PT衍生的纖維蛋白濃度測(cè)定及臨床應(yīng)用

曾文坦，周宇丹，肖永輝

(廣東中山東鳳醫(yī)院，廣東 中山 528425)

PT衍生的Fg法，其原理是在檢測(cè)PT的同時(shí)通過測(cè)定凝固終點(diǎn)和起始點(diǎn)光散射強(qiáng)度的差值來推測(cè)出Fg的濃度，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)前必須用定標(biāo)液進(jìn)行定標(biāo)，生成由不同已知Fg濃度與相應(yīng)的光散射差值關(guān)系(兩者成正比)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，所以PT衍生的Fg法不僅節(jié)省時(shí)間，節(jié)省試劑，而且是一種非?？茖W(xué)準(zhǔn)確的測(cè)定方法，而并非簡(jiǎn)單利用PT結(jié)果“計(jì)算出來”或“演算出來”。文章采用PT衍生的Fg法對(duì)110例病人血漿纖維蛋白原濃度進(jìn)行測(cè)定，并與傳統(tǒng)的克勞斯法進(jìn)行比較，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象 臨床標(biāo)本來源于隨機(jī)抽取的110例住院和門診血漿標(biāo)本 (其中纖維蛋白原值＜2.0g/L25例，纖維蛋白原值＞4.5g/L35例，纖維蛋白原值大于2.0g/L小于4.5g/L 50例)，所有標(biāo)本采用真空采血管1:9枸櫞酸鈉(109mmol/L)抗凝，均在標(biāo)本采集2h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2 儀器和試劑

1.2 .1儀器 儀器采用美國(guó)Beckman Coulter公司生產(chǎn)的ACL ELIETE血凝分析儀。

1.2 .2 試劑 PT試劑 (ISI=1.21，批號(hào)N0402348)和FIB試劑 (批號(hào) N0301888)以及質(zhì)控物 (批號(hào)N0201558)和校準(zhǔn)液(批號(hào) E0686661)均為 Beckman Coulter公司提供的原裝配套產(chǎn)品。

1.3 方法 標(biāo)本采集后3000r/min離心10min，嚴(yán)格按照儀器和試劑操作規(guī)程進(jìn)行操作。在ACL ELIETE凝血儀上分別用PT衍生法和Clauss法對(duì)110例標(biāo)本進(jìn)行纖維蛋白原濃度測(cè)定。

2 結(jié)果

2.1 PT衍生的Fg法和Clauss法的重復(fù)性試驗(yàn)；分別用兩種方法對(duì)兩分標(biāo)本(混合血漿標(biāo)本)各進(jìn)行十次測(cè)定，兩種方法的檢測(cè)結(jié)果表明,高值變異系數(shù)分別為4.66%和2.72%，低值標(biāo)本變異系數(shù)分別為4.93%和3.28%都比較小，說明兩種方法的重復(fù)性較好。結(jié)果如表1。

2.2 采用PT衍生法和Clauss法測(cè)定110例標(biāo)本(纖維蛋白原值＜2.0g/L25例，纖維蛋白原值＞4.5g/L35例，纖維蛋白原值大于2.0g/L小于4.5g/L50例)的纖維蛋白原濃度進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)兩種方法的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)分析和t檢驗(yàn)，兩種方法相關(guān)性較好，但PT衍生法結(jié)果偏高，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果如表2。

表1 PT衍生的FIB法和Clauss法的重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果(CV%)

3 討論

目前測(cè)定血漿纖維蛋白原的方法主要有理化方法(熱/鹽沉淀法)、凝固法和免疫學(xué)方法，其中凝固法應(yīng)用最多、最廣。Clauss法是在凝血酶作用下，使待測(cè)血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，血漿中纖維蛋白原的含量與凝固時(shí)間成負(fù)相關(guān)，檢測(cè)結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出纖維蛋白原的含量。Clauss法是NCCLS推薦的纖維蛋白原常規(guī)測(cè)定方法[1]。PT衍生的纖維蛋白原測(cè)定法其原理是：在檢測(cè)PT的同時(shí)，通過測(cè)定凝固終點(diǎn)和起始點(diǎn)光散射強(qiáng)度的差值來推測(cè)出纖維蛋白原的濃度。

表2 PT衍生法和Clauss法測(cè)定病人結(jié)果比較

該實(shí)驗(yàn)采用兩種方法檢測(cè)血漿纖維蛋白原的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)兩種方法結(jié)果有一定的差別，Clauss法結(jié)果相對(duì)偏低，與尹娟等[2，3]報(bào)道一致。兩種方法測(cè)定結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性意義，相關(guān)性較好，但PT衍生法在疾病狀態(tài)下，由于溶栓過程中早、中期FDPs產(chǎn)物X、Y片段可產(chǎn)生一定的濁度影響比濁。相比之下，PT衍生法可以節(jié)省時(shí)間和試劑，但結(jié)果較Clauss法偏高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.01，另外在準(zhǔn)確度與重復(fù)性方面Clauss法要優(yōu)于PT衍生法。因此運(yùn)用PT衍生法測(cè)定血漿纖維蛋白原濃度時(shí)，如果結(jié)果超出正常參考范圍，要采用Clauss法復(fù)查血漿纖維蛋白原濃度。

[1]National Committee for Clinical Laboratory Standards H30-Aprocedure for the determination of fibrinogen in plasma;Approved Guideline[S].Pennsylvania:NCCLS,1999:99.

[2]尹 娟,李 荔,王曉紅.PT-衍生法和克勞斯法測(cè)定FIB的比較[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2007,7(22):5235-5236.

[3]蘇加云.纖維蛋白原測(cè)定測(cè)定方法的探討及臨床應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(23):1438-1439.