扶正益津湯對(duì)放療所致免疫功能抑制小鼠細(xì)胞毒功能的影響

齊忠志 付勤

扶正益津湯對(duì)放療所致免疫功能抑制小鼠細(xì)胞毒功能的影響

齊忠志 付勤

目的觀察扶正益津湯對(duì)放療所致免疫功能抑制小鼠細(xì)胞毒功能的影響。方法以小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞溶解作用(MTC)和抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(ADCC)為指標(biāo)，觀察中藥扶正益津湯對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞毒活性的影響。結(jié)果扶正益津湯對(duì)受X射線照射所致免疫功能抑制小鼠細(xì)胞毒活性有顯著增強(qiáng)作用。結(jié)論扶正益津湯可用于放療輔助用藥。

細(xì)胞毒活性;免疫調(diào)節(jié);巨噬細(xì)胞

本文將以小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞溶解作用(MTC)和抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(ADCC)為指標(biāo)，觀察中藥扶正益津湯對(duì)放療所致免疫功能抑制小鼠細(xì)胞毒活性的影響，探討其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制和防治腫瘤作用的機(jī)理?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 YAC-1細(xì)胞株由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院衛(wèi)生部免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室惠贈(zèng);RPMI 1640培養(yǎng)基(日本)含10%滅活FCS、HEPES 2 mmol/L、L-glutamin 2 mmol/L、penicillin 100u/ml、streptomycin 100 μg/ml;125I-UdR、Na51Cr04均購自北京原子能研究所，放射性濃度分別為272～336 μCi/ml和11.2～14.7 μCi/ml;兔抗雞紅細(xì)胞血清為吉林省腫瘤防治研究所自制，凝集效價(jià)為1∶1120;ADCC效價(jià)為1∶2400。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康昆明系小鼠，6～12周齡，雌雄兼用。由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。

1.3 受試藥扶正益津湯主要由黃芪、女真子等組成，按吉林省腫瘤防治研究所常規(guī)方法煎制，水浴濃縮，每100 ml含生藥量24 g，置4℃冰箱備用。

1.4 實(shí)驗(yàn)分組將動(dòng)物按體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NS)，放射治療組(Rd)，受試藥物組(FY)，放射治療加受試藥物組(Rd+FY)。NS組每天每只小鼠給生理鹽水0.4 ml，連續(xù)灌胃7 d;Rd組于實(shí)驗(yàn)開始當(dāng)日給予X射線全身照射，采用SiemeneX射線治療機(jī)，將小鼠放入30 cm×30 cm×20 cm紙盒內(nèi)，小鼠在盒內(nèi)呈分散狀態(tài)，源距小鼠100 cm，射野為30 cm ×30 cm，劑量率為2 gy/min，總劑量率為6 gy，一次性全身照射;FY組每天每只小鼠灌胃給藥扶正益津湯0.4 ml(0.2 ml/ 10 g體重)，連續(xù)給藥7 d;Rd+FY組，扶正益津湯給藥及照射方法同上。

1.5 腹腔巨噬細(xì)胞制備見文獻(xiàn)［1］。

1.6 YAC-1細(xì)胞標(biāo)記見文獻(xiàn)［2］。

1.7 雞紅細(xì)胞(CRBC)標(biāo)記取自來亨雞翅靜脈血，生理鹽水洗2次，PBS懸浮，按文獻(xiàn)［3］即刻標(biāo)記。效靶比值為20∶1。

1.8 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞溶解作用(MTC活性)測(cè)定和抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(ADCC活性)測(cè)定:測(cè)定方法見文獻(xiàn)［1］并稍加改進(jìn)。把標(biāo)記的51Cr·CRBC，與抗血清在室溫下共育30 min，加至貼有巨噬細(xì)胞的孔中。自然釋放組和最大釋放組直接加51Cr·CRBC，不加抗血清和巨噬細(xì)胞。效靶比為1∶1。數(shù)據(jù)處理采用DAS軟件進(jìn)行組間比較。

2 結(jié)果

2.1 扶正益津湯對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的MTC活性的影響見表1。

表1 扶正益津湯對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的MTC活性的影響

由表1可見，F(xiàn)Y組MTC活性略高于正常對(duì)照組，組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。而Rd組MTC活性明顯低于正常對(duì)照組;當(dāng)服用扶正益津湯后，MTC活性明顯增高，與Rd組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05。結(jié)果表明，扶正益津湯能拮抗放射治療引起小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)MTC活性的抑制作用，但對(duì)免疫功能正常小鼠MTC活性作用較小。

2.2 扶正益津湯對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC活性影響見表2。

由表2可見，扶正益津湯給藥組ADCC活性最高，但與正常對(duì)照組比較，無顯著差異;放射治療組ADCC活性最低，與正常對(duì)照組比較有顯著性差異;加服扶正益津湯后，與放射治療組比較，ADCC活性升高顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

多數(shù)腫瘤患者在接受化療、放療過程中，往往會(huì)出現(xiàn)WBC數(shù)降低，免疫功能下降，惡心、嘔吐等副反應(yīng)，嚴(yán)重者可影響放化療的進(jìn)行，給臨床治療工作帶來困難。因此，開展扶正中藥的實(shí)驗(yàn)研究，重視中醫(yī)中藥在腫瘤防治中的作用，對(duì)提高腫瘤臨床治療具有十分重要的意義。

扶正益津湯對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC和MTC細(xì)胞毒活性有提高作用，可使因放射治療作用引起免疫功能抑制小鼠細(xì)胞毒活性顯著增強(qiáng)。由此提示我們，扶正補(bǔ)益中藥增強(qiáng)免疫能力作用的機(jī)理可能來自于其調(diào)整腫瘤患者的免疫機(jī)能以達(dá)到抗癌之目的。

扶正益津湯對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞細(xì)胞毒功能的影響不甚明顯，雖有增強(qiáng)趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其機(jī)理可能與扶正中藥“虛則補(bǔ)之，損則益之”作用有關(guān)。上述結(jié)果說明，扶正益津湯具有免疫調(diào)節(jié)作用，即對(duì)放療引起的免疫功能抑制小鼠細(xì)胞毒活性有增強(qiáng)作用。提示，扶正中藥可能是通過增強(qiáng)機(jī)體免疫功能來達(dá)到抗癌祛邪作用的。

［1］龔守良.實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù).長春:吉林科學(xué)技術(shù)出版社，1991:196-199．

［2］于永利.人參花總皂甙在體外對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響.中國免疫學(xué)雜志，1985，1(2):28．

［3］翁惠如.K細(xì)胞的檢測(cè).臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)(上冊(cè))．上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1983，107．

130012吉林省長春腫瘤醫(yī)院放療科(齊忠志);吉林省長春腫瘤防治研究所(付勤)