Ki-67在不同葡萄胎組織中的表達(dá)及臨床意義

張賀玲 許煥芝 王素琴

用Ki-67檢測(cè)發(fā)現(xiàn)腫瘤的增生活性越高，反映其惡性程度越高，腫瘤分期越高，由此可以認(rèn)為該腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的發(fā)生機(jī)會(huì)增加［1］，本研究采用免疫組化方法對(duì)75例葡萄胎患者宮內(nèi)組織中檢測(cè)Ki-67的表達(dá)，以期對(duì)于在臨床上如何盡早、準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)疾病的發(fā)展方向及對(duì)患者的治療和預(yù)后提供指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2006年1月至2010年1月在我院住院的葡萄胎患者75例，經(jīng)產(chǎn)婦23例，首次妊娠36例。停經(jīng)時(shí)間6～14周，其中＞12周9例，8～12周31例，6～8周35例。所有患者均無(wú)葡萄胎病史，均經(jīng)病理檢查確診。其中侵蝕性葡萄胎5例，完全性葡萄胎42例，部分性葡萄胎28例。年齡20～39歲，平均年齡28.8歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集:對(duì)每1位葡萄胎患者刮宮時(shí)，取宮腔中央典型的葡萄樣組織送病檢。

1.2.2 病理處理:先對(duì)送檢組織進(jìn)行石蠟切片病理組織學(xué)診斷，確診為葡萄胎。再分別對(duì)組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)測(cè)定Ki-67的表達(dá)。采用免疫組化方法SP法，SP試劑盒及Ki-67抗體購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司，常規(guī)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照，以TBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.2.3 結(jié)果判定:每張切片在高倍鏡下隨機(jī)選擇10個(gè)視野，計(jì)算視野陽(yáng)性細(xì)胞的平均百分?jǐn)?shù)。陽(yáng)性染色均為棕黃色顆粒。根據(jù)著色強(qiáng)度及范圍，陽(yáng)性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)＜5%為(-)，5%～25%為(+)，26%～50%為(++)，＞50%為(+++)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間比較先進(jìn)行秩變換，然后用方差分析進(jìn)行兩兩比較，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

Ki-67的表達(dá) Ki-67在3種不同類型葡萄胎組織中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為75%、88.1%、100%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 不同類型葡萄胎組織中Ki-67的表達(dá) 例

3 討論

葡萄胎為一種良性病變，其特點(diǎn)是絨毛間質(zhì)水腫，外觀呈許多水泡聚集狀如葡萄。葡萄胎除有絨毛間質(zhì)水腫形成水泡外，還有絨毛間質(zhì)中心血管消失，滋養(yǎng)細(xì)胞增生活躍等變化。葡萄胎雖屬良性病變，卻具有生長(zhǎng)活躍和潛在惡變的特點(diǎn)，約20%的完全性葡萄胎與4%的部分性葡萄胎會(huì)發(fā)展為侵蝕性葡萄胎或絨癌。在臨床上判斷葡萄胎清宮后是否發(fā)現(xiàn)惡變的主要依據(jù)是對(duì)人絨毛膜促性腺激素(HCG)的監(jiān)測(cè)，甚至是轉(zhuǎn)移病灶的出現(xiàn)。Ki-67抗原為細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞分裂增殖相關(guān)的蛋白抗原，作為一種增殖相關(guān)抗原，Ki-67可以標(biāo)記在很多婦科腫瘤中，有望成為診斷和預(yù)測(cè)疾病預(yù)后的輔助工具。

葡萄胎是妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病之一，其惡變率高，并有局部侵蝕及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的潛在危險(xiǎn)。葡萄胎的惡變，滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的發(fā)生，是和很多因素相關(guān)的。滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的發(fā)生是打破了滋養(yǎng)細(xì)胞巧妙的平衡，以及影響了細(xì)胞繁殖、分化、凋亡、侵蝕的細(xì)胞進(jìn)程。所以這種惡變的機(jī)制是多方面，多步驟的。有待于我們的繼續(xù)研究。如果能在分子水平發(fā)現(xiàn)其變化，則有利于我們對(duì)葡萄胎的惡變做出早期的診斷及干預(yù)，為預(yù)防性化療提供更準(zhǔn)確的指征［2］。本研究采取了能代表細(xì)胞增殖程度的標(biāo)記物Ki-67的測(cè)定，了解其表達(dá)狀況及與不同類型葡萄胎之間的關(guān)系，為臨床診斷、治療及預(yù)后判斷提供一定的理論依據(jù)。

本研究發(fā)現(xiàn)，不同類型的葡萄胎組織中Ki-67的表達(dá)存在差異，即部分性葡萄胎＜完全性葡萄胎＜浸潤(rùn)性葡萄胎。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)此進(jìn)行過研究，他們的結(jié)論與本研究結(jié)果一致［3-5］。妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病是一組以滋養(yǎng)細(xì)胞增生為本質(zhì)特征的病變，分為部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蝕性葡萄胎等，前二者為良性病變，但極易發(fā)展為惡性滋養(yǎng)細(xì)胞病變，惡變率可達(dá)10%～20%。盡管有明確的病理組織學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)，但仍有觀察者間的認(rèn)識(shí)不一致。本研究通過檢測(cè)增殖標(biāo)記物Ki-67，發(fā)現(xiàn)三者的表達(dá)呈遞增形成，提示表達(dá)的差異由滋養(yǎng)細(xì)胞異常增生所致。因此，我們認(rèn)為Ki-67可準(zhǔn)確反應(yīng)滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的增殖活性，可作為評(píng)價(jià)滋養(yǎng)細(xì)胞疾病進(jìn)展的指標(biāo)。也可作為判定葡萄胎的指標(biāo)之一。臨床上若發(fā)現(xiàn)葡萄胎中這種增殖標(biāo)記物均呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)時(shí)，應(yīng)警惕葡萄胎惡變的可能，建議進(jìn)行預(yù)防性化療處理，以免進(jìn)一步病情進(jìn)展。

Ki-67做為細(xì)胞增埴標(biāo)記物，是一種單克隆抗體，在細(xì)胞周期S、G2、M期均有表達(dá)，Go期缺如。它的指數(shù)高低與許多腫瘤的分化程度、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)，因此被廣泛作為各種惡性腫瘤的必檢項(xiàng)目之一。因此我們認(rèn)為Ki-67是目前能代表葡萄胎滋養(yǎng)細(xì)胞異常增生的客觀指標(biāo)，通過檢測(cè)其在不同葡萄胎組織中的表達(dá)，有助于對(duì)各種不同類型葡萄胎的細(xì)胞增生程度作出判斷并預(yù)測(cè)其預(yù)后，有助于判定葡萄胎術(shù)后是否進(jìn)行預(yù)防性化療。

1 Sebire NJ，F(xiàn)isher RA，Rees HC.Histopathological diagnosis of partial and complete hydatidiform mole in the first trimester of pregnancy.Pediatr Dev Pathol，2003，6:69-77.

2 黃佳，潘玫.葡萄胎惡變相關(guān)因素研究進(jìn)展.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2010， 18:416-418.3 陳夢(mèng)香，馬淑芬，陳文磊，等.增殖與轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中的表達(dá).現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2000，9:41-42.

4 蔡紅光，樓藝，史驍梁，等.葡萄胎組織中PCNA與Ki-67的表達(dá)及臨床意義.中國(guó)婦幼保健，2008，23:1702-1704.

5 Kale A，Soylemez F，Ensari A.Expressions of proliferation markers(Ki-67，proliferating cell nuclear antigen，and silver-staining nucleoalar organizer regions)and of P53 tumor protein in gestational trophoblastic disease.Am J Obstet Gynecol，2001，184:567-574.