HGF在治療缺血性疾病中的應(yīng)用

陳 磊,楊 植

（承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普外二科，河北承德 067000）

HGF在治療缺血性疾病中的應(yīng)用

陳 磊,楊 植

（承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普外二科，河北承德 067000）

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子；缺血性疾?。荒[瘤

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocyte growth factor，HGF）最初作為肝細(xì)胞有絲分裂原被提純和克隆[1]，它在各種細(xì)胞中有促有絲分裂、運(yùn)動(dòng)形成、形態(tài)發(fā)生及抗凋亡等作用[2]。HGF的多種作用是通過(guò)由細(xì)胞膜上c-met前癌基因編碼的酪氨酸激酶受體介導(dǎo)的[3]。在生理上，HGF作為親器官因子發(fā)揮作用，它對(duì)器官(包括肝、腎、心臟、肺）有保護(hù)和修復(fù)作用。更重要的是HGF有促進(jìn)血管新生的作用，HGF可以血管內(nèi)皮細(xì)胞生成而不會(huì)引起血管平滑肌細(xì)胞的增生。

缺血性疾病(如冠狀動(dòng)脈阻塞性疾病、周?chē)鷦?dòng)脈閉塞性疾病、腦梗塞等）由于血管的狹窄阻塞或先天性異常，導(dǎo)致其供應(yīng)器官或組織的缺血、缺氧甚至萎縮壞死。隨著血管重建術(shù)和介入手術(shù)的開(kāi)展，許多患者的病情得到了控制，但是由于病變血管的解剖關(guān)系及其分布使一部分手術(shù)難以實(shí)施，患者病情惡化。因此，新的治療措施亟待發(fā)現(xiàn)。Folkman提出了應(yīng)用血管新生療法治療動(dòng)脈缺血。血管新生療法即通過(guò)應(yīng)用血管生長(zhǎng)因子或其基因，促進(jìn)缺血組織的血管新生和側(cè)支血管形成，使缺血得到改善的新的治療方法。各種內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子在血管新生過(guò)程中起著很重要的作用。目前研究較多的有血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF）、肝細(xì)胞生長(zhǎng)引(HGF）和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF）等。HGF能有效地促進(jìn)血管的新生和抑制細(xì)胞凋亡，且不引起組織水腫等副作用，成為基因治療的理想選擇。而且實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，分別在患有動(dòng)脈硬化閉塞(ASO）的患者(不伴有冠心病、充血性心衰、心律失常及肝、腎、肺功能障礙）的病變部位及非病變部位取材，測(cè)量血管HGF的濃度，病變部位HGF的濃度顯著降低，因?yàn)镠GF有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞生成及促有絲分裂的作用，所以血管HGF系統(tǒng)下調(diào)可能與周?chē)芗膊“l(fā)病機(jī)制有關(guān)。ASO患者病灶處血管HGF生成減少可能由于缺氧引起，缺氧在體內(nèi)和體外都對(duì)HGF有較強(qiáng)的抑制作用。HGF屬于Kringle蛋白家族成員，可以介導(dǎo)蛋白與蛋白之間、蛋白與細(xì)胞之間的相互作用，有控制血栓形成的作用。局部HGF生成減少可以造成微循環(huán)紊亂[4]。由此可見(jiàn)，局部組織的缺血、缺氧可以抑制HGF的產(chǎn)生，而HGF生成減少又可以引起局部微循環(huán)紊亂，加重局部的缺氧，形成惡性循環(huán)。HGF的補(bǔ)充治療方法不僅可以促進(jìn)側(cè)支血管的生成，增加組織灌注，而且可以打斷惡性循環(huán)過(guò)程，達(dá)到治療的目的。近來(lái)，有關(guān)HGF治療各種缺血性疾病的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在國(guó)內(nèi)外廣泛開(kāi)展，某些地區(qū)已進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)階段，而且取得了較好的短期效果。

1 HGF作用

1.1 促進(jìn)側(cè)支血管的新生 血管形成主要分為兩種類(lèi)型：一種是在胚胎期，由血管母細(xì)胞通過(guò)原位分化增值形成初步的血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，即血管發(fā)生；另一種稱(chēng)為血管新生，首先發(fā)生血管擴(kuò)張及通透性增加，然后經(jīng)血管基底膜酶解，血管內(nèi)皮細(xì)胞活化、增殖、遷移、血管腔形成，平滑肌細(xì)胞的作用等多個(gè)步驟有序協(xié)調(diào)地完成，最后形成新生血管網(wǎng)[5]。HGF的受體是由前癌基c-met編碼，受體c-Met主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞的細(xì)胞膜上，HGF本身可以刺激受體c-Met水平上調(diào)，激活自分泌反饋環(huán)路[6]，且其促血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂的活性是生長(zhǎng)因子中最強(qiáng)的[7]。HGF上調(diào)受體c-Met后通過(guò)一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，使血管內(nèi)皮細(xì)胞生成和遷移及血管平滑肌細(xì)胞遷移，從而促進(jìn)側(cè)支血管新生。組織缺血可以為HGF發(fā)揮上調(diào)受體c-Met創(chuàng)造有利環(huán)境。HGF還可以通過(guò)刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌VEGF間接引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的生成，發(fā)揮側(cè)支血管新生的作用。此外，HGF 還可以通過(guò)PI3K/Akt途徑和MAPK途徑磷酸化eNOs(內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶），這兩條途徑可以相互影響，從而有效促使NO生成迅速增多，NO為內(nèi)皮細(xì)胞來(lái)源的血管舒張因子，也參與了血管新生過(guò)程[8]。

1.2 抗凋亡的作用 HGF阻斷細(xì)胞凋亡是通過(guò)MAPK途徑[9]和磷脂酰肌醇三激酶/Akt途徑[10]，并能使Bcl-2和BclxL水平上調(diào)，Bcl-2和Bcl-xL均有抑制凋亡的作用，從而發(fā)揮對(duì)神經(jīng)、心肌、骨骼肌的保護(hù)作用。

1.3 神經(jīng)保護(hù)作用 HGF作為胚胎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的存活因素發(fā)揮作用，而且可以促進(jìn)交感神經(jīng)、副交感神經(jīng)及其前體的分化及軸突長(zhǎng)出，增強(qiáng)其存活能力[11]。HGF的多種功能及其與其它嗜神經(jīng)因子的協(xié)同作用說(shuō)明，HGF能增強(qiáng)發(fā)育中的神經(jīng)元對(duì)各種特殊信號(hào)的反應(yīng)能力。此外，在腦缺血模型中，可以增加側(cè)支血管的生成及抗凋亡作用，也有保護(hù)神經(jīng)的作用。正常情況下，HGF的神經(jīng)保護(hù)作用很有限，因?yàn)檠X屏障的存在，中樞神經(jīng)系統(tǒng)很難受到循環(huán)中的蛋白和肽的影響，為了克服這種限制，我們可以將HGF基因注入蛛網(wǎng)膜下腔，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HGF基因廣泛轉(zhuǎn)染入腦膜及血管外膜細(xì)胞，而沒(méi)有轉(zhuǎn)染入除腦以外的其它器官。轉(zhuǎn)染后，在腦脊液中發(fā)現(xiàn)HGF蛋白[17]。

1.4 促有絲分裂作用[2]HGF通過(guò)由細(xì)胞膜上c-met前癌基因編碼的酪氨酸激酶受體介導(dǎo)[4]。HGF還可以刺激體內(nèi)骨骼肌的再生，防止肌萎縮和肌纖維化，促進(jìn)胚胎器管生成，以及促進(jìn)由于多種損傷引起的組織、器官的修復(fù)等多種功能。有研究報(bào)道，術(shù)前注射HGF質(zhì)粒可以使肝硬化大鼠部分肝臟切除后存活率明顯升高[18]。

2 HGF制劑

現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)所用HGF大體上分為兩種，一種是含有重組HGF蛋白，另一種是含有HGF基因。HGF基因療法要優(yōu)于重組HGF蛋白，HGF基因轉(zhuǎn)染一大優(yōu)點(diǎn)是它可以在局部持續(xù)表達(dá)HGF蛋白。應(yīng)用重組HGF蛋白需要將大量的肽注入體內(nèi)，可能對(duì)身體其它器官帶來(lái)副作用，此外，還需特殊儀器重復(fù)多次給藥，以維持局部較高的HGF濃度；而HGF基因轉(zhuǎn)染則可在需要的時(shí)間內(nèi)表達(dá)HGF蛋白，無(wú)需多次給藥。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠后肢缺血模型中，經(jīng)肌肉注射裸HGF質(zhì)粒DNA5周后，血管新生的程度明顯高于經(jīng)動(dòng)脈給重組HGF蛋白所引起的血管生成程度[22]。因此，近來(lái)HGF基因療法為更理想的選擇。

HGF基因制劑所用載體大體分為病毒載體和非病毒載體。（1）病毒載體：腺病毒，腺相關(guān)病毒，逆轉(zhuǎn)錄病毒等。缺點(diǎn)：靶向特異性差、可控性小、免疫原性高度、毒性大、安全性低、目的基因容量小。（2）非病毒載體：包括裸DNA、脂質(zhì)載體和陽(yáng)離子多聚體等。缺點(diǎn)：基因轉(zhuǎn)染率低、表達(dá)持續(xù)時(shí)間短且表達(dá)量不高，大劑量使用時(shí)有細(xì)胞毒性。

3 給藥途徑

在不同的缺血性疾病中，給藥途徑不同，同一種疾病可以有多種給藥途徑。

3.1 心肌缺血 在急性的心肌缺血時(shí)，HGF基因及其載體的引入可以通過(guò)開(kāi)放手術(shù)或經(jīng)皮導(dǎo)管介入方法，經(jīng)心肌注射在開(kāi)放手術(shù)及經(jīng)皮介入術(shù)中均較易實(shí)施。注射區(qū)域可以通過(guò)在開(kāi)放手術(shù)中直視或在經(jīng)皮導(dǎo)管介入術(shù)時(shí)評(píng)價(jià)無(wú)收縮功能的心肌區(qū)域來(lái)確定。

3.2 腦缺血 基于HGF基因及其載體很難通過(guò)血腦屏障，一般采取鞘內(nèi)注射，將HGF基因及其載體注入蛛網(wǎng)膜下腔。

3.3 周?chē)芗膊?現(xiàn)多采用經(jīng)缺血部位的骨骼肌注射，也可以經(jīng)動(dòng)脈或靜脈注射，如股動(dòng)脈閉塞時(shí)，可以經(jīng)髂內(nèi)動(dòng)脈給藥。

4 檢測(cè)方法

HGF的促使側(cè)支血管的新生和抑制細(xì)胞凋亡成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于缺血性疾病的治療。在實(shí)驗(yàn)研究中，對(duì)HGF、HGF受體及其這兩方面的作用常用的檢測(cè)方法如下。

4.1 對(duì)HGF及其受體的檢測(cè) 可采用Western Blotting、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA）及免疫組化染色，利用HGF蛋白及c-Met蛋白的抗體都可以測(cè)定HGF及其受體的表達(dá)情況，還可通過(guò)定量的反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)測(cè)定HGFmRNA，間接評(píng)定HGF的表達(dá)情況。

4.2 對(duì)HGF促血管生成作用的檢測(cè) （1）微血管造影術(shù)；（2）激光多普勒血流分析；（3）在心肌缺血實(shí)驗(yàn)時(shí)，可以采用微滴分析；（4）采用免疫組化染色的方法，主要是利用血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記Von Willebrand’s Factor或第Ⅷ因子的單克隆抗體測(cè)定。以此來(lái)測(cè)定血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)。

4.3 對(duì)HGF抗凋亡作用的檢測(cè) 可采用TUNEL(Terminal dUTP nick end-labeling）分析來(lái)測(cè)定凋亡細(xì)胞百分比。也可以通過(guò)Western Blotting)用Bcl-2和Bcl-xL多克隆抗體測(cè)定)，HGF可以使Bcl-2和Bcl-xL水平上調(diào)，而B(niǎo)cl-2和Bcl-xL均有抑制凋亡的作用。

5 HGF與VEGF的區(qū)別

VEGF(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子）作為血管滲透因子和血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原被大家所熟知，VEGF血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性已經(jīng)被認(rèn)為在治療性的血管新生中發(fā)揮著重要作用，作為內(nèi)皮細(xì)胞重要的細(xì)胞元素負(fù)責(zé)新血管的生成。而且HGF為分泌型蛋白，有信號(hào)肽序列，即使基因轉(zhuǎn)移的效率較低也可以發(fā)揮明顯的生物學(xué)效應(yīng)。試驗(yàn)和臨床都已證實(shí)VEGF有促進(jìn)血管新生的作用，效果令人滿(mǎn)意。

HGF與VEGF同是血管生長(zhǎng)因子，但有所不同：（1）VEGF基因治療缺血性疾病(如腦缺血、下肢動(dòng)脈缺血）可以引起組織水腫，而HGF基因治療則無(wú)此副作用?？赡苡捎谘芷交〖?xì)胞上存在著受體c-Met，HGF能引起血管平滑細(xì)胞的遷移而不引起其增生；而血管平滑肌上缺乏VEGF受體，VEGF既不能引起平滑肌細(xì)胞的遷移，也不能引起其增殖，致使新生的血管延期成熟。與此相反，HGF能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞及血管平滑肌細(xì)胞的遷移，新生血管較早成熟，因而避免血管內(nèi)的物質(zhì)滲漏。（2）在人動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中，HGF較VEGF有較強(qiáng)的促有絲分裂的作用[12]。（3）HGF基因及其受體c-met大量存在于心臟和血管內(nèi)皮細(xì)胞上，所以，我們推測(cè)HGF較VEGF有更強(qiáng)的促血管新生的作用。（4）HGF還可以通過(guò)PI3K/Akt途徑和MAPK途徑磷酸化eNOs(內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶），這兩條途徑可以相互影響，HGF能更有效促使NO生成及eNos的磷酸化[7]，NO有較強(qiáng)的擴(kuò)血管作用，也參與了血管新生過(guò)程，因此，HGF更能增加缺血組織的灌注。（5）HGF可以提高細(xì)胞相關(guān)基質(zhì)降解酶(MMP-1等）水平，并能提高機(jī)體生成血纖維蛋白溶酶(uPA）能力[13]。HGF在局部誘導(dǎo)uPA數(shù)量增多，uPA能有效地給靶細(xì)胞提供HGF，為組織微環(huán)境創(chuàng)造良好條件。

已有報(bào)道，在心肌缺血模型中，低氧可以使受體c-met水平上調(diào)，從而增強(qiáng)了HGF的促血管生成效應(yīng)。

6 HGF與腫瘤的關(guān)系

到目前為止，應(yīng)用HGF基因療法沒(méi)有記載過(guò)新生血管的任何結(jié)構(gòu)和功能的異常，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織器官的瘤樣改變，以及在治療過(guò)程中其它的副作用，但是肺癌患者受體c-Met和HGF基因有異常表達(dá)[14]。HGF可以提高癌細(xì)胞(包括肺癌細(xì)胞）的侵襲能力[15]及促血管生成作用，可能加速病人潛在惡性病灶的生長(zhǎng)和加速糖尿病病人的視力惡化等，因此，HGF的過(guò)度表達(dá)是否會(huì)促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)引起大家的關(guān)注。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：先在小鼠皮內(nèi)接種A431使其背部長(zhǎng)有上皮來(lái)源的腫瘤，這種腫瘤細(xì)胞上表達(dá)受體c-Met，然后將HGF質(zhì)粒DNA注入大腿部的肌肉內(nèi)，觀察到的結(jié)果是只有大腿肌肉內(nèi)的HGF的濃度增高，而在血液中的HGF濃度沒(méi)有增高。雖然在體外HGF可以刺激A431細(xì)胞生長(zhǎng)，但在小鼠后肢暫時(shí)局部的HGF升高對(duì)腫瘤生長(zhǎng)毫無(wú)影響[16]。

7 臨床應(yīng)用

7.1 腦缺血 由于腦動(dòng)脈粥樣硬化及Moyamoya病造成腦梗塞常常會(huì)引起大腦半球的缺血，并伴有神經(jīng)病理學(xué)的改變(如癡呆）。缺血可以代償性地引起病灶部位血管生成，尤其是在缺血半暗帶，然而，血管新生的自然過(guò)程不足以緩解缺血組織的低灌注，雖然許多血管生長(zhǎng)因子(如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、HGF、VEGF等）都有促進(jìn)側(cè)支血管生成的作用，但是神經(jīng)元對(duì)缺血缺氧極其敏感，單純刺激側(cè)支血管新生不足以治療腦缺血，位于海馬CA1區(qū)的錐形神經(jīng)元對(duì)腦缺血最為敏感，一過(guò)性阻斷沙鼠單側(cè)頸動(dòng)脈血流，其在恢復(fù)循環(huán)的幾天后開(kāi)始死亡，因此，防止神經(jīng)元延期死亡有一定治療意義?？紤]到腦缺血損傷的各個(gè)方面，其理想的治療方法應(yīng)該既可以增加側(cè)支血管形成，又可以防止神經(jīng)細(xì)胞的死亡。HGF既可以促進(jìn)血管新生，又有神經(jīng)保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)研究表明，在鼠腦缺血模型中，將含有HGF基因的HVJ包被的脂質(zhì)體注入蛛網(wǎng)膜下腔，24小時(shí)后，與對(duì)照組相比，腦組織壞死面積顯著減少，梗塞部位及未損傷部位毛細(xì)血管密度均顯著增多，并且沒(méi)有腦水腫及血腦屏障的破壞[17]。因此，HGF基因治療可能成為腦缺血治療的新方法。

7.2 心肌缺血 冠狀動(dòng)脈的狹窄、閉塞可以引起其供應(yīng)心肌的缺血，甚至壞死。我們已經(jīng)注意到心肌梗塞的患者血漿HGF水平增高，可能是對(duì)缺血部位持續(xù)低灌注的保護(hù)性反應(yīng)，而病灶部位HGF的水平卻下降，可能是反應(yīng)不良。在病灶部位增加HGF的分泌可以減小心室的擴(kuò)張程度，增加缺血心肌的灌注[19]。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)扎鼠的冠狀動(dòng)脈左前降支，分別經(jīng)左室游離壁心肌注射Adeno-HGF和Adeno-Null，免疫吸附實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在注射6周后，85%的左室游離壁心肌有大量HGF蛋白表達(dá)；血液動(dòng)力學(xué)發(fā)現(xiàn)，與Adeno-Null組相比，Adeno-HGF組心肌收縮功能顯著增強(qiáng)；在形態(tài)學(xué)上，Adeno-HGF組的左室形態(tài)改變較小，左室擴(kuò)張程度明顯降低，變薄的左室游離壁心肌范圍也明顯縮小。近來(lái)，還有學(xué)者報(bào)道，轉(zhuǎn)染HGF基因能夠減緩壓力超負(fù)荷所致的大鼠左室增大及心肌纖維化，提示HGF具有抗心肌重塑作用[20]。與此同時(shí)，Adeno-HGF 治療組毛細(xì)血管密度也明顯高于對(duì)照組，而凋亡細(xì)胞百分比卻明顯下降，Bcl-2和Bcl-xL水平上調(diào)[19]。HGF對(duì)心肌功能的保護(hù)作用可能是通過(guò)其促血管新生和抗凋亡兩方面作用實(shí)現(xiàn)的，缺血部位的心肌細(xì)胞可能會(huì)由于持續(xù)發(fā)展的供血不足而死亡或失去功能，而在缺血區(qū)域血管的新生，可以挽救大部分可能丟失的心肌。實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)證實(shí)，心肌缺血后的再灌注有利于心室的重塑和心肌功能的改善[21]，心肌梗死后早期，缺血部位很多心肌細(xì)胞雖然可以見(jiàn)到，但由于缺血處于低功能或無(wú)動(dòng)能狀態(tài)，早期促使血管生成是非常有效的。心肌梗死后心室的重塑(包括心室的擴(kuò)張和室壁的變?。┦且粋€(gè)必然的過(guò)程，而心室重塑過(guò)程多伴隨著心肌細(xì)胞的死亡，HGF能有效地抑制細(xì)胞的死亡， 特別是抑制凋亡細(xì)胞的死亡，在減弱心肌缺血后的損傷中發(fā)揮著重要作用。HGF治療組Bcl-2和Bcl-xL水平上調(diào)，Bcl-2和Bcl-xL均有抗凋亡作用。心肌缺血損傷后，HGF的抗凋亡作用可以抑制細(xì)胞的死亡和心室重構(gòu)，以及保護(hù)心肌功能。由于在急性的心肌梗死時(shí)轉(zhuǎn)染HGF基因，HGF基因不會(huì)立刻表達(dá)，所以，與心臟的介入治療結(jié)合，對(duì)急性的心肌梗死效果更佳。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，豬冠狀動(dòng)脈結(jié)扎模型局部HGF濃度低下，通過(guò)HGF基因?qū)胙a(bǔ)充治療，可誘導(dǎo)明顯的血管新生，此時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞增加達(dá)8倍，通過(guò)HGF引起的血流增加50%[23]。

7.3 周?chē)芗膊?局部HGF濃度下降，可能與周?chē)芗膊“l(fā)病機(jī)制有關(guān)。應(yīng)用血管生長(zhǎng)因子促進(jìn)側(cè)支血管的生成治療周?chē)芗膊∫褟V泛報(bào)道，并取得了較好的短期臨床效果。隨著人口老齡化，臨界性或重癥肢體缺血(CLI）的發(fā)病率逐年上升，其中一部分人由于解剖關(guān)系或閉塞血管的分布不能通過(guò)血管重建或介入方法治療，致使病情惡化，有較強(qiáng)的致殘率。近來(lái)，采用干細(xì)胞移植取得了一定的效果，但干細(xì)胞的提取、純化較困難，而且存在著不穩(wěn)定因素。因此，新的治療措施亟待發(fā)現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，分離切除兔股動(dòng)脈及其分支10天后，分別經(jīng)骨骼肌注射裸HGF質(zhì)粒DNA及空質(zhì)粒，30天后，與對(duì)照組相比，HGF基因治療組缺血部位側(cè)支血管明顯增加，并伴有HGF蛋白的表達(dá)，激光多普勒血流分析顯示缺血部位血流、缺血部位血壓與正常部位血壓之比均顯著增加[24]。因此，HGF基因治療給許多CLI患者帶來(lái)了新的希望。

此外，HGF基因還被引入到了嚴(yán)重的肺血管減少性疾病[25]及腎缺血[26]等的治療中，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都取得了較好的效果。雖然如此，我們也應(yīng)該意識(shí)到我們對(duì)HGF促血管生成及抗調(diào)亡等作用的機(jī)理了解得十分有限，在諸多方面還有不同見(jiàn)解，但是，HGF基因治療給臨床治療缺血性疾病提供了新的方法，只要進(jìn)一步提高HGF基因的純化和導(dǎo)向技術(shù)，改善基因載體的轉(zhuǎn)然效率，提高基因表達(dá)信號(hào)傳導(dǎo)的可控性，HGF基因一定能為缺血性疾病患者帶來(lái)福音。

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