甲胎蛋白異質(zhì)體檢測(cè)在肝癌診斷中的應(yīng)用

馬端葉 于麗梅 封建凱 盛麗

甲胎蛋白（AFP）作為肝癌的腫瘤標(biāo)志物在臨床上應(yīng)用已久，但是一些良性肝病，如慢性肝炎、肝硬化患者甲胎蛋白也會(huì)呈低濃度升高，這給臨床上鑒別肝癌和良性肝病帶來(lái)困難。研究發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞壞死再生時(shí)產(chǎn)生的AFP與肝細(xì)胞癌產(chǎn)生的AFP在糖鏈結(jié)構(gòu)上有差異，如用小扁豆凝集素（LCA）作為外源性凝集素，AFP可以LCA非結(jié)合型(AFP-L1,AFP-L2)和LCA結(jié)合型（AFP-L3）3種異質(zhì)體，其中AFP-L1主要存在于良性肝病中，AFP-L2來(lái)自孕婦，而AFP-L3為肝細(xì)胞癌所特有[1]。目前認(rèn)為，通常所說(shuō)的AFP異質(zhì)體實(shí)際是指與LCA結(jié)合的AFP-L3[2]，1999年在第四屆肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議上，被指定為原發(fā)性肝癌臨床診斷的肝癌標(biāo)志物之一。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

170例血清標(biāo)本來(lái)自我院2010年2月～2011年3月門診或住院患者，患者年齡11～82歲，全部病例AFP檢測(cè)陽(yáng)性。證實(shí)所有肝癌患者均為本院門診及住院患者，均是臨床病理B超、CT檢查確診，部分經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)。

1.2 試劑與儀器

AFP檢測(cè)使用羅氏E170電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)配套試劑，AFP-L3快速分離微量離心柱法由北京熱景生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 方法

采用微量離心柱方法。親和吸附離心柱內(nèi)裝有耦聯(lián)凝集素微球，可以特異結(jié)合AFP-L3,當(dāng)血清流過(guò)離心柱時(shí)，與LCA親合力強(qiáng)的AFP-L3結(jié)合于柱中，經(jīng)過(guò)清洗除去不結(jié)合的AFP,再經(jīng)過(guò)浸泡洗脫離心獲得AFP-L3。然后應(yīng)用羅氏E170電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)總AFP和AFP-L3的含量并計(jì)算AFP-L3占AFP總量的百分比，以AFP-L3≥10作為AFP-L3異常升高的標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)各組的腫瘤標(biāo)志物濃度和陽(yáng)性率進(jìn)行t檢驗(yàn)或x2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

75例肝癌組患者血清中，AFP-L3陽(yáng)性率為82.6%，肝硬化組陽(yáng)性為25.5%，慢性肝炎組為20%，見(jiàn)表1。經(jīng)x2檢驗(yàn)，AFP-L3陽(yáng)性率在肝癌組與肝硬化和慢性肝炎組比較，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 各組患者AFP-L3陽(yáng)性率比較（例）

肝癌、肝硬化和慢性肝炎患者AFP-L3的平均水平見(jiàn)表2，經(jīng)t檢驗(yàn)，肝癌患者與肝硬化和慢性肝炎患者比較，P＜0.01，均具有顯著性差異。

表2 各組患者AFP-L3測(cè)定結(jié)果比較

3 討論

肝癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在惡性腫瘤中的死亡排位中居第三，僅次于胃癌和肺癌。我國(guó)每年因肝癌死亡的人數(shù)占全世界肝癌死亡人數(shù)的40%，是一種嚴(yán)重威脅人民生命健康的疾病[3]。至今為止，AFP仍是原發(fā)性肝癌最特異指標(biāo)，但AFP在一些良性肝病患者中也會(huì)有不同程度的升高[4]。因?yàn)樵诟渭?xì)胞再生過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一定量的AFP，這給臨床診斷帶來(lái)一定的困難，尤其是AFP低濃度的肝癌，單檢測(cè)AFP很難與肝硬化、慢性肝炎鑒別。此時(shí)AFP異質(zhì)體檢測(cè)就有良好的臨床意義，尤其對(duì)于AFP在20～400ng/ml之間具有較好的價(jià)值。與鄭穎、胡敏華等報(bào)道一致[5-7]，本研究結(jié)果顯示：AFP-L3≥10%作為肝癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)敏感性為82.6%，與慢性肝病鑒別診斷的特異性為76.8%，肝癌患者的AFP-L3均值及陽(yáng)性率均高于肝硬化組和慢性肝炎組，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示檢測(cè)AFP-L3有助于鑒別原發(fā)性肝癌與非原發(fā)性肝癌患者。尤其在甲胎蛋白低濃度組AFP＜400ng/ml,AFP-L3≥10%為鑒別診斷指標(biāo)時(shí)，肝癌與良性肝病可得到明顯區(qū)分。

我們?cè)谂R床檢測(cè)工作中已發(fā)現(xiàn)很多患者血清AFP為20～100ng/ml，AFP-L3陽(yáng)性，從而使肝癌得到及時(shí)早期診斷。因此，AFP-L3非常適用于AFP低濃度升高的患者，對(duì)鑒別肝細(xì)胞癌與慢性肝炎、肝硬化等肝病患者是很有幫助的，特別對(duì)AFP低濃度升高的慢性肝炎、肝硬化等肝病患者，定期復(fù)查AFP-L3，動(dòng)態(tài)觀察其值變化可及時(shí)發(fā)現(xiàn)疾病的惡變傾向，明確診斷。尤其對(duì)AFP-L3≥10%的患者進(jìn)行隨訪和嚴(yán)密的監(jiān)控是很有必要的。

本文采用國(guó)產(chǎn)的微量離心柱法試劑，可以快速簡(jiǎn)便地獲得AFP-L3的組分，用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行定量測(cè)定，具有操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短、穩(wěn)定性高、經(jīng)濟(jì)性好等特點(diǎn)，利于臨床推廣。

[1] 孫艷虹，姜儻.腫瘤標(biāo)志物在臨床上的應(yīng)用（上）[J].新醫(yī)學(xué)，2008，39（2）：121-123.

[2] 鄭小華，曹穎平.甲胎蛋白異質(zhì)體的檢測(cè)與臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2008，14(18)：2808-2811.

[3] 彭承宏，李松崗，劉穎斌，等.肝癌研究現(xiàn)狀[J].肝膽外科雜志，2001，9⑸：386-388.

[4] 屠振興，吳孟超，崔貞福.甲胎蛋白異質(zhì)體對(duì)原發(fā)性肝癌早期診斷的研究[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1985，4⑹：193-196.

[5] 鄭穎，單曉潔，任茗睿，等.微量離心柱法檢測(cè)甲胎蛋白異質(zhì)體對(duì)原發(fā)性肝癌診斷的意義[J].浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，2009，14（1）：3-4.

[6] 胡敏華，陳燕，梁亞嘉，等.新微量離心柱法測(cè)定甲胎蛋白異質(zhì)體對(duì)原發(fā)性肝癌診斷的價(jià)值[J].福建醫(yī)藥雜志，2009，31（4）：95-96.

[7] 熊彪，蔡其浩，蒙凱.三項(xiàng)生化指標(biāo)聯(lián)合甲胎蛋白診斷原發(fā)性肝癌的研究[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2008，14(14)：37-38.