半夏瀉心湯對潰瘍性結腸炎大鼠模型胃腸激素的影響

王 營 李曉軍 (三河市東杉醫(yī)院,河北 三河 065200)

半夏瀉心湯是張仲景《傷寒論》中治療誤下傷中,以致少陽熱邪乘虛內(nèi)陷,郁結心下,形成寒熱互結,虛實夾雜,陰陽失調(diào),升降失常心下痞滿,或嘔或利的主方。該方具有辛開苦降、調(diào)和寒熱之功,可治療脾胃同病,氣機阻滯的痞滿。潰瘍性結腸炎(UC)又稱慢性非特異性潰瘍性結腸炎(CUC),為一種原發(fā)性器官特異的自身免疫性疾病,其病因尚未完全明確,目前認為主要與免疫異常有關。參與的多種炎癥細胞及免疫細胞釋放抗體、細胞因子及炎癥介質(zhì)等,引起組織破壞及炎性病變。可能與自身免疫、感染、遺傳因素及精神因素有一定關系〔1〕。國內(nèi)外主要采用免疫抑制劑柳氮磺胺吡啶進行治療,對急性或慢性病急性發(fā)作的活動性UC患者,采用皮質(zhì)類固醇治療,也有用硫唑嘌呤維持的。但上述藥物治療時間長,不良反應較多,且易復發(fā)。本研究采用拆方與全方對比的分析方法,對UC大鼠模型胃腸激素 P物質(zhì)(SP)、舒血管腸肽(VIP)含量檢測,觀察比較療效。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SD大鼠 60只,200～220 g,雌雄各半,由本校動物室提供。

1.2 藥品及試劑 黃芩、黃連、人參、半夏、干姜、甘草、大棗,購自承德市醫(yī)藥公司;醋酸,由天津市凱通化學試劑有限公司提供;鹽酸,由天津市凱通化學試劑有限公司提供;SP、VIP分析藥盒,購自北京航天醫(yī)學工程研究所。

1.3 實驗方法 SD大鼠隨機分 6組,即正常組、模型組、辛開組(半夏,干姜)、苦降組(黃芩,黃連)、甘調(diào)組(人參,甘草,大棗)、辛開苦降組(全方組),每組 10只。正常組不作任何處理,每天以 10ml/kg生理鹽水灌胃,其他 5組實驗前禁食 24 h,不禁水,將直徑 3 mm聚乙烯導管經(jīng)肛門插入至結腸內(nèi),深度 5～6 cm,隨后注入 8%醋酸 1.5 ml,保留 15 s,注入生理鹽水 3 ml,消除醋酸的作用〔1〕。2d后模型組每天以 10ml/kg生理鹽水灌胃外,其他 4組分別用相應的中藥水煎劑 10 ml/kg灌胃,連續(xù)3 w后將各組動物斷頭處死,每只大鼠取 5 g左右的大腸并稱重,放入預冷的試管,加入適量的0.1mol/L HCl立即沸水中煮沸 10 min以滅活蛋白酶,用玻璃勻漿器勻漿,16 000r/min離心20 min,取上清,貯于 -20℃冰箱備測。按 SP、VIP分析藥盒說明書操作程序測定結果,最后按組織勻漿實際稀釋倍數(shù)計算出每克濕重組織中 SP、VIP含量,作統(tǒng)計分析〔2〕。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS12統(tǒng)計學軟件進行t檢驗。

2 結 果

模型組 SP、VIP含量明顯增高,與正常組比較有差異性(P＜0.05);合方組與拆方組含量較模型組明顯降低(P＜0.05);辛開組與苦降組無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);而合方組與各組比較均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表 1。

表1 大鼠UC腸管SP和VIP含量比較(±s,n=10,ng/g)

表1 大鼠UC腸管SP和VIP含量比較(±s,n=10,ng/g)

與模型組比較:1)P＜0.05;與辛開苦降組比較:2)P＜0.05

組別 SP VIP正常組 23.79±0.791)2) 834.04±47.591)2)模型組 37.69±2.572) 1 617.65±170.602)辛開組 29.47±2.021)2) 1 421.28±152.201)2)苦降組 30.43±1.671)2) 1 466.85±134.501)2)甘調(diào)組 33.21±2.611)2) 1 515.87±167.732)辛開苦降組 26.61±2.331) 1 269.38±113.241)2)

3 討 論

祖國醫(yī)學將 UC歸屬于“泄瀉”、“腸風”、“臟毒”、“便血”等范疇〔2〕。眾多醫(yī)家多從中醫(yī)理論就半夏瀉心湯君藥為半夏給予了闡釋,但缺乏客觀的藥效學依據(jù)。有研究結果顯示:半夏對正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用,隨劑量的增加抑制作用增強;雖然黨參干姜對胃分泌也具有抑制作用,但結合其他研究(半夏瀉心湯對胃腸運動的影響的實驗研究顯示半夏對胃腸運動具有雙向調(diào)節(jié)作用),以及以往對半夏瀉心湯全方藥效學的研究〔3,4〕,認為半夏與半夏瀉心湯對小鼠胃分泌的影響方面具有一定的一致性,即半夏的藥效學作用與半夏瀉心湯所主病癥具有相似性,提示半夏可能為半夏瀉心湯之君藥。

胃腸激素不但存在于胃腸,有的還同時存在于神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),對神經(jīng)及免疫有重要的調(diào)節(jié)作用。它們的增多或減少,可以引起胃腸道、免疫、神經(jīng)功能失調(diào)而發(fā)病。胃腸激素中SP和VIP對 UC的發(fā)病起重要作用,SP刺激腸蠕動,VIP刺激腸液分泌,它們對胃腸黏膜和平滑肌具有廣泛的調(diào)節(jié)作用,是胃腸運動和腸分泌的重要調(diào)節(jié)肽,其含量增多,腸平滑肌興奮增高,收縮加強,平滑肌痙攣,腸蠕動加快,腸分泌增多而導致腹痛、腹瀉。組織缺血、缺氧,毛細血管通透性增加而形成腸黏膜病理改變而出現(xiàn)膿血黏液便、里急后重。SP和 VIP在消化道作為胃腸激素,在神經(jīng)系統(tǒng)作為神經(jīng)遞質(zhì),在免疫系統(tǒng)能與免疫細胞相應受體結合產(chǎn)生免疫效應。同一物質(zhì)在 3個系統(tǒng)被利用,其含量改變,導致神經(jīng)-胃腸激素-免疫功能失調(diào)可能是 UC發(fā)病的重要因素。研究表明,UC神經(jīng)內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)存在微妙的改變:腸道神經(jīng)肽表達、分布及調(diào)節(jié)異常,外周細胞對神經(jīng)系統(tǒng)反應性也異常。先前認識到,SP、神經(jīng)激肽-1受體上調(diào)與UC乙狀結腸中噬酸性粒細胞浸潤相一致。近來發(fā)現(xiàn)〔5〕,固有層中細胞神經(jīng)生長因子NGF及受體 P75增多,而腸神經(jīng)結構中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 BDNF銳減,這種不平衡可能引起患者局部組織炎癥過度代謝紊亂。尿皮質(zhì)醇Ⅱ(UcnⅡ)能作用于結腸上皮細胞的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素受體 2(CRHR2)促進炎癥反應〔6〕,而在 IBD腸道中 UcnⅡ、CRHR2 mRNA水平升高。體外實驗證實〔7〕,UC腎上腺素能介導的 IL-10通路障礙:女性UC患者外周血細胞對 β腎上腺素的反應性減弱,導致調(diào)節(jié)性細胞因子 IL-10生成減少。

除腸道正常菌群在誘導UC中可能起作用外,不能忽視自身抗原和病原菌超抗原在誘導UC發(fā)生中的特殊作用。在抗原的誘導下,免疫功能調(diào)節(jié)的異常是引起 UC病理學改變的重要因素。神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)間的相互調(diào)節(jié)作用反面的深入研究可能會更有助于弄清UC的病因病機。

本實驗說明辛開苦降合法之半夏瀉心湯,能夠降低UC大鼠模型胃腸激素 SP及 VIP的分泌,從而緩解腸平滑肌興奮,收縮減弱,平滑肌痙攣減輕,腸蠕動減慢,腸分泌減少,減輕腹痛、腹瀉的臨床癥狀,從而達到緩解和治愈潰瘍性結腸炎的目的。

1 楊冬華 .消化系疾病治療學〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:284.

2 黃志欣,勞紹賢,崔琦珍,等.潰結靈顆粒治療活動期潰瘍性結腸炎的臨床與實驗研究〔J〕.中國中西醫(yī)結合消化雜志,2003;3(11):141.

3 溫武兵,張桂珍,葉向榮 .半夏瀉心湯調(diào)和胃腸作用的動物實驗研究〔J〕.中國醫(yī)藥學報,2000;15(2):66.

4 麻春杰.半夏瀉心湯對實驗性大鼠胃運動的影響〔J〕.實用中醫(yī)藥雜志,1996;4(1):31.

5 Johansson M,Norrgrd O,Collins JE,et al.Study of expression patterns and levels of neurotrophins and neurotrophin receptors in ulcerative colitis〔J〕.Inflamm Bowel Dis,2007;13(4):398-409.

6 Moss AC,Anton P,Savidge T,et al.UrocortinⅡmediates pro-inflammatory effects in human colonocytes via corticotropin-releasing hormone receptor 2〔J〕.Gut,2007;56(9):1210-7.

7 Langhorst J,Cobelens PM,Kavelaars A,et al.Stress-related peripheral neuroendocrine-immune interactions in women with ulcerative colitis〔J〕.Psychoneuroendocrinology,2007;32(8-10):1086-96.