袁圣丹,袁 生
(佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,廣東 南海 528231)
2010年9 月起,廣東多個(gè)地區(qū)的蛋鴨發(fā)生以減料、減蛋、軟腳和拉青白色糞便為特征的疾病,發(fā)病率高達(dá)50%以上,死亡率5%-30%左右,根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀、病理剖檢和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn),初步診斷為鴨的副黏病毒病,經(jīng)采取綜合防治措施,有效地控制該病。
從2010年9月起,我校動(dòng)物醫(yī)院陸續(xù)接診廣東省佛山、廣州、江門、中山等地區(qū)的病鴨。病鴨臨床上表現(xiàn)體溫升高到43℃左右,精神沉郁,食料減少或廢食,羽毛松亂,軟腳,拉青白色、綠色或黃色粘稠稀糞,呼吸困難,叫聲嘶啞,個(gè)別出現(xiàn)搖頭和轉(zhuǎn)圈等神經(jīng)癥狀,產(chǎn)蛋率迅速下降,發(fā)病率達(dá)50%以上,死亡率5%-30%不等,病程3~15天。使用青霉素、鏈霉素、慶大霉素等多種抗生素治療,效果不明顯。從2010年9月到2011年2月,以上地區(qū)大部分蛋鴨場都發(fā)生該病。
剖檢瀕死鴨或病死鴨,見鼻腔充血或出血,頭頸部皮膚充血出血,腦充血出血,胰腺見出血點(diǎn)或灰白色壞死點(diǎn),心臟外膜見出血斑點(diǎn),肝臟充血、出血,個(gè)別見針頭至綠豆大灰白色壞死,腺胃和肌胃角質(zhì)層下出血,小腸直腸充血出血。
3.1細(xì)菌培養(yǎng):無菌采取以上地區(qū)具典型癥狀和病理變化瀕死鴨的肝臟、腦、脾臟、胰腺、心血,分別接種于鮮血瓊脂平板,巧克力瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板及厭氣肉肝湯,37℃培養(yǎng)48小時(shí),均未見細(xì)菌生長。
3.2病毒分離:用無菌操作法取以上地區(qū)具典型癥狀和病變鴨的肝臟、腦、脾臟、胰腺等研磨,加入生理鹽水稀釋,12000r/min離心10分鐘,取上清液加入青、鏈霉素各1000u/ml,置于4℃過夜,經(jīng)無菌檢驗(yàn)合格后,尿囊腔接種9日齡雞胚,每地病料接種30枚,0.2ml/枚,37℃恒溫箱孵化,每隔12小時(shí)照蛋一次,棄去24小時(shí)內(nèi)死亡雞胚,到96小時(shí)止,死亡雞胚為:江門6/30佛山8/30廣州10/30、中山11/30,收取24-96小時(shí)死亡雞胚尿囊液,見胚液清亮,胚體充血、出血,尤以胚體頭部、頸部出血明顯,胚液經(jīng)涂片染色和多種培養(yǎng)基培養(yǎng),均未見細(xì)菌生長。
3.3血凝和血凝抑制試驗(yàn):對以上地區(qū)分離的病毒液進(jìn)行HA和HI試驗(yàn),按常規(guī)方法制備1%雞紅細(xì)胞懸液,用病毒液對雞紅細(xì)胞進(jìn)行微量HA試驗(yàn),用β微量法分別應(yīng)用ND標(biāo)準(zhǔn)陽性血清,EDSV-76陽性血清,AVI-H5陽性血清,康復(fù)鴨20天血清進(jìn)行HI試驗(yàn),結(jié)果,以上地區(qū)收集的毒株的尿囊液均能凝集1%雞紅細(xì)胞,HA價(jià)為23-26之間,這種凝集作用能被ND標(biāo)準(zhǔn)陽性血清,康復(fù)鴨血清所抑制,但不能被EDSV-76陽性血清所抑制。
3.4人工發(fā)病試驗(yàn):從非疫區(qū)購回150天產(chǎn)蛋鴨50羽,隔離飼養(yǎng)觀察7天后,平均分為5組,其中對照組10羽,試驗(yàn)組40羽,平均分為四組,試驗(yàn)組用第一次分離的病毒液接種0.2ml/羽,對照組注射生理鹽水0.2ml/羽,結(jié)果,試驗(yàn)組第三天開始發(fā)病,發(fā)病鴨癥狀和病變與自然病例相同,死亡率1/10-5/10,而病愈鴨明顯消瘦,取病死鴨肝臟、腦、脾臟、胰腺作細(xì)菌學(xué)分離,均為陰性反應(yīng)。
人工發(fā)病情況表
4.1用發(fā)病場分離的病毒液制成油乳劑滅活苗,或用病死鴨的肝、脾、腦、胰腺制成蜂膠組織滅活苗,經(jīng)嚴(yán)格的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn),作為該場緊急預(yù)防接種。
4.2用四神散、金葉清瘟顆粒(均為江西中成藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn))、金絲桃素,飲水或混料,連用5天。
4.3腳軟或病重蛋鴨,用康復(fù)鴨血清,配合頭孢曲松等抗病毒抗菌藥合用。
4.4不能采食的鴨可用多種維生素飲水,為防止和減少細(xì)菌繼發(fā)感染,適當(dāng)使用恩諾沙星、環(huán)丙沙星等抗生素,增強(qiáng)抵抗力。
4.5加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,注意場地消毒,可用5%-10%漂白粉和優(yōu)良的復(fù)合醛等敏感消毒藥。
經(jīng)采取以上綜合措施,鴨群7~15天逐漸康復(fù)。
5.1對2010 年在廣東多個(gè)地區(qū)蛋鴨出現(xiàn)的以減料、減蛋、拉青白色稀糞為特征的烈性傳染病,通過細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)、病毒分離、HI和HA檢驗(yàn)、人工發(fā)病試驗(yàn),初步診斷為鴨副黏病毒病。
5.2使用自家滅活疫苗緊急接種或康復(fù)鴨高免血清緊急注射,配合使用抗病毒中藥和其他抗病毒藥物,能有效地控制該病的發(fā)生和流行。
5.3這次蛋鴨發(fā)病流行之廣,規(guī)模之大,在廣東地區(qū)過去一直未見報(bào)道,可能與廣東地區(qū)水禽飼養(yǎng)量大,飼養(yǎng)密集,水禽病的復(fù)雜多變有關(guān)。
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