飼料中添加女貞子對鏡鯉生長性能、消化酶活性以及肌肉品質的影響

唐玲,徐奇友,許紅,王常安,王洋,張桐

(1.中國水產(chǎn)科學研究院黑龍江水產(chǎn)研究所,黑龍江哈爾濱150070;2.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院,上海201306)

飼料中添加女貞子對鏡鯉生長性能、消化酶活性以及肌肉品質的影響

唐玲1、2,徐奇友1,許紅1,王常安1,王洋1、2,張桐1、2

(1.中國水產(chǎn)科學研究院黑龍江水產(chǎn)研究所,黑龍江哈爾濱150070;2.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院,上海201306)

研究了飼料中添加女貞子Ligustrum lucidum對鏡鯉Cyprinus carpio var.Specularis的生長性能、消化酶活性及肌肉品質的影響。試驗共設5個處理組:A組為基礎飼料空白對照組;B組,在基礎飼料中添加200 mg/kg的大蒜素(純度為25%);C、D、E組,在基礎飼料中分別添加質量分數(shù)為0.5%、1.0%、1.5%的女貞子粉。每個處理組設置3個重復,每個重復組放10尾魚(初始體質量為125.55 g±19.14 g)。試驗共進行12周。結果表明:與空白組相比,添加女貞子粉試驗組鏡鯉的特定生長率和增重率顯著降低(P＜0.05);女貞子粉對鏡鯉中腸和后腸消化酶的活性均沒有顯著影響(P＞0.05);除D組外,其它試驗組鏡鯉前腸淀粉酶的活性顯著提高(P＜0.05);各試驗組鏡鯉前腸蛋白酶的活性均無顯著差異(P＞0.05);女貞子試驗組鏡鯉肌肉的持水能力和D組的pH1值顯著降低(P＜0.05),對肌肉營養(yǎng)成分無顯著影響。

鏡鯉;女貞子;生長性能;消化酶活性;肌肉品質

近年來,隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)規(guī)?；⒓s化的普及,養(yǎng)殖中所使用的水產(chǎn)動物飼料添加劑種類和數(shù)量(抗生素、促生長劑、化學合成物)不斷增加,一些具有副作用的添加劑既危害人類健康,又污染環(huán)境。尋找能替代抗生素、激素的無公害綠色飼料添加劑已成為生產(chǎn)無公害水產(chǎn)品的當務之急[1]。中藥女貞子系木犀科植物女貞子Ligustrum lucidum的干燥成熟果實,是中國傳統(tǒng)的扶正固本藥物,分布較廣,主要產(chǎn)于華東、中南、西南等地區(qū)。《神農(nóng)本草經(jīng)》將女貞子列為上品,謂其“味苦平,主補中,安五臟,養(yǎng)精神,除百病”。李時珍謂其“果實強陰健腰膝,變白發(fā),明目”?！吨袊幍洹?005版記載其功能與主治“滋補肝腎,明目烏發(fā)。用于眩暈耳鳴,腰膝酸軟,須發(fā)早白,目睛不明”[2]。女貞子中含有多種化學成分:齊墩果酸、木樨草素-葡萄糖苷、槲皮苷、甘露醇及己六醇等,另外還含有多糖、揮發(fā)油及多種微量元素等[3]。據(jù)石莎莉等[4]報道,飼料中添加質量分數(shù)為0.5%和1.0%的女貞子能促進產(chǎn)蛋雞生長性能和提高免疫能力。馬得瑩等[5]的研究表明,飼料中添加質量分數(shù)為1.0%的女貞子能顯著提高產(chǎn)蛋雞的抗應激能力和產(chǎn)蛋率。目前關于飼料中添加女貞子對水產(chǎn)動物影響的研究尚未見報道。本試驗中,作者用添加女貞子的飼料飼喂鏡鯉Cyprinus carpio var.Specularis 12周,研究了女貞子對鏡鯉的生長性能、消化生理以及肉質的影響,旨在為綜合評價女貞子對鏡鯉的藥用價值和營養(yǎng)價值,為開發(fā)和利用女貞子提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用鏡鯉取自黑龍江水產(chǎn)研究所松浦實驗站,體質量為(125.55±19.14)g。

女貞子購于哈爾濱中藥材批發(fā)市場。經(jīng)測定,女貞子中粗蛋白質、粗脂肪和粗灰分的質量分數(shù)分別為8.15%、12.41%和5.49%。

1.2 方法

1.2.1 試驗設計及日糧組成 試驗前先將300尾

大小相近、體質健康的鏡鯉暫養(yǎng)兩周,開始試驗前停食24 h,稱量每尾魚的體質量并測定體長。選擇120 g左右的鏡鯉150尾,隨機放到水族箱(100 cm×50 cm×50 cm)中。試驗分為5組:A組為基礎飼料空白對照組;B組,在基礎飼料中添加200 mg/kg的大蒜素(純度為25%);C、D、E組,在基礎飼料中分別添加質量分數(shù)為0.5%、1.0%、1.5%的女貞子粉。每組設3個重復,每個重復組放10尾魚。基礎飼料的配方(均為質量分數(shù),%)為次粉42.00,魚粉6.00,豆粕17.50,棉粕12.50,玉米蛋白12.00,豆油+魚油4.00, NaH2PO42.00,羧甲基纖維素鈉0～1.50,添加劑0～1.50,微量元素0.20,維生素0.30,膽堿0.20,MgSO40.30。

每千克日糧微量元素和維生素預混料中包括:維生素C 0.1 mg,維生素E 60 mg,維生素K 5 mg,維生素A 15 000 IU,維生素D33 000 IU,維生素B115 mg,維生素B230 mg,維生素B615 mg,維生素B120.5 mg,Fe 25 mg,Cu 3 mg,Mn 15 mg, I 0.6 mg,Mg 0.7 g,煙酸175 mg,葉酸5 mg,肌醇1 000 mg,生物素2.5 mg,泛酸鈣50 mg,防霉劑0.05 mg。

基礎飼料的營養(yǎng)成分(均為質量分數(shù)):粗蛋白29.01%,粗脂肪5.21%,粗灰分5.54%,Ca 0.59%,P 1.11%,Lys 1.43%,Met 0.42%。

將飼料原料充分混勻后用絞肉機制成5 mm左右的顆粒,置于陰涼通風處晾干,室溫下保存待用。飼養(yǎng)試驗共進行12周,每兩周稱量一次試驗魚的體質量。每天投喂2次(9:00和15:00),按魚體質量的3%投餌。試驗在黑龍江水產(chǎn)研究所水產(chǎn)車間室內(nèi)循環(huán)的水族箱中進行,24 h不間斷充氣供氧。每天換水量為1/2,注入已曝氣處理的自來水。試驗期間,水溫為24℃左右,溶氧為5.5～6.5 mg/L。

1.2.2 樣品采集及分析 飼養(yǎng)試驗結束停食24 h后采樣,每一個處理組隨機取12尾魚,稱量每尾魚的體質量并測定體長。解剖魚體腹部取出內(nèi)臟,分別將腸道、肝胰臟、脾臟、腎臟剝離出來,用質量分數(shù)為0.65%的生理鹽水沖洗,用吸水紙將表面液體吸干,稱重并分別計算臟器指數(shù)。將腸道分離成前、中、后腸三段,加入預冷的生理鹽水,按1∶9稀釋,用高速勻漿機勻漿,再以4 000 r/min離心15 min,棄沉淀,將組織上清液于-40℃下保存,用于測定消化酶的活性。剝?nèi)ヴ~體表面魚皮,取兩側背肌用于營養(yǎng)成分和肉質的測定。

1.2.3 指標的測定方法 腸道消化酶活性的測定:用雙縮脲試劑測定酶液中總蛋白質的含量;用碘-淀粉比色法測定淀粉酶的活性;用福林-酚法測定蛋白酶的活性;用甘油三酯被分解濁度減低法測定脂肪酶的活性。

淀粉酶活力單位的定義:組織中每毫克蛋白在37℃下與底物作用30 min,水解10 mg淀粉為1個淀粉酶活力單位。

蛋白酶活力單位的定義:在37℃下每分鐘水解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸為一個酶活力單位。

脂肪酶活力單位的定義:在37℃條件下,每毫克蛋白在反應體系中與底物反應1 min,每消耗1 μmol底物為一個酶活力單位。

肌肉品質的測定:采用105℃烘箱干燥法測定肌肉中的初水分;用凱氏定氮法(總氮×6.25)測定粗蛋白質含量;用索氏抽提法(以乙醚為抽提液)測定粗脂肪含量;用馬福爐灼燒法(550℃)測定粗灰分含量。

將新鮮魚肉用質量分數(shù)為0.65%的生理鹽水按1∶9稀釋,然后用高速勻漿機粉碎成糜爛狀,用pHS-25型pH計測定肉樣的pH(記為pH1),將余下的肉樣置于冰箱(4℃)中貯存24 h后再測定pH(記為pH24)。

用嫩度儀(型號CLM-3B)在肌肉相同部位進行剪切,測定肌肉的嫩度。每尾魚取1 g左右的肌肉先稱重(W1),然后放入鋪有吸水紙的一次性試驗管中,用離心機以3 500 r/min離心5 min,取出肌肉塊吸干表面水分稱重(W2),按以下公式計算持水能力:

1.3 計算公式及數(shù)據(jù)處理

生長指標與生物學性狀的計算公式如下:

增重率=(Wt-W0)/W0×100%,

肥滿度=Wt/L3t×100,

飼料系數(shù)=Wf/(Wt-W0),

蛋白質利用效率=(Wt-W0)/(Wf×P),

內(nèi)臟指數(shù)=Wv/Wt×100%,

其中:Wt為試驗結束時魚體質量(g);W0為試驗開始時魚體質量(g);Wf為飼料投喂總量(g); Wv為魚內(nèi)臟質量(g);Lt為試驗結束時的魚體體長(cm);P為飼料中所含蛋白質量分數(shù)(%);t

為飼養(yǎng)時間(d)。

試驗數(shù)據(jù)采用平均值±標準差表示,采用SPSS 11.5軟件進行統(tǒng)計分析,用Duncan’s進行多重比較。

2 結果

2.1 女貞子對鏡鯉生長性能的影響

從表1可見:對照組鏡鯉的終質量為286.31 g,特定生長率為0.98%/d,增重率為128.69%,大蒜素組(B組)與對照組均沒有顯著差異(P＞0.05),添加女貞子的3個試驗組(C、D、E組)鏡鯉試驗結束后體質量、特定生長率、增重率均顯著降低(P＜0.05),其增重率分別降低17.9%、 11.09%、15.95%;C、D、E組的飼料系數(shù)與對照組沒有顯著差異(P＞0.05),B組的飼料系數(shù)比對照組顯著降低(P＜0.05);各試驗組蛋白質利用率以及內(nèi)臟指數(shù)均無顯著差異(P＞0.05)。

表1 女貞子對鏡鯉生長性能的影響Tab.1 Effects of Fructus Ligustri Lucidi on growth performance in mirror carp

2.2 女貞子對鏡鯉消化酶活性的影響

女貞子對鏡鯉消化酶活性的影響結果見表2。從表2可見:飼料中添加女貞子對鏡鯉中腸和后腸消化酶活性均無顯著影響(P＞0.05),僅對前腸消化酶有影響,其中D組鏡鯉前腸淀粉酶活性與對照組沒有顯著差異(P＞0.05),C、E組前腸淀粉酶活性顯著提高(P＜0.05);各試驗組鏡鯉前腸的蛋白酶和脂肪酶活性與對照組均無顯著差異(P＞0.05)。

表2 女貞子對鏡鯉消化酶活性的影響Tab.2 Effects of Fructus Ligustri Lucidi on digestive enzyme activities in mirror carpU/mg

2.3 女貞子對鏡鯉肌肉品質的影響

女貞子對鏡鯉肌肉營養(yǎng)成分以及肉質的影響見表3。與對照組相比,各試驗組鏡鯉肌肉中的持水能力顯著降低(P＜0.05);D組鏡鯉肌肉的pH1值顯著降低(P＜0.05);各試驗組鏡鯉肌肉中的基本營養(yǎng)成分均無顯著差異(P＞0.05)。

3 討論

3.1 女貞子對鏡鯉生長性能的影響

女貞子中含有的多糖、維生素、揮發(fā)油、苷類、生物堿、有機酸等生物活性成分,可刺激畜禽生長,維持動物體內(nèi)環(huán)境正常平衡,從根本上保

護、協(xié)調畜禽的整體健康,調節(jié)體內(nèi)有益微生物群落,充分發(fā)揮和提高機體本身預防疾病的潛在能力。女貞子中含有氨基酸、礦物元素、蛋白質、未知生長調節(jié)因子等多種營養(yǎng)物質,可補充飼料的營養(yǎng)價值。從上述兩方面為動物生長提供營養(yǎng)物質,促進生長,提高生產(chǎn)性能。王安琪等[6]的研究表明,在飼料中添加質量分數(shù)為0.2%的女貞子提取物,能提高母雞的生產(chǎn)性能,提高產(chǎn)蛋率和入孵蛋重,通過母體營養(yǎng)調控提高雛雞早期的免疫功能。郭曉秋等[7]研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加質量分數(shù)為0.2%和0.4%的女貞子提取物,均可提高1～4周和5～7周肉仔雞的日增重,降低料肉比,但差異均不顯著。

表3 女貞子對鏡鯉肌肉品質的影響Tab.3 Effects of Fructus Ligustri Lucidi on muscle quality of mirror carp

本試驗結果表明,添加女貞子的試驗組未能促進鏡鯉的生長,這與以上報道不一致。由于女貞子在魚類飼料中的應用尚未見報道,因此本試驗添加劑量僅參考前人對畜禽的研究而設定。然而結果顯示,在飼料中添加質量分數(shù)為0.5%、1.0%、1.5%的女貞子粉并不能促進鏡鯉的生長,可能是由于女貞子的添加劑量超出了促進鏡鯉生長的范圍,也可能是由于女貞子中有效成分與飼料中某些營養(yǎng)成分發(fā)生了拮抗作用。如果飼料中添加女貞子的質量分數(shù)小于0.5%,是否會促進鏡鯉得生長,還有待進一步研究。

3.2 女貞子對鏡鯉消化酶活性的影響

本試驗結果表明,添加女貞子對鏡鯉消化道中腸和后腸消化酶活性各組均無顯著影響。僅對前腸消化酶有影響,其中C、E組(女貞子添加量為0.5%和1.5%)鏡鯉前腸的淀粉酶活性顯著提高。女貞子僅能提高前腸淀粉酶的活性,促進消化道中淀粉的消化,但由于魚體對糖類的利用效果不佳[8],因此并不能達到促進鏡鯉生長的效果?？傮w來說,女貞子未能提高消化酶活性,這可能與鏡鯉的體質、年齡及體質量等有關。由于水生動物生存環(huán)境的特殊性,其攝食要受天氣、溫度、水體環(huán)境等多種因素的影響[9]。

3.3 女貞子對魚體肌肉品質的影響

大量研究表明,女貞子可以顯著提高雞肉鮮味,改善雞肉口感。在基礎飼料中添加女貞子水提取物可改善肉雞的部分營養(yǎng)成分(蛋白質、脂肪),降低肉雞的腹脂率;飼料中添加質量分數(shù)為0.1%、0.2%的女貞子提取物,可緩解雞肉中pH的下降程度,而添加質量分數(shù)為0.4%的女貞子水提物可改善雞肉的剪切力[10]。王環(huán)宇[11]的研究結果表明,飼料中添加質量分數(shù)為0.2%的女貞子萃取物,可顯著增加雞肉中肌苷酸的含量,改善雞肉的風味和口感。

動物為了正常的生理活動必須建立具有適合酸堿度的體液環(huán)境,機體在代謝過程中,通過血液緩沖系統(tǒng)的作用調節(jié)體內(nèi)環(huán)境的pH值,使其維持在正常范圍。當動物放血后,其機體平衡被打破,血液緩沖系統(tǒng)逐漸失去作用,約1 h肌肉組織的pH值逐漸減低。這是由葡萄糖在酵解酶的作用下產(chǎn)生乳酸以及ATP在肌凝蛋白酶的作用下釋放出正磷酸引起的[12]。本試驗結果表明,添加女貞子并未能改善魚體的營養(yǎng)成分,反而顯著降低了肌肉的持水能力,D組(女貞子添加量為1.0%)鏡鯉肌肉的pH1值比其它試驗組顯著降低。這表明飼料中添加質量分數(shù)為1.0%的女貞子,其有效成分進入魚體之后可能加速了魚體肌肉的糖酵解以及ATP的分解,使肌肉的pH降低;在發(fā)生這些化學反應的同時也消耗了魚體內(nèi)的水分,從而使肌肉持水能力下降。這與以上的報道結果不一致?？赡苁怯捎谂懽拥某煞謴碗s,各種成分綜合發(fā)揮作用,且在不同季節(jié)、地區(qū)和不同時期采集的女貞子其有效成分相差很大,因而難以對其進行準確的藥效評

價[13-14]。加之前人報道的均是對畜禽的研究,對魚類的研究仍屬于探索性試驗。

女貞子作為天然植物添加劑對其水產(chǎn)動物的生長是否有促進作用,還有待進一步研究。

[1] 吳梅秀.中草藥在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應用前景[J].畜牧獸醫(yī)雜志, 2008,27(2):64-66.

[2] 楊曦,蔣桂華.女貞子的研究開發(fā)現(xiàn)狀與展望[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(12):2987-2990.

[3] 盧曉沅,陳志良,王春霞.女貞子化學成分及其藥理作用研究概況[J].中藥材,2006,29(6):625.

[4] 石莉莎,單安山,張瑋,等.女貞子對蛋雞育成期生長發(fā)育和免疫功能的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學學報,2009,40(10):79-84.

[5] 馬得瑩,單安山.女貞子、五味子、四君子湯、大豆黃酮和黃霉素對蛋雞脂質穩(wěn)定性的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2004,16(4): 39-43.

[6] 王安琪,單安山,陳鵬.日糧中女貞子提取物對母雞生產(chǎn)性能和子代新城疫抗體效價的影響[J].飼料工業(yè),2008,29(22):1 -3.

[7] 郭曉秋,單安山,趙云,等.女貞子水提物對AA肉仔雞抗氧化指標的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2007,19(1):81-85.

[8] 林浩然.魚類生理學[M].廣州:廣東高等教育出版社,2004.

[9] 伍莉,陳鵬飛,羅紹祿,等.不同添加劑對斑點叉尾鮰腸道蛋白酶、淀粉酶活力的影響[J].飼料研究,2002(1):4-7.

[10] 楊銀平,單安山.女貞子作為飼料添加劑應用于畜禽的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2009(6):76-77.

[11] 王環(huán)宇.女貞子萃取物對肉仔雞抗氧化機能及肉質風味的影響[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學,2007.

[12] 蘇建軍.肌肉pH的變化及其意義[J].肉類工業(yè),1997(2): 43-45.

[13] 鄭秋珊,徐奇友.紫丁香葉對史氏鱘生長及血漿生化指標的影響[J].大連水產(chǎn)學院學報,2009,24(2):171-176.

[14] 李群道,單安山,馬得瑩,等.女貞子、五味子與寡糖配伍對肉雞抗氧化功能和血液生化指標的影響[J].動物營養(yǎng)學報, 2005,17(1):45-48.

Effects of dietary Fructus Ligustri Lucidi on growth performance, digestive enzyme activities and flesh quality in mirror carp

TANG Ling1,2,XU Qi-you1,XU Hong1,WANG Chang-an1,WANG Yang1,2,ZHANG Tong1,2
(1.Heilongjiang River Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Harbin 150070,China; 2.Fisheries and Life Science College,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China)

This trial was investigated the effects of dietary Fructus Ligustri Lucidi(Ligustrum lucidum)on growth performance,digestive enzyme activities and flesh quality in mirror carp(Cyprinus carpio var.Specularis).The fish with initial body weight of(125.55±19.14)g were fed five diets including the basic diet(Group A),addition of 200 mg/kg 25%allicin(Group B),addition of 0.5%(Group C),1.0%(Group D),and 1.5%Group E) Fructus Ligustri Lucidi powder for 12 weeks with triplicate groups of each 10 individuals.The results showed that there were significantly lower final weight,specific growth rate and weight gain rate in the carp fed the diets containing Fructus Ligustri Lucidi powder than those in the fish of the control group(P＜0.05).The fish fed the diet containing Fructus Ligustri Lucidi powder had significantly higher amylase activity in the foregut(P＜0.05)except in Group D,and significant difference in digestive enzyme activity in midgut and hindgut were observed(P＞0.05). There was no significant differences in protease activity among the trial groups.The fish fed the diets containing Fructus Ligustri Lucidi powder had significantly lower moisture and pH1 value in the muscle of Group D(P＜0.05),and no significant difference in the nutritional composition of the flesh among groups were obtained(P＞0.05).

mirror carp;Ligustrum lucidum;growth performance;digestive enzyme activity;flesh quality

S963.73

A

2095-1388(2011)06-0560-05

2010-12-15

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項資金資助項目(Nycytx-49-10);黑龍江省科技支撐項目(GA07B201);黑龍江水產(chǎn)研究所基本科研專項(2009HSYZX-YZ-01);黑龍江博士后科研啟動基金資助項目(LBH-Q09001)

唐玲(1985-),女,碩士研究生。E-mail:tangling2008v@yahoo.cn

徐奇友(1969-),男,博士,研究員。E-mail:xuqiyou@sina.com