding tea, old leaf Kuding tea and their superfine powders (P＜0.05). Orthogonal array based optimizations showed that the optimum extraction conditions of Zijuan Pu-erh tea were 65% ethanol concentration, 540 W microwave output power, 50 s extraction time and 10:1 liquid-to-solid ratio and the resulting extract was rich in anthocyanins (ΔA = 0.925) and contained 27.709% polyphenol, 0.707% theaflavins (TF), 15% thearubigins(TR), 259.735 mg/g total catechinsand 7.053% caffeine. The optimum extraction conditions of Kuding tea were 55% ethanol concentration, 360 W microwave output power, 120 s extraction time and 25:1 liquid-to-solid ratio, and the extract obtained under the optimum conditions tasted strongly bitter and contained 30.79% flavonidos, 0.699 mg/g chlorophyll, 13.619% tea polyphenol, 4.812% caffeine, and 26.161 mg/g total catechins. Together, these findings demonstrate that both tea extracts can be used to enhance the flavor and function of buckwheat tea.

buckwheat；Zijuan Pu-erh tea；Kuding tea；functional components

R284.2；TS272

：A

1002-6630(2011)20-0072-07

2011-06-14

貴陽市生物重大專項([2010]筑科農(nóng)合同字第8-1號)；貴州省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)項目(NY字[2011]3057號)

隋秀芳(1987—)，女，碩士研究生，研究方向為食品加工與安全。E-mail：sxf0503@126.com

*通信作者：秦禮康(1965—)，男，教授，博士，研究方向為食品加工與安全。E-mail：likangqin@126.com