IL-22對(duì)人氣道細(xì)胞的作用

張 旃 藍(lán)海兵 周麗麗 賴文巖 徐 建 黎振興 任敦強(qiáng) 葉 涵 鐘浩海 羅雅玲

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院呼吸內(nèi)科，廣東 廣州 510515)

IL-22對(duì)人氣道細(xì)胞的作用

張 旃 藍(lán)海兵 周麗麗1賴文巖2徐 建3黎振興 任敦強(qiáng) 葉 涵 鐘浩海 羅雅玲

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院呼吸內(nèi)科，廣東 廣州 510515)

目的 探討IL-22對(duì)人氣道上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞、氣道成纖維細(xì)胞的生理學(xué)作用。方法 用實(shí)時(shí)定量PCR檢測氣道上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞、氣道成纖維細(xì)胞哮喘血清刺激前后IL-22R1 mRNA表達(dá)的變化。不同濃度的IL-22(10 ng/ml，100 ng/ml，1 000 ng/ml)刺激氣道上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞和氣道成纖維細(xì)胞后，用MTT法檢測細(xì)胞的增殖，用流式細(xì)胞技術(shù)(FACS)檢測細(xì)胞的凋亡和壞死。結(jié)果 哮喘血清刺激后氣道上皮細(xì)胞IL-22R1 mRNA表達(dá)降至正常對(duì)照組的9%，氣道平滑肌細(xì)胞IL-22R1 mRNA表達(dá)升高至正常對(duì)照組的345倍，而氣道成纖維細(xì)胞IL-22R1 mRNA表達(dá)無明顯變化。高劑量(1 000 ng/ml)的IL-22刺激氣道上皮細(xì)胞和氣道成纖維細(xì)胞12、24 h可顯著降低細(xì)胞增殖(P＜0.05，P＜0.01)。三種不同濃度的IL-22刺激氣道上皮細(xì)胞24 h后均導(dǎo)致細(xì)胞凋亡顯著下降(P＜0.05)，低濃度的IL-22(10 ng/ml)導(dǎo)致細(xì)胞壞死增加(P＜0.01)。不同濃度的IL-22刺激氣道平滑肌細(xì)胞后，細(xì)胞凋亡和壞死無顯著性變化。中、高濃度IL-22(100 ng/ml，1 000 ng/ml)刺激氣道成纖維細(xì)胞后，細(xì)胞壞死率顯著下降(P＜0.05)。結(jié)論 IL-22在支氣管哮喘中對(duì)氣道上皮的作用具有雙重性，并與支氣管哮喘的病程相關(guān);而對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞的作用則可能與濃度及病程相關(guān)。支氣管哮喘后續(xù)階段，IL-22對(duì)氣道成纖維細(xì)胞作用輕微。

白細(xì)胞介素-22;氣道上皮細(xì)胞;氣道平滑肌細(xì)胞;氣道成纖維細(xì)胞

白細(xì)胞介素-22(IL-22)與呼吸系統(tǒng)疾病密切相關(guān)，能增加肺上皮細(xì)胞的增殖及對(duì)抗經(jīng)上皮的損傷〔1〕。在呼吸機(jī)相關(guān)的肺損傷中IL-22通過增加肺泡上皮細(xì)胞的抵抗性，防止細(xì)胞拉伸和肺損傷，因而吸入IL-22對(duì)高壓通氣導(dǎo)致的肺損傷具有保護(hù)作用〔2〕。產(chǎn)生IL-22的Th17細(xì)胞同時(shí)也產(chǎn)生IL-17，而IL-17涉及支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展〔3，4〕，且Th17細(xì)胞也與支氣管哮喘密切相關(guān)〔5〕，因而推測IL-22也與支氣管哮喘相關(guān)聯(lián)。資料顯示氣道上皮參與IL-22對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病產(chǎn)生的作用〔6〕。此外，重度過敏性哮喘患者的血清IL-22水平呈增高趨勢〔7〕。而近來有報(bào)道顯示IL-22能夠誘導(dǎo)人氣道平滑肌細(xì)胞遷移〔8〕，顯然IL-22在支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展中能夠?qū)獾榔交‘a(chǎn)生一定的作用。支氣管哮喘患者的氣道重構(gòu)有多種間質(zhì)細(xì)胞參與，本文前期的研究顯示在人氣道上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞以及氣道成纖維細(xì)胞均有IL-22R1受體的表達(dá)，因而這些細(xì)胞是IL-22在氣道的靶細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)通過不同濃度的IL-22刺激人氣道上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞、氣道成纖維細(xì)胞，觀察IL-22對(duì)這些細(xì)胞增殖及凋亡壞死的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑 Trizol(Invitrogen公司);逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(晶美公司);SYBR Green試劑盒(NEB公司);IL-22R1一抗(eBIOSCIENCE公司，種屬來源:兔);β-actin一抗(Santa Cruz公司，種屬來源:小鼠);抗α-actin(北京博奧森，種屬來源:兔);重組人 IL-4(晶美公司);γ-干擾素(IFN-γ)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)(Sigma公司)。

1.1.2 細(xì)胞來源 正常人支氣管上皮細(xì)胞株HBE135-E6E7(美國ATCC，CRL-2741TM);人胚肺成纖維細(xì)胞株MRC-5(購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所);正常人支氣管平滑肌細(xì)胞由南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院呼吸內(nèi)科羅雅玲實(shí)驗(yàn)室黎振興贈(zèng)送。

1.1.3 哮喘血清 經(jīng)患者同意，從南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院呼吸門診重度哮喘患者(男2例，女4例)提取血清(抗原皮試試驗(yàn)陽性，IgE＞1 000 U/ml)，近期均未用過激素。取全血樣品，37℃溫浴1 h，1 500 r/min，離心 10 min，在超凈臺(tái)內(nèi)無菌環(huán)境下提取上清，－20℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞分組準(zhǔn)備 0.125%胰酶消化，按1∶2比例傳代至4～8代，換成無血清DMEM培養(yǎng)基，另補(bǔ)充胰島素1 U/L、轉(zhuǎn)鐵蛋白5μmol/L和TGF-β15 mg/L培養(yǎng)24 h后，實(shí)驗(yàn)組分別加入10%哮喘血清，10%哮喘血清 +地塞米松(10 nmol/L)，IL-4(10 ng/m l)，IFN-γ(10 ng/m l)，TGF-β(10 ng/ml)，繼續(xù)孵育24 h。收集六孔板細(xì)胞提取RNA或蛋白。

1.2.2 實(shí)時(shí)PCR檢測人氣道細(xì)胞IL-22R1 mRNA的表達(dá)

1.2.2.1 引物、探針的合成 IL-22R1基因引物序列:上游5'-CCCCACTGGGACACTTTCTA-3'(20 bp)，下游 5'-TGGCCCTTTAGGTACTGTGG-3'(20 bp)〔9〕。內(nèi)參基因 GAPDH 引物序列:上游 5'-TTCGACAGTCAGCCGCATCTT-3'(±21 bp)，下游 5'-ATCCGTTGACTCCGACCTTCA-3'(21 bp)。引物由Invitrogen公司合成。

1.2.2.2 細(xì)胞總RNA的提取及逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng) 按Trizol試劑盒提供的操作步驟提取各組細(xì)胞的RNA，－70℃保存，按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒提供的操作步驟合成cDNA(－20℃保存)。將得到的PCR產(chǎn)物進(jìn)行跑膠，回收純化，計(jì)算濃度及純度。

1.2.3 免疫熒光PCR 采用Sybrgreen染料法，按照試劑說明書配好反應(yīng)體系，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線后，將每個(gè)樣本重復(fù)3次，上機(jī)(7000 real-time PCR System，ABI)。反應(yīng)體系及條件如下:Mix+Sybr 10 μl，F(xiàn) 4P 2 μl，R4P 2 μl，H2O 5 μl，模板1 μl，總量20 μl，擴(kuò)增條件:95℃ 2 min，94℃ 30 s，60℃ 30 s，72℃ 45 s，40個(gè)循環(huán)。

1.2.4 結(jié)果分析 以GAPDH為內(nèi)參校準(zhǔn)基因，對(duì)比IL-22R1基因的擴(kuò)增效率，以人氣道平滑肌細(xì)胞組為對(duì)照樣品，每個(gè)樣品中IL-22R1基因相對(duì)于對(duì)照樣品的表達(dá)量，以2－△△Ct值表示(Ct值代表到達(dá)檢測熒光閾值的循環(huán)數(shù))。

1.2.5 噻唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞增殖

1.2.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代 所有細(xì)胞均貼壁培養(yǎng)于10 m l完全培養(yǎng)液細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)。細(xì)胞長滿瓶底后用滅菌磷酸鹽緩沖液(PBS)洗2次，加0.25%胰蛋白酶消化1 min，倒掉胰蛋白酶，待輕搖細(xì)胞能完全脫落后，加完全培養(yǎng)基30 m l，用移液管吹散細(xì)胞，分裝于3個(gè)新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。

1.2.5.2 細(xì)胞刺激處理 待細(xì)胞長滿后，取其中一瓶，胰蛋白酶消化后收集細(xì)胞，用移液管吹打均勻，取兩滴細(xì)胞懸液用臺(tái)盼藍(lán)染色，于顯微鏡下計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)目，以每孔10 000個(gè)細(xì)胞接種到96孔板，每孔體積200μl。將培養(yǎng)板置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁后換無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h，使細(xì)胞同步化于G0期。取出培養(yǎng)板后棄去無血清培養(yǎng)基，加入含不同濃度IL-22的完全培養(yǎng)液，使 IL-22終濃度分別為:1 000 ng/ml，100 ng/ml，10 ng/ml。每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔，另設(shè)3孔細(xì)胞加入不含IL-22的完全培養(yǎng)液作陰性對(duì)照孔。置于CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)24 h。刺激結(jié)束后，每孔加入5 mg/ml MTT 20μl，振蕩混勻，于37℃、5%CO2繼續(xù)孵育 4 h，小心吸棄上清，每孔加150μl二甲基亞砜(DMSO)，振蕩10 min，使結(jié)晶物充分融解。選擇492 nm波長于Bio-Tek酶標(biāo)儀上測定各孔光吸收值。

1.2.6 流式細(xì)胞術(shù)(FACS)測細(xì)胞凋亡及壞死 臺(tái)盼藍(lán)記數(shù)細(xì)胞活力＞95%的氣道上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞以106/孔接種于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，細(xì)胞貼壁后換無血清1640或DMEM培養(yǎng)基24 h，使細(xì)胞同步于 G0期。分別以0，10，100，1 000 ng/ml IL-22刺激24 h，設(shè)3復(fù)孔。刺激結(jié)束以無二乙胺四乙酸(EDTA)的0.25%胰蛋白酶收集上清和底壁細(xì)胞。2 000 r/min，離心5 min。沉淀以無菌PBS洗，2 000 r/min，離心5 min。重復(fù)2次。沉淀以200μl binding緩沖液重懸。加入2μl AnnexinV-EGFP，5μl碘化丙啶(PI)。流式細(xì)胞儀檢測凋亡率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS16.0軟件進(jìn)行比較分析，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)用±s表示，多組間比較用單因素方差(ONE-WAY ANOVA)分析，組間兩兩比較用LSD法。

2 結(jié)果

2.1 氣道細(xì)胞在10%哮喘血清刺激后IL-22R1 mRNA的表達(dá)變化 哮喘血清刺激后的氣道上皮細(xì)胞IL-22R1mRNA表達(dá)明顯下降，僅為對(duì)照細(xì)胞表達(dá)的9%;而氣道平滑肌細(xì)胞經(jīng)哮喘血清刺激后IL-22R1 mRNA表達(dá)顯著性上升，為對(duì)照組氣道平滑肌細(xì)胞的345倍;但氣道成纖維細(xì)胞在哮喘血清刺激前后IL-22R1 mRNA表達(dá)無明顯變化。

2.2 MTT檢測人氣道細(xì)胞增殖 高濃度IL-22(1 000 ng/ml)作用人氣道上皮細(xì)胞平滑肌細(xì)胞12、24 h后與對(duì)照組相比較，細(xì)胞OD值顯著性下降(P＜0.01，P＜0.05)，高濃度IL-22作用細(xì)胞6 h細(xì)胞增殖無顯著性差異(P＞0.05)。中、低濃度的IL-22(10 ng/m l，100 ng/ml)作用細(xì)胞后 6、12、24 h，氣道上皮細(xì)胞增殖呈下降趨勢，而氣道平滑肌細(xì)胞增殖呈增高趨勢，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。不同濃度的IL-22作用于人氣道成纖維細(xì)胞6、12 h或24 h后，細(xì)胞增殖與對(duì)照組相比無顯著性差異(P＞0.05)。見圖1。

2.3 流式細(xì)胞術(shù)觀察不同濃度IL-22刺激下氣道細(xì)胞凋亡及壞死百分比 不同濃度的IL-22刺激時(shí)氣道上皮細(xì)胞凋亡率顯著下降(P＜0.05)，低劑量的IL-22(10 ng/ml)作用細(xì)胞時(shí)壞死率顯著升高(P ＜0.01)，中、高濃度(100 ng/ml，1 000 ng/m l)的IL-22刺激下的氣道上皮細(xì)胞壞死率呈增高趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。不同濃度的IL-22(10 ng/m l、100 ng/m l、1 000 ng/ml)刺激氣道平滑肌細(xì)胞后凋亡率及細(xì)胞壞死率無顯著性差異(P＞0.05)。不同濃度的IL-22刺激氣道成纖維細(xì)胞后細(xì)胞凋亡率無顯著性改變(P＞0.05)。中、高濃度 IL-22(100 ng/m l，1 000 ng/ml)刺激成纖維細(xì)胞后細(xì)胞壞死率顯著下降(P＜0.05)，低濃度的IL-22(10 ng/ml)作用后成纖維細(xì)胞壞死率呈下降趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1～表3。

圖1 不同濃度IL-22刺激人氣道細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)的OD值

表1 不同濃度IL-22刺激下氣道上皮細(xì)胞各成分百分比(±s，%)

表1 不同濃度IL-22刺激下氣道上皮細(xì)胞各成分百分比(±s，%)

與 IL-22 0 ng/ml組比較:1)P ＜0.05，2)P ＜0.01，下表同

74.27±2.55 12.73±1.25 0.27±0.06 IL-22 10 ng/ml組 82.07±1.25 8.50±0.731) 0.9±0.262)IL-22 100 ng/ml組 82.07±1.25 8.07±0.91) 1.20±0.662)IL-22 1 000 ng/ml組 80.43±1.75 9.10±1.301) 1.33±0.902)組別 正常 凋亡 壞死IL-22 0 ng/ml組

表2 不同濃度IL-22刺激下氣道平滑肌細(xì)胞各成分百分比(±s，%)

表2 不同濃度IL-22刺激下氣道平滑肌細(xì)胞各成分百分比(±s，%)

72.47±2.45 13.28±1.40 1±0.30 IL-22 10 ng/m l組 75.37±1.45 11.35±0.38 1.93±0.70 IL-22 100 ng/ml組 71.83±2.57 13.33±1.56 1.53±0.60 IL-22 1 000 ng/ml組組別 正常 凋亡 壞死IL-22 0 ng/ml組78.57±3.75 10.13±1.80 1.17±0.15

表3 不同濃度IL-22刺激下氣道成纖維細(xì)胞各成分百分比(±s，%)

表3 不同濃度IL-22刺激下氣道成纖維細(xì)胞各成分百分比(±s，%)

44.07±3.45 25.18±2.95 5.53±2.40 IL-22 10 ng/m l組 50.77±7.06 23.55±3.88 2.13±0.70 IL-22 100 ng/ml組 52.87±2.30 22.83±0.93 1.47±0.451)IL-22 1 000 ng/ml組 53.23±0.25 22.55±0.20 1.67±0.061)組別 正常 凋亡 壞死IL-22 0 ng/ml組

3 討論

IL-22最初被描述為一種IL-10相關(guān)的T細(xì)胞來源的誘導(dǎo)因子(IL-TIF)，屬于IL-10家族。最初認(rèn)為產(chǎn)生IL-22的輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)細(xì)胞是一種Th17細(xì)胞的變體〔10〕，但近來報(bào)道顯示除了 Th17 細(xì)胞外，其他細(xì)胞如 Th22〔11〕、Th1、γδT 細(xì)胞(10-12)、經(jīng)典的和非經(jīng)典的自然殺傷(NK)細(xì)胞以及CD11c+細(xì)胞均可以產(chǎn)生 IL-22〔12～15，1〕，但不包括組織細(xì)胞〔16～18〕。支氣管哮喘患者氣道上皮細(xì)胞屏障破壞，上皮細(xì)胞或壞死脫落，或細(xì)胞受損導(dǎo)致一些生長因子如上皮生長因子(EGF)、血小板來源生長因子(PDGF)釋放、TGF-β、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及乙酰膽堿釋放，從而促進(jìn)包括氣道平滑肌細(xì)胞增生、細(xì)胞外基質(zhì)沉積、血管再生在內(nèi)的氣管壁重構(gòu)〔19〕。數(shù)據(jù)顯示IL-22對(duì)人氣道上皮細(xì)胞的增殖具有抑制作用，并能使細(xì)胞凋亡，壞死增加。Besnard等人發(fā)現(xiàn)與野生型小鼠相比，IL-22缺失的小鼠過敏性氣道炎癥顯著下降，伴隨著嗜酸性粒細(xì)胞聚集下降和炎性細(xì)胞因子顯著下降。此外，野生型小鼠在致敏階段注入IL-22抗體可以減弱肺部過敏性炎癥。且資料顯示過敏性哮喘患者血清中IL-22水平增高。綜合這些數(shù)據(jù)表明IL-22可能促進(jìn)了支氣管哮喘氣道炎癥的發(fā)生，并且通過氣道上皮細(xì)胞發(fā)揮一定的作用。

哮喘血清刺激后的人氣道上皮細(xì)胞IL-22R1mRNA表達(dá)顯著降低，僅為對(duì)照組細(xì)胞的9%，顯示出哮喘血清通過降低人氣道上皮細(xì)胞對(duì)IL-22的敏感性，減少IL-22對(duì)氣道上皮細(xì)胞的作用，提示IL-22在支氣管哮喘的過程中對(duì)氣道上皮具有保護(hù)作用。研究者將IL-22抗體中和劑注入卵清蛋白(OVA)致敏后的OVA刺激階段的過敏性哮喘小鼠，發(fā)現(xiàn)氣道炎癥加重了，而給予重組IL-22則能防止肺部炎癥。此外一份近來的研究顯示IL-22可防止博萊霉素誘導(dǎo)的凋亡〔6〕。這些資料表明IL-22具有組織保護(hù)作用，這似乎表明IL-22在實(shí)驗(yàn)中顯示出對(duì)氣道上皮乃至對(duì)支氣管哮喘的雙重作用，認(rèn)為這可能與支氣管哮喘的病程即啟動(dòng)階段或持續(xù)階段、氣道上皮的狀態(tài)即生理狀態(tài)或是病理狀態(tài)相關(guān)。在支氣管哮喘疾病的啟動(dòng)階段，抑制氣道上皮細(xì)胞凋亡，促進(jìn)氣道上皮細(xì)胞壞死，抑制細(xì)胞增殖修復(fù)，從而促進(jìn)氣道炎癥的發(fā)生;而在支氣管哮喘的后續(xù)狀態(tài)則可能具有組織保護(hù)作用。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示高濃度的IL-22顯著抑制人氣道平滑肌細(xì)胞增殖，而中低濃度的IL-22作用后，氣道平滑肌細(xì)胞的增殖呈增高趨勢，這提示IL-22對(duì)人氣道平滑肌細(xì)胞的增殖作用可能具有濃度依賴性。IL-22作用人氣道平滑肌細(xì)胞后細(xì)胞凋亡和壞死無顯著性變化，表明IL-22可能沒有參與人氣道平滑肌細(xì)胞的凋亡和壞死程序。有趣的是，與氣道上皮細(xì)胞顯然不同，哮喘血清刺激下的氣道平滑肌細(xì)胞IL-22R1mRNA表達(dá)顯著上升。這提示支氣管哮喘的啟動(dòng)階段，IL-22很可能通過釋放不同濃度來發(fā)揮其對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞的作用;而在支氣管哮喘的后續(xù)階段，IL-22的濃度可能下降，這時(shí)IL-22很可能通過氣道平滑肌細(xì)胞IL-22R1對(duì)IL-22敏感性發(fā)生變化來調(diào)節(jié)其對(duì)氣道平滑肌的作用。在氣道成纖維細(xì)胞，中、高濃度的IL-22能顯著降低細(xì)胞壞死率。由此推測在氣道成纖維細(xì)胞，IL-22可能更多的是一種保護(hù)因子。然而直接用IL-22刺激后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且人氣道成纖維細(xì)胞在IL-22刺激后細(xì)胞凋亡無顯著性變化;此外，哮喘血清刺激后氣道成纖維細(xì)胞IL-22R1 mRNA的表達(dá)未顯示出任何變化，因而推測支氣管哮喘后續(xù)階段，IL-22對(duì)氣道成纖維細(xì)胞作用輕微。

總之，哮喘血清刺激下的氣道上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞IL-22R1 mRNA表達(dá)變化明顯，由此推測IL-22在支氣管哮喘中的作用是通過氣道上皮細(xì)胞和氣道平滑肌來完成。IL-22在支氣管哮喘中對(duì)氣道上皮的作用具有雙重性，并與支氣管哮喘的病程相關(guān);而對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞的作用則可能與濃度及病程相關(guān)。支氣管哮喘后續(xù)階段，IL-22對(duì)氣道成纖維細(xì)胞作用輕微。

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The effect of IL-22 on hum an airway structural cell

ZHANG Zhan，LAN Hai-Bing，ZHOU Li-Li，et al.
Department of Respiratory Disease，Nanfang Hospital，Southern M edical University，Guangzhou 510515，Guangdong，China

Objective To study the role of IL-22 on human airway epithelial cells，airway smooth muscle cell and airway fibroblasts.M ethods IL-22R1 mRNA of the above three cells in different groups weremeasured by real-time PCR.Cell proliferation of such three cellswere stimulated by IL-22 of different concentrations in different groups weremeasured by MTT assay.Cell apoptosis and necrosis in the above group weremeasured by FACS.Results IL-22 mRNA of airway epithelial cells stimulated by asthmatic sera was significantly reduced，while airway smoothmuscle cellswas increased to 345 times of control group.Therewas not difference between treatmentand control groups of airway fibroblasts.Cell proliferation was decreased in airway epithelial cells and airway smooth muscle cells in 1 000 g/m l IL-22 group(P＜0.05).IL-22 significantly reduced cell apoptosis and 10 ng/ml IL-22 increased cell necrosis in airway epithelial cells(P＜0.01).There were not significant difference of cell apoptosis and necrosis among different groups of airway smoothmuscle cells.Cell necrosis were significantly reduced in airway fibroblast stimulated by 100 ng/ml and 1 000 ng/m l IL-22(P＜0.05).Conclusions IL-22 has a dual role on airway epithelial cells in asthma pathologic process.The role of IL-22 on airway smoothmuscle cellsmaybe related to IL-22 concentration and disease course.The role of IL-22 on airway fibroblastsmay be very mild to asthma.

IL-22R1;IL-22;Human airway epithelial cells;Human airway smooth muscle cell;Human airway fibroblasts;Cell proliferation;Cell apoptosis;Cell necrosis

R33

A

1005-9202(2011)12-2222-04

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30770936)

1 腎內(nèi)科 2 心血管內(nèi)科重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 3 腎移植科

羅雅玲(1946-)，女，教授，主任醫(yī)師，主要從事呼吸系統(tǒng)哮喘病學(xué)研究。

張 旃(1974-)，女，在讀博士，主要從事呼吸系統(tǒng)哮喘病學(xué)研究。

〔2011-04-11收稿 2011-04-22修回〕

(編輯 袁左鳴/徐 杰)