金黃色葡萄球菌的檢測分析

曲 林

（吉林省農(nóng)安縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 農(nóng)安 130200）

金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）是可引起多種嚴(yán)重感染的一種重要病原菌，隸屬葡萄球菌屬（Staphylococcus）[1]。據(jù)路透社2005年7月15日報(bào)道，美國研究人員，大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)金色的細(xì)菌比其它無色細(xì)菌更具殺傷力。全世界每年有上千萬人死于葡萄球菌感染。在第二次世界大戰(zhàn)之前尤為嚴(yán)重[2]。后來科學(xué)家用發(fā)明的抗生來治療葡萄球菌的感染。直到80年代起，抵抗抗生素的菌株不斷出現(xiàn)，致使特效的藥物失靈[3]。一方面由于金色葡萄球菌是人體內(nèi)最常見的細(xì)菌，被1/3的人口攜帶，它能夠?qū)е乱幌盗屑膊?，也是主要的醫(yī)院感染源。另一方面發(fā)現(xiàn)，金色葡萄球菌能夠輕易地與其他葡萄狀球菌交換基因，并能在很短的時(shí)間里重新獲得更大抵抗抗生素的能力。因此對其深入專業(yè)的研究將會給全人類帶來了巨大的福祉。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

隨機(jī)選擇2002年1月至2010年1月診治的435例金黃色葡萄球菌患者的各類臨床標(biāo)本，包括痰液、膿液、尿液、血液、泌尿生殖道分泌物等。

1.2 菌株分離與鑒定

所采用的435例菌株均嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》對其進(jìn)行培養(yǎng)、分離、鑒定。

1.3 紙片擴(kuò)散法的藥敏檢測試驗(yàn)

①培養(yǎng)基：凍干血漿、特定瓊脂等適合葡萄球菌生長的適宜培養(yǎng)基，使其良好生長，更好的進(jìn)行試驗(yàn)。②藥敏紙片的選擇：萬霉素、利福平、頭孢哌酮、丁胺卡那素、頭孢唑林、 慶大霉素、 環(huán)丙沙星、青霉素G。以上的藥物必須在保質(zhì)期內(nèi)使用，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性與科學(xué)性。③質(zhì)控菌液、被檢測菌：首先選取在純培養(yǎng)平板上生長的菌落，再用準(zhǔn)備好的無菌生理鹽水調(diào)節(jié)被選中的菌液濃度，使用與麥?zhǔn)媳葷峁?.5的比濁相同。菌落計(jì)數(shù)相當(dāng)于1.5×108/mL。④試驗(yàn)操作：按照每張紙片都不少于29mm，紙片的中心距離平板不能少于18mm，將藥敏紙片用無菌鑷子夾起平貼于涂有菌液的培養(yǎng)基表面。⑤判斷藥敏的標(biāo)準(zhǔn)：參照國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化正確無誤的讀取結(jié)果。

2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.1 2002年1月至2010年1月的八年來，從臨床選擇的435例金黃色葡萄球菌培養(yǎng)的菌株中，耐甲基西林金黃色葡萄球菌為170株，占25.6%。甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株數(shù)為265，占總菌數(shù)的60.9%。①2002年1月至2010年1月的耐甲基西林金黃色葡萄球菌菌株分別為15、13、19、20、26、27、25、25。②2002年1月至2010年1月甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株數(shù)菌株分別為25、23、23、38、24、39、41、37。③耐藥率分別為26.5%、26.7%、37.4%、33.9%、42.1%、41.5%、47.8%、48.9%。

2.2 金黃色葡萄球菌對萬霉素、利福平、頭孢哌酮、丁胺卡那素、頭孢唑林、 慶大霉素、 環(huán)丙沙星、青霉素G的敏感率分別為99．5%、978%、77.8%、77.8%、70.1%、59.7%、2.1%。

3 討 論

金黃色葡萄球菌是球菌中革蘭陽性菌的一種最典型代表。它可以被結(jié)晶紫初染，碘液媒染，乙醇處理，沙黃（紅色）復(fù)染后呈現(xiàn)紫紅色。革蘭陽性菌是由細(xì)胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸組成[4]。由于其肽聚糖的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)比革蘭陰性菌致密，造成了不同革蘭陰性菌呈現(xiàn)紅色的染色結(jié)果。

典型的金黃色葡萄球菌對其所需的生長條件要求一般，為需氧或兼性厭氧，普通培養(yǎng)基便可使其良好生長。在最適溫度37°C，pH7.4的干燥環(huán)境中即可存活數(shù)周的時(shí)間[5]。由于其較強(qiáng)的生長力和近年來抗生素的廣泛應(yīng)用，耐甲基西林金黃色葡萄球菌被檢出率呈逐年上升的勢態(tài)。八年來從隨機(jī)的檢測結(jié)果中就可以看出其耐藥性的不斷攀升，所呈趨勢不容樂觀。所被檢測的地區(qū)的1985年至1986年的耐甲基西林金黃色葡萄球菌的分離率為26%，1993年至1994年的分離率上升至61%，1999年至2004年的分離率平均到達(dá)88.4%，較比1994年提高近27.4%，從這幾組百分率的比中我們不難看出問題的嚴(yán)重性。2007年至2010年的分離率則更是達(dá)到93.2%。本院處于經(jīng)濟(jì)尚未發(fā)達(dá)，交通仍不十分發(fā)達(dá)的縣城，在此處情況已經(jīng)不夠樂觀，尚且不用說經(jīng)濟(jì)與人文發(fā)達(dá)的沿海等大眾城市的形勢會如何了，一定會更加的突出。

葡萄球菌病主要是由金黃色葡萄球菌引起的一種急性或慢性傳染病。在臨床上?？梢员憩F(xiàn)為多種類化膿，由于此類疾病的特殊性給人們帶去巨大的痛苦[6]。內(nèi)臟器官感染如肺炎、膿胸、腦膜炎、等各種嚴(yán)重的病癥，隨時(shí)奪去人們的生命。葡萄球菌可通過多種途徑侵入機(jī)體，導(dǎo)致皮膚或器官的多種感染，甚至敗血癥。新生兒各種的技能尚未發(fā)育完全，機(jī)體防御能力低嚴(yán)重受損時(shí)表皮葡萄球菌也可引起嚴(yán)重?cái)⊙Y。皮膚軟組織感染主要有癤、癰、毛囊炎、麥粒腫傷口管的患者，切除前列腺的患者尤多見于。主要是因?yàn)榇蠖嗑昕梢苑纸饽蛩睾托律顾氐哪退幰蛩貙?dǎo)致。金葡菌可致急性化膿性骨髓炎，兒童及男性多見，可為血源性感染，亦可繼發(fā)于外傷或化膿性關(guān)節(jié)炎，致殘率極高。葡萄球菌尚還可以引起肝、脾、腎膿腫，腎周圍膿腫等臟器疾病。

自青霉素在上世紀(jì)對治療金黃色葡萄球菌發(fā)揮的巨大的作用起，到80年代的耐藥菌株的被發(fā)現(xiàn)，都在表明耐藥性的不斷提高。在增加治療難度的同時(shí)，也在提醒著我們醫(yī)療工作者們一個(gè)不可忽視的嚴(yán)峻問題;廣泛的抗生素應(yīng)用只會導(dǎo)致“濫用”。其用意是好的，但其結(jié)果卻是事倍功半。所以我們要徹底改變普通的用藥習(xí)慣，而是應(yīng)該認(rèn)真謹(jǐn)慎的，在不充分把握的情況下進(jìn)行金黃色葡萄球菌的檢測與分析，用科學(xué)來指導(dǎo)合理的用藥原則。尤其是基層醫(yī)生更要對其理解掌握。對實(shí)際的臨床治療具有的指導(dǎo)重要意義。影響也將必定是深遠(yuǎn)的。金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)還可以應(yīng)用3M快速金黃色葡萄球菌數(shù)測片或者是TD5A-WS臺式低速離心機(jī)等多種方法進(jìn)行檢測。例如應(yīng)用1TD5AWS臺式低速離心機(jī)其檢測，檢測結(jié)果也較準(zhǔn)確，但由于相對費(fèi)用較昂貴，需要一定的技術(shù)和條件，不宜推廣。而紙片擴(kuò)散法簡單易行、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)，尤其適用于基層醫(yī)院經(jīng)金黃色葡萄球菌感染的檢測。

綜上所述，通過對金黃色葡萄球菌采用紙片擴(kuò)散法檢測可進(jìn)行檢測，可以準(zhǔn)確、安全的選擇用藥，降低耐藥性的發(fā)生率。有益于為千千萬萬的患者解除其病痛。值得在基層醫(yī)院金黃色葡萄球菌的感染中推廣應(yīng)用。

[1] 劉曉霞,劉蓬蓬,孫運(yùn)波.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染的危險(xiǎn)因素分析[J].齊魯醫(yī)學(xué)雜志,2009,24(5):447-450.

[2] 德忠,周文聰,饒冠利.膿毒癥患者病原菌分布及耐藥性分析[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2010,20(2):321-324.

[3] 白莉,李衛(wèi)杰,王軍花.127種葡萄球菌對抗生素的分析[J].華北國防醫(yī)藥,2007,19(1):55.

[4] 崔自慧.細(xì)菌耐藥性臨床分析[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2010,7(7):116-117.

[5] 朱佩瓊,裘云慶.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥機(jī)制的研究近況[J].國外醫(yī)學(xué)流行病學(xué).傳染病學(xué)分冊,2004,31(5):55.

[6] 陳亮,方平.臨床標(biāo)本分離細(xì)菌耐藥性監(jiān)測分析[J].安徽醫(yī)藥,2004,8(3):206-207.