血吸蟲對吡喹酮抗藥性監(jiān)測指標的研究現(xiàn)狀

20世紀70年代中后期吡喹酮的發(fā)現(xiàn)是血吸蟲病治療藥物的里程碑[1]。吡喹酮具有高效、低毒、廣譜、使用方便和價格低廉等優(yōu)點,使血吸蟲病的治療取得了真正的突破。據(jù)此,WHO血吸蟲病控制策略的目標已由阻斷傳播轉(zhuǎn)為疾病控制,以吡喹酮為主的周期性化療成為當(dāng)前疾病控制的主要手段[2]。同時我國血吸蟲病的防治策略也作了相應(yīng)的調(diào)整。從20世紀 80年代至今,我國累計有5 000萬例(次)以上血吸蟲病患者接受了吡喹酮治療(包括擴大化療)[3]。盡管血吸蟲病疫苗、藥物開發(fā)及導(dǎo)致疾病的免疫機制方面的基礎(chǔ)研究是國際上近幾年的研究熱點[4],可無論是早期的蟲體抗原苗、輻射致弱童蟲苗,或近十多年來研制的現(xiàn)代生物技術(shù)疫苗尚不宜在現(xiàn)場推廣應(yīng)用,或誘導(dǎo)的保護效果不甚理想[5]。目前血吸蟲病的防治仍主要依賴于化學(xué)治療[6]。

同一種抗蠕蟲藥物的過度應(yīng)用、使用劑量的不足及結(jié)合其他因素,往往會導(dǎo)致抗藥性的產(chǎn)生[7]：在非洲一些地區(qū),曼氏血吸蟲(Schistosoma mansoni)對在該地區(qū)廣泛用于抗蟲治療的口服藥海恩酮和奧沙尼喹產(chǎn)生了抗藥性[8-9];Fallon等[10]在實驗室采用吡喹酮亞治療量誘導(dǎo)出了曼氏血吸蟲吡喹酮抗性株,證實在藥物壓力下血吸蟲可對吡喹酮產(chǎn)生抗藥性。我國是日本血吸蟲病流行的主要國家[11-12],感染宿主體內(nèi)的日本血吸蟲(Schistosoma japonicum)在持續(xù)藥物壓力下可能對吡喹酮產(chǎn)生一定的耐受性[13]。盡管現(xiàn)場至今尚未發(fā)現(xiàn)日本血吸蟲中國大陸株對吡喹酮敏感性下降的證據(jù)[14],但我們?nèi)孕杳芮斜O(jiān)測日本血吸蟲對吡喹酮是否產(chǎn)生抗藥性。本文從現(xiàn)場和實驗室兩方面就血吸蟲對吡喹酮抗藥性監(jiān)測指標進行綜述,旨在為研發(fā)快速、敏感、簡單的日本血吸蟲對吡喹酮抗藥性現(xiàn)場監(jiān)測技術(shù)提供參考依據(jù)。

1 現(xiàn)場監(jiān)測指標

1.1 治愈率(糞檢陰轉(zhuǎn)率) 治愈率的高低在一定程度上可以反映血吸蟲對吡喹酮的敏感性。以往的研究業(yè)已證明,采用40 mg/kg吡喹酮頓服療法治療日本血吸蟲病人,可獲得97.6%～100.0%治愈率[15],但采用相同療法治療曼氏血吸蟲病人,治愈率通常只有60.0%～90.0%[15-16]。由此可以看出日本血吸蟲對吡喹酮的敏感性高于曼氏血吸蟲。杭盤宇等[17]對不同階段日本血吸蟲對吡喹酮敏感性的研究結(jié)果與曼氏血吸蟲相比較,日本血吸蟲成蟲、尾蚴、毛蚴和蟲卵對吡喹酮更為敏感,進一步證實了上述觀點。梁幼生[14]等現(xiàn)場調(diào)查結(jié)果顯示,采用40 mg/kg吡喹酮一次頓服的治愈率達95.1%,2次的治愈率為100%,由此提示盡管在我國血吸蟲病主要流行區(qū)采用吡喹酮實施大規(guī)?；熞?0余年,但現(xiàn)場尚未發(fā)現(xiàn)日本血吸蟲中國大陸株對吡喹酮敏感性下降的證據(jù)。在非洲北塞內(nèi)加爾采用標準劑量吡喹酮治療曼氏血吸蟲病的治愈率僅為18%～36%,增加治療劑量并不能明顯提高治愈率[18-19];繼而又在埃及發(fā)現(xiàn)部分患者經(jīng)反復(fù)治療難以治愈[20]。鑒于人群化療仍是當(dāng)前血吸蟲病防治的一個重要措施,是否出現(xiàn)了吡喹酮抗性蟲株的問題引起了科學(xué)界的重視[21]。Raso等[22]在治療曼氏血吸蟲病的研究中對223名糞檢陽性者采用40 mg/kg的吡喹酮頓服,6 w后評價,治愈率僅為60.9%,接近正常范圍底線。Van等[23]報道,在Ndombo,同樣的治療劑量只取得28%的治愈率,即使是中度或輕度感染治愈率也顯著低于正常水平。雖然Cryseels等[24]學(xué)者認為,在這些流行區(qū)應(yīng)用吡喹酮治療的治愈率低不單單與抗藥性產(chǎn)生有關(guān),可能還與患者體內(nèi)蟲負荷高,頻繁的再感染以及治療時患者體內(nèi)存在處于對藥物不敏感階段的童蟲有關(guān),但是,曼氏血吸蟲對吡喹酮的現(xiàn)場抗藥性問題必須予以高度的關(guān)注。

1.2 減蟲卵率 家畜最常用于檢測蠕蟲抗藥性的方法是比較藥物治療前后糞便中的蟲卵減少率,并且已制定出一部用于評價家畜線蟲抗藥性的標準化方案[25]。在血吸蟲病人治療前、后作蟲卵計數(shù),可以觀察到藥物對不同感染度病人的療效,補充陰轉(zhuǎn)率的結(jié)果[26]。在塞內(nèi)加爾北部,有些學(xué)者[27-31]在研究曼氏血吸蟲對吡喹酮抗藥性時以蟲卵轉(zhuǎn)陰率作為監(jiān)測指標,并計算了減蟲卵率來補充陰轉(zhuǎn)率的結(jié)果。其中Tchuem Tchuente LA[31]等對該地區(qū)43例以往經(jīng)過至少2次吡喹酮治療而糞便中仍能檢出曼氏血吸蟲卵者予以吡喹酮40 mg/kg 2次療法,2次間隔4 w。結(jié)果第1次治療后4 w復(fù)查,蟲卵陰轉(zhuǎn)率為58.1%,蟲卵減少率為60.8%;第2次治療后4 w復(fù)查,陰轉(zhuǎn)率仍為58.1%,蟲卵減少率為56.2%。按感染度分類統(tǒng)計,輕度感染組的蟲卵陰轉(zhuǎn)率較高,重度感染組的蟲卵陰轉(zhuǎn)率較低,蟲卵減少率則相反。

現(xiàn)場監(jiān)測指標受許多因素的影響,如診斷標準、藥物來源、劑量、治療間隔時間、藥效評價時間等[2],并與再感染密切相關(guān)。特別是在血吸蟲病重度流行區(qū),再感染率達15%～55%[32-33],使治愈率、減蟲卵率下降,同時也降低了敏感性監(jiān)測的準確性。

2 實驗室監(jiān)測指標

2.1 體內(nèi)檢測指標

2.1.1 減蟲率(成蟲存活率)、減蟲卵率(肝卵減少率、糞卵減少率) 吡喹酮敏感性的檢測通常是以待檢血吸蟲蟲株感染實驗小鼠,在用待檢藥物進行治療后檢測感染鼠的血吸蟲減蟲率[10,20,34-35]。梁幼生等[35]對來自北塞內(nèi)加爾未治愈的曼氏血吸蟲病患者體內(nèi)及由實驗室誘導(dǎo)產(chǎn)生的5個抗性株和5個實驗室保存的敏感株在小鼠體內(nèi)對吡喹酮的敏感性進行了測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)敏感株的減蟲率為91.8%～100%,而抗性株的減蟲率僅為59.6%～74.4%。由此得出結(jié)論：5個曼氏血吸蟲抗性株對吡喹酮的敏感性顯著低于5個敏感株。石孟芝等[36]從中國湖南省一個未經(jīng)吡喹酮群體化療的新發(fā)現(xiàn)流行區(qū)(感染率為11%)和一個在14年內(nèi)經(jīng)吡喹酮多次群體化療的老疫區(qū)(感染率為8.2%)這2個流行區(qū)分別采集感染性釘螺逸蚴感染小鼠,采用吡喹酮600 mg/kg 1次灌服治療感染小鼠,治后3 w剖檢,結(jié)果反復(fù)化療的老疫區(qū)組與新疫區(qū)組小鼠的減蟲率分別為98.2%和98.7%,肝卵減少率分別為 75.85%、73.10%,糞卵減少率則各為99.94%、99.64%。提示在反復(fù)應(yīng)用吡喹酮化療的血吸蟲病流行區(qū),吡喹酮治療日本血吸蟲病的效果無明顯變化。

2.1.2 半數(shù)有效量(ED50) ED50是判斷微生物及寄生蟲抗藥性的重要指標。Ismail等[37]和 Bennett[38]在埃及尼羅河三角洲從經(jīng)吡喹酮反復(fù)治療3次仍未治愈的患者糞便中分離蟲卵建立蟲株,并感染小鼠進行蟲株的藥物敏感試驗。結(jié)果有80%的蟲株ED50(123～680 mg/kg)明顯高于1次治愈患者體內(nèi)分離蟲株的ED50(80～104 mg/kg)。Cioli等[39]測定了曼氏血吸蟲敏感株(未經(jīng)吡喹酮作用)和抗性株(實驗室誘導(dǎo)或現(xiàn)場多次治療失效)的ED50,結(jié)果 ,抗性株的 ED50均大于100 mg/kg,且抗性株的ED50約為敏感株的3倍,作者認為100 mg/kg可作為區(qū)分敏感性的ED50的界值。但是,該項指標仍需在今后更多的蟲株敏感性測定中加以驗證。當(dāng)然,也有學(xué)者提出,僅僅靠ED50的高低,尚不足以作為評價抗性的依據(jù)。關(guān)鍵要看在藥物壓力下,能否選擇出可以遺傳的抗性表型以及隨著反復(fù)傳代,在種群中抗性表型能否擴大化從而對人類構(gòu)成威脅[40-41]。

2.1.3 病理指標

2.1.3.1 蟲體皮層損傷程度 梁幼生等[42]用曼氏血吸蟲對吡喹酮敏感株及抗性株尾蚴分別感染小鼠,感染后第57 d,以300 mg/kg微?；拎獞乙簩π∈笞鞴辔钢委?在灌藥后 10、30min和1、12、24 h后剖殺感染小鼠,門靜脈灌注收集成蟲,按常規(guī)方法制成掃描電鏡標本,掃描電鏡下觀察成蟲體表的變化。結(jié)果表明,在用同等劑量的吡喹酮治療時,敏感株蟲體體表受損程度明顯重于抗性株蟲體,且雄蟲體表的損害又較雌蟲的為重。William等[43]用曼氏血吸蟲吡喹酮抗性株和敏感株作體外實驗觀察吡喹酮對蟲皮層的損害,亦獲得相同的結(jié)果。

2.1.3.2 蟲卵肉芽腫面積 蟲卵導(dǎo)致的肉芽腫是血吸蟲病的基本病理變化,它能造成組織持久性的結(jié)構(gòu)與功能破壞,在臨床上有重要的意義。梁幼生等[44]用曼氏血吸蟲抗性株與敏感株尾蚴感染小鼠,在感染第58、59、60 d每日以 200 mg/kg微?；拎獞乙汗辔钢委熜∈?治后35 d剖殺小鼠取小鼠肝臟做石蠟切片進行HE染色,顯微鏡下作病理學(xué)觀察,以圖像分析儀定量測定蟲卵肉芽腫的面積。結(jié)果敏感株未治療組蟲卵肉芽腫由大量炎性浸潤細胞及少量間質(zhì)成纖維細胞組成;治療組則由少量炎性浸潤和大量間質(zhì)成纖維細胞組成;未治療組肉芽腫的面積明顯大于治療組,兩者間差異具有非常顯著性。但抗性株治療組和未治療組蟲卵肉芽腫均由大量炎性浸潤細胞和少量間質(zhì)成纖維細胞組成,兩組蟲卵肉芽腫的面積差異無顯著性。研究表明鼠體內(nèi)吡喹酮的治療對曼氏血吸蟲吡喹酮敏感株和抗性株肝臟蟲卵肉芽腫的形成影響作用具有顯著差異;在肝組織中,敏感株蟲卵對吡喹酮的敏感性高于抗性株。

2.1.4 生物學(xué)特性指標

2.1.4.1 對宿主螺的易感性和產(chǎn)尾蚴量指標 梁幼生等[45]以曼氏血吸蟲抗性株與敏感株毛蚴和尾蚴定量感染光滑雙臍螺和CD1小鼠,宿主體內(nèi)觀察比較曼氏血吸蟲吡喹酮抗性株和敏感株生物學(xué)特性。結(jié)果：單只螺暴露于單個毛蚴2 h,抗性株與敏感株對螺感染率為19.8%和8.9%,兩者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.006);逸蚴期間,塞內(nèi)加爾抗性株感染螺存活率高于敏感株;用塞內(nèi)加爾抗性株和敏感株毛蚴感染所獲陽性螺產(chǎn)尾蚴量(尾蚴/螺)為6 875條和14 611條,抗性株和敏感株的尾蚴逸出量間差異有統(tǒng)計學(xué)意義;3個塞內(nèi)加爾抗性株尾蚴開放前期平均為32.2 d,而 3個敏感株尾蚴的為27.7 d,兩者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。塞內(nèi)加爾抗性株與敏感株間的蟲卵開放前期及蟲卵孵化率間的差異則被認為是曼氏血吸蟲不同地理株間的差異。

2.1.4.2 對小鼠的易感性及排卵量指標 梁幼生等[46]采用浸尾法以200尾蚴/鼠逐只感染遠交系CD1鼠,感染57 d后采集鼠糞便計數(shù)蟲卵;78 d后剖殺鼠收集成蟲計數(shù)并摘取肝臟和腸做組織蟲卵計數(shù);95 d后取肝臟組織切片、染色測量蟲卵肉芽腫面積和周長。對抗性株與敏感株進行比較：結(jié)果抗性株和敏感株感染鼠成蟲回收數(shù)相仿,分別為22.5條/鼠和21.8條/鼠;抗性株感染鼠糞便蟲卵數(shù)為68.6只/100 mg,敏感株為31.7只/100 mg,兩者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義;感染第78 d,敏感株產(chǎn)于肝和腸組織蟲卵數(shù)為4 665只/對成蟲,抗性株為8 364只/對成蟲,兩者間的差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義;抗性株和敏感株感染鼠肝蟲卵肉芽腫面積及周長間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

體內(nèi)檢測指標目前仍沿用小鼠體內(nèi)進行實驗性治療的方法,但因其成本高、費時及影響因素多等,僅局限于實驗室研究使用[47]。況且在寄生蟲藥物抗性株與敏感株生物學(xué)特性比較研究中所發(fā)現(xiàn)的差異,是寄生蟲種群間自然變異,還是與抗性相關(guān)生物學(xué)特性,往往難以區(qū)別[48]。

2.2 體外監(jiān)測指標

2.2.1 血吸蟲成蟲

2.2.1.1 蟲肌肉張力 Ismail等[49]對從吡喹酮治療失效病人體內(nèi)分離到的12株曼氏血吸蟲成蟲在吡喹酮作用下的蟲肌肉張力的變化進行了測定,發(fā)現(xiàn)抗性株蟲體的反應(yīng)強度明顯低于敏感株蟲體。在鼠體內(nèi)生物學(xué)實驗測得的對吡喹酮的敏感性與體外測得的蟲體肌肉的收縮強度存在良好的相關(guān)性。然而,該方法操作程序復(fù)雜,并需要專門的儀器,難以在現(xiàn)場使用。

2.2.1.2 成蟲存活率 Sobhon和 Upatham報告,將血吸蟲成蟲孵育于含同一濃度吡喹酮的MEM中,曼氏血吸蟲、日本血吸蟲和湄公血吸蟲(Schistosoma mekongi)存活率間存有顯著不同;同種血吸蟲雌與雄蟲的反應(yīng)性也不同,與雌蟲相比,雄蟲顯得更為敏感[50]。梁幼生等[51]在比較曼氏血吸蟲吡喹酮敏感株與抗性株成蟲對吡喹酮的體外反應(yīng)性結(jié)果進一步證實了Sobhon和Upatham的結(jié)果。

2.2.2 尾蚴(斷尾率) 一定濃度的吡喹酮作用于尾蚴體與尾部肌肉,使得血吸蟲尾蚴的體與尾部出現(xiàn)分離[52-54]。將曼氏血吸蟲尾蚴移入4×10-7mol/L吡喹酮溶液中80～100 min后,鏡下計數(shù)其斷尾率,比較抗性株和敏感株尾蚴斷尾率間的差異作為曼氏血吸蟲對吡喹酮敏感性的檢測方法,可用于吡喹酮抗性蟲株的現(xiàn)場監(jiān)測。由于吡喹酮敏感株與抗性株尾蚴肌肉相應(yīng)的靶位對吡喹酮敏感性存在差異,當(dāng)尾蚴暴露于相同濃度的吡喹酮中,其反應(yīng)性(肌肉收縮的強度)也必然存在差異。尾蚴的斷尾率作為反映這一差異較客觀的指標,在吡喹酮抗性監(jiān)測上具有一定的意義[55]。2007年,梁幼生等[56]研究顯示,將日本血吸蟲尾蚴移至4×10-7mol/L吡喹酮溶液中80～100 min后,鏡下計數(shù)其斷尾率,用于判斷該日本血吸蟲分離株對吡喹酮的敏感性,此法可用于吡喹酮敏感性蟲株的現(xiàn)場監(jiān)測。同年梁幼生等[57]在曼氏血吸蟲中比較吡喹酮敏感株雌雄斷尾率、吡喹酮抗性株雌雄尾蚴斷尾率、敏感株與抗性株雄性斷尾率時發(fā)現(xiàn)：曼氏血吸蟲雌雄尾蚴對吡喹酮的敏感性存在差異,雄性尾蚴敏感性高于雌性;曼氏血吸蟲吡喹酮抗性的產(chǎn)生與雄蟲對吡喹酮的敏感性降低有關(guān)。

2.2.3 毛蚴(變形率) 一定濃度的吡喹酮可使得血吸蟲毛蚴發(fā)生形態(tài)學(xué)變化[52,58]。將吡喹酮敏感株和抗性株毛蚴分別暴露于 10-3、10-4、10-5、5×10-6、10-6、5×10-7mol/L 和 10-7mol/L 吡喹酮溶液中,0、1、5 min后觀察比較毛蚴的運動及形態(tài)學(xué)變化。當(dāng)毛蚴暴露于5×10-6mol/L吡喹酮溶液中,敏感株100%毛蚴體中部立刻收縮變形,而抗性株僅見13.4%毛蚴變形;當(dāng)暴露于10-6mol/L吡喹酮溶液0、1、5 min后敏感株毛蚴的變形率分別為35.5%、63.9%、91.2%;抗性株毛蚴的變形率分別為0、7.6%、14.3%。敏感株毛蚴的變形率與抗性株間差異有非常顯著性。實驗表明,對曼氏血吸蟲來說,將一定量剛孵出的毛蚴移入10-6mol/L溶液中1 min后,滴加盧戈氏碘液,顯微鏡下計數(shù)變形毛蚴所占比例,可用于現(xiàn)場判斷病人化療失敗的原因是由于吡喹酮抗性株造成或是因其他因素如再感染等引起。對于日本血吸蟲來說,將一定量剛孵出的毛蚴移入含吡喹酮5×10-7mol/L的溶液中按上述操作進行也可用于判斷病人化療失敗的原因[56]。

體外尾蚴、毛蚴抗性檢測技術(shù)只需直接從現(xiàn)場采集陽性螺逸出尾蚴、采集病人糞便孵化毛蚴即可進行檢測,勿需使用動物和特殊設(shè)備,是簡單、快速、經(jīng)濟及可直接用于現(xiàn)場檢測和監(jiān)測吡喹酮抗藥性的方法[47,56]。

2.2.4 蟲卵(孵化率)[47]將吡喹酮敏感株和抗性株蟲卵分別孵育于 5×10-6、10-6、5×10-7mol/L和10-7mol/L吡喹酮溶液中24 h,后移至清水孵化,比較蟲卵的孵化率。結(jié)果經(jīng)10-6mol/L和5×10-7mol/L吡喹酮孵育24 h后,敏感株曼氏血吸蟲蟲卵的孵化率分別為4.2%和30.7%,抗性株分別為24.2%和61.2%,兩者間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。

由于血吸蟲生活史中從蟲卵開始,毛蚴、尾蚴均存在于體外,血吸蟲成蟲也能夠人工培養(yǎng),這就為體外直接檢測血吸蟲對抗蟲藥物的抗性提供了基礎(chǔ)[59]。研究發(fā)現(xiàn),日本血吸蟲各現(xiàn)場分離株間在蟲卵、毛蚴和尾蚴階段對吡喹酮的敏感性無明顯差異,但均明顯高于曼氏血吸蟲[56];曼氏血吸蟲吡喹酮敏感株與抗性株在蟲卵與毛蚴階段對吡喹酮的體外反應(yīng)性差異有顯著性,證明血吸蟲對吡喹酮的抗性有可能表現(xiàn)在各個生活階段。運用這些體外反應(yīng)性的差異,建立相應(yīng)抗性檢測技術(shù),對吡喹酮抗性的診斷和監(jiān)測具有重要的意義[47]。

2.2.5 分子生物學(xué)指標

2.2.5.1 差異蛋白 曲國立等[60]對中國大陸日本血吸蟲不同地理株間成蟲差異表達蛋白的分離、鑒定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同地理株蟲體可溶性蛋白組分蛋白點在600～700之間,兩兩比較發(fā)現(xiàn)雌蟲蛋白質(zhì)表達存在18個差異點,雄蟲存在14個差異表達蛋白點,且地理株間兩兩均有差異,提示自然狀態(tài)下的不同地理株血吸蟲蟲體在蛋白質(zhì)表達水平上的差異,可能是環(huán)境適應(yīng)的結(jié)果。部分蛋白表達差異與蟲體對吡喹酮敏感性密切相關(guān)。

2.2.5.2 線粒體細胞色素氧化酶-C亞單位1[61]利用PCR技術(shù)對實驗室篩選抗性分離株以及從塞內(nèi)加爾和埃及分離的可疑抗性株進行與藥物抗性表型相關(guān)的遺傳和生理學(xué)差異的研究提示,實驗室篩選抗性株成蟲表達的線粒體細胞色素氧化酶-C亞單位1比其親代高5～10倍,而其活性卻要低4倍。

2.2.4.3 DNA核苷酸序列[62]隨機擴增多態(tài)DNA PCR實驗結(jié)果顯示,埃及的抗性株與來自同一地區(qū)的敏感株相比較,至少有2個主要的DNA核苷酸序列擴增并不相同。

2.2.5.4 β亞單位基因[63]在對吡喹酮作用的靶器官-鈣離子通道的β亞單位基因的研究發(fā)現(xiàn),血吸蟲的β亞單位基因的主要結(jié)構(gòu)成分與其他已知的β亞單位基因不同,將血吸蟲β亞單位基因轉(zhuǎn)染入非血吸蟲細胞可以增加后者對吡喹酮的敏感性。

梁幼生[64]等對曼氏血吸蟲吡喹酮抗性的遺傳學(xué)分析顯示：抗性遺傳結(jié)果遵循孟德爾遺傳定律,并認為曼氏血吸蟲吡喹酮抗性是有單一或一組顯性基因所決定。由此提示有可能采用分子生物學(xué)方法建立吡喹酮抗性檢測技術(shù)。隨著血吸蟲基因測序以及人類基因組計劃的完成,生命科學(xué)已進入了后基因組時代,分子生物學(xué)技術(shù)將更加有利于我們精確區(qū)分抗性株和敏感株蟲體間的差異。但由于該技術(shù)需要專門的技術(shù)人員及儀器,操作復(fù)雜,費用相對較高,作為常規(guī)化的檢測方法在現(xiàn)場使用可能會有局限性。

3 結(jié) 語

吡喹酮是治療人體5種血吸蟲感染的主要藥物,也是治療日本血吸蟲病的惟一抗蟲藥[65]?？顾幮缘漠a(chǎn)生是寄生蟲種群在藥物選擇壓力下出現(xiàn)的一種適應(yīng)性反應(yīng),這種反應(yīng)是生理性的和可遺傳的,涉及遺傳基因的改變[7]。抗藥性的出現(xiàn)是一個嚴重的公共健康問題[66]。監(jiān)測血吸蟲對吡喹酮抗藥性的研究具有重大意義,尤其是中國要加強日本血吸蟲對吡喹酮抗藥性的監(jiān)測的研究,以控制抗藥性基因在流行區(qū)蔓延和更有效地防治血吸蟲病[67]。

自2005年3月以來,我國已設(shè)立了80個血吸蟲病疫情縱向監(jiān)測點[68],這些監(jiān)測點對疫情實施系統(tǒng)、連續(xù)不斷地監(jiān)測,在預(yù)防和控制血吸蟲病工作中發(fā)揮了重要作用。如今,隨著我國血吸蟲病防治進程的推進,如何建立快速、敏感的吡喹酮抗藥性監(jiān)測技術(shù)并在監(jiān)測點中廣泛運用,充分發(fā)揮監(jiān)測點的作用,推動血吸蟲病監(jiān)測與預(yù)警體系的完善,是一個亟待解決的問題。

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