張錫蓮
(江西省貴溪市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西 貴溪 335400)
匹拉米洞法潛血試驗(yàn)是基于血紅蛋白中亞鐵血紅素有類過(guò)氧化物酶的作用[1],能還原過(guò)氧化氫為水,使供氫體無(wú)色還原型匹拉米洞氧化成紫色的化合物的化學(xué)性潛血試驗(yàn)。匹拉米洞法、聯(lián)苯胺法均為中度靈敏的潛血試驗(yàn)化學(xué)方法,為臨床多用方法,但聯(lián)苯胺法因有致癌作用而被淘汰[2],潛血試驗(yàn)的免疫學(xué)方法雖然特異性和敏感性都高,但用于胃液的潛血試驗(yàn)時(shí),會(huì)受胃酸的影響,在pH 1~2時(shí)可能會(huì)使抗原失去活性,而出現(xiàn)假陰性,不適宜用于胃液的潛血試驗(yàn)[3]?;谶@些因素,我院選用了匹拉米洞法做胃液的潛血試驗(yàn)。但胃酸是否對(duì)匹拉米洞法有影響,卻未見(jiàn)相應(yīng)的報(bào)道,所以此文就以胃酸對(duì)胃液匹拉米洞法潛血試驗(yàn)的影響進(jìn)行研究。
1.1 儀器與試劑 F-6124半自動(dòng)生化分析儀 (德國(guó)倍肯公司)、ZX38788 型 20~100μl和 100~1000μl可調(diào)定量加樣器(芬蘭)、匹拉米洞試劑按全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行配制。鹽酸為實(shí)驗(yàn)用1mol/L鹽酸,蒸溜水為二次蒸溜水。
1.2 標(biāo)本 以血紅蛋白濃度為120g/L的定值全血用蒸溜水先進(jìn)行439.5倍稀釋成血紅蛋白濃度為273 mg/L的初始標(biāo)本(經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的稀釋,血紅蛋白的最終濃度為2.73mg/L[4])。
1.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程 操作過(guò)程見(jiàn)表1。
表1 各管的操作方法
從表2可以看出當(dāng)胃酸濃度達(dá)0.1mol/L,也就是pH=1時(shí),該方法的靈敏度最高,而繼續(xù)升高達(dá)0.15mol/L,也就是pH=0.82時(shí),靈敏度僅為不含胃酸時(shí)的三分之一,并隨著胃酸濃度的增加,靈敏度逐漸降低,如果是以肉眼判斷,則有可能呈現(xiàn)假陰性的結(jié)果。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因可能是亞鐵血紅素在強(qiáng)酸環(huán)境中的類過(guò)氧化物酶作用發(fā)生改變。
表2 各管的試驗(yàn)結(jié)果
綜上所述用該方法檢測(cè)一般的胃液是可行的(正常胃液pH 0.9~1.8,胃酸濃度上限為0.13mol/L[5]),其允許胃酸濃度上限較抗體膠體金法高(抗體膠體金法在低濃度鹽酸0.24mmol/L時(shí)即出現(xiàn)假陰性[6]),此免疫學(xué)方法可能由于在酸性壞境中血紅蛋白作為抗原發(fā)生變性所致。但胃出血患者往往因胃酸過(guò)多引起,胃酸過(guò)多的患者,其胃酸分泌量可達(dá)正常人的6倍[7],很有可能超過(guò)0.15 mol/L,這時(shí)應(yīng)用該方法將導(dǎo)致假陰性。為避免這種情況的發(fā)生,當(dāng)胃液高度可疑潛血陽(yáng)性而出現(xiàn)陰性的結(jié)果時(shí),或者對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,或者用堿調(diào)節(jié)其pH至可測(cè)定范圍,再進(jìn)行檢測(cè)。
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