中藥對(duì)合浦珠母貝插核手術(shù)傷口愈合效果和珍珠質(zhì)量的影響

張 希, 邢孔武, 喻達(dá)輝, 黃桂菊

(1．農(nóng)業(yè)部海水養(yǎng)殖生態(tài)與質(zhì)量控制重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室, 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 南海水產(chǎn)研究所, 廣東 廣州510300; 2. 上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院, 上海 201603)

中藥對(duì)合浦珠母貝插核手術(shù)傷口愈合效果和珍珠質(zhì)量的影響

張 希1,2, 邢孔武1, 喻達(dá)輝1, 黃桂菊1

(1．農(nóng)業(yè)部海水養(yǎng)殖生態(tài)與質(zhì)量控制重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室, 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 南海水產(chǎn)研究所, 廣東 廣州510300; 2. 上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院, 上海 201603)

研究了3種中藥對(duì)合浦珠母貝(Pinctada fucata)插核手術(shù)后體重日增長(zhǎng)速度、傷口的愈合效果及其對(duì)珍珠質(zhì)量的影響。試驗(yàn)采用白藜蘆醇、蘆薈膠和云南白藥對(duì)插核傷口進(jìn)行單次處理(插核手術(shù)后及時(shí)處理)和3次處理(手術(shù)后第5天和第10天分別進(jìn)行第2次和第3次處理), 對(duì)體質(zhì)量日增長(zhǎng)速度、愈合率和珍珠質(zhì)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果顯示, 休養(yǎng)期各組體質(zhì)量日增長(zhǎng)速度變化趨勢(shì)基本相同, 早期幾乎全為負(fù)增長(zhǎng)(0.06～-0.26 g/d), 第16天基本恢復(fù)正常生長(zhǎng)水平, 達(dá)到0.54～0.93 g/d, 后期云南白藥單次處理組的增長(zhǎng)速度最快(1.52 g/d), 顯著高于對(duì)照組(0.34 g/d)(P＜0.05), 但處理次數(shù)對(duì)體質(zhì)量增長(zhǎng)的影響不大。各試驗(yàn)組愈合率均較高, 10天時(shí)試驗(yàn)組的愈合率達(dá)90%以上(90.7%～99.2%), 顯著高于對(duì)照組(79.8%)(P＜0.05), 其中云南白藥處理組的愈合率最高。各處理組的商品珠比例(87%～90%)均較高,但優(yōu)質(zhì)珠比例各組差異較大, 最高的是白藜蘆醇和云南白藥單次用藥組, 分別為52.4%和54.8%。上述結(jié)果表明, 中藥處理對(duì)傷口的愈合和珍珠質(zhì)量具有一定的促進(jìn)作用, 其中, 白藜蘆醇或云南白藥對(duì)傷口單次處理的效果最好。

合浦珠母貝(Pinctada fucata); 中藥處理; 愈合率; 珍珠質(zhì)量

合浦珠母貝(Pinctada fucata)是中國(guó)人工養(yǎng)殖海水珍珠的主要貝類。中國(guó)合浦珠母貝養(yǎng)殖珍珠的研究生產(chǎn)始于20世紀(jì)中期, 珍珠養(yǎng)殖過(guò)程中的插核手術(shù)是珍珠養(yǎng)殖的核心技術(shù)。插核手術(shù)實(shí)際是對(duì)珍珠貝實(shí)施的一種外科手術(shù), 強(qiáng)制性的手術(shù)對(duì)貝體的創(chuàng)傷在所難免, 施術(shù)后會(huì)造成母貝的機(jī)體免疫能力下降, 且易引起插核傷口的細(xì)菌感染, 嚴(yán)重影響插核母貝的健康[1-3]。近年來(lái), 有關(guān)珍珠養(yǎng)殖技術(shù)的研究,大多集中在對(duì)養(yǎng)殖過(guò)程中養(yǎng)殖方式的改進(jìn)、遺傳多樣性和育珠母貝的選育上[4-9], 而忽視插核技術(shù)中對(duì)母貝傷口恢復(fù)的相關(guān)研究。針對(duì)這一問(wèn)題, 本試驗(yàn)選擇幾種溫和的中藥對(duì)合浦珠母貝插核手術(shù)后的傷口進(jìn)行處理, 以了解不同藥物對(duì)傷口愈合的效果, 并探討單次和多次用藥對(duì)愈合效果的差異, 以及對(duì)育珠效果的影響, 為優(yōu)化插核育珠技術(shù)提供技術(shù)指導(dǎo)[10-11]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)貝

試驗(yàn)?zāi)肛悶橐阒檎渲閳?chǎng)在海南陵水縣黎安港養(yǎng)殖的2齡貝, 殼高6.0～7.0cm, 貝的性腺大部分飽滿,少數(shù)性腺較飽滿, 貝體健康, 鱗片生長(zhǎng)旺盛。

1.2 試驗(yàn)用中藥

試驗(yàn)所用白藜蘆醇(粉劑)由長(zhǎng)沙一家生物制品有限公司制造, 白藜蘆醇為芪三酚, 3,5,4′-三羥基芪,(E)-5-[2-(4-羥苯基)-乙烯基]-1,3-苯二酚, C14H12O3,含量98%以上, 灰白色粉末。蘆薈膠是以目前世界上最先進(jìn)的“冷凍穩(wěn)定法”技術(shù)從天然草本植物蘆薈中萃取而成, 其純度非常高, 不含任何化學(xué)添加劑和雜質(zhì)。云南白藥(粉劑) 成分為蒲黃、白及等, 為灰黃色至淺棕黃色的粉末, 可顯著促進(jìn)機(jī)體堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bEGF)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá), 從而使血管生長(zhǎng)加快, 有利于傷口的愈合。

1.3 試驗(yàn)方法

分別用白藜蘆醇(A)、蘆薈膠(B)和云南白藥(C)(粉劑)處理插核手術(shù)傷口, 處理次數(shù)分別為 1次處理(I)和 3 次(II), 共 6 個(gè)處理組： AI、AII、BI、BII、CI、CII, AI表示用白藜蘆醇處理1次, AII即處理3次, 其余以此類推。單次用藥組是在插核手術(shù)完成后即時(shí)對(duì)插核母貝的傷口只進(jìn)行 1次涂抹, 多次用藥組是在之后的第5天、第10天分別再用藥一次。每次每個(gè)實(shí)驗(yàn)貝用藥的劑量分別為： 白藜蘆醇 0.03～0.05 g; 蘆薈膠： 0.04～0.06 g; 云南白藥： 0.03～0.06 g,用棉簽沾取藥品涂于傷口處。另設(shè)對(duì)照組, 不對(duì)手術(shù)傷口進(jìn)行任何的藥物處理。每個(gè)試驗(yàn)組900只貝。

2009年5月2日進(jìn)行清貝作業(yè), 用刀切斷足絲并刮除貝殼表面的附著生物[12], 然后按 60個(gè)/框放入術(shù)前處理框(40 cm×35 cm×15 cm), 吊到浮筏下5～6 m水層。一星期后進(jìn)行水層溫差刺激處理, 共處理3次, 每次處理的間隔時(shí)間為5 d, 即分別于5月9日、15日、21日將深吊(5～6 m)的試驗(yàn)貝提起, 切斷足絲后淺吊30 h(浮筏下1m以上的水層), 利用兩水層的溫差刺激貝體, 促進(jìn)性腺排放。試驗(yàn)組的貝于2009年5月23日至5月25日進(jìn)行插核手術(shù), 6組共用插核5400只貝, 對(duì)照組共用900只貝, 每貝插核1粒, 插左袋, 珠核直徑為6.66～7.26 mm。施術(shù)后將插核貝放入休養(yǎng)籠(50 cm×50 cm×10 cm), 每籠100只貝, 吊養(yǎng)于浮筏下5 m水層, 試驗(yàn)組的貝于5月28日至5月30日進(jìn)行第二次藥物處理, 于6月2號(hào)至6月4號(hào)進(jìn)行第3次藥物處理。 6月16日結(jié)束休養(yǎng)期, 休養(yǎng)期后轉(zhuǎn)入片狀籠吊養(yǎng)于浮筏下3～4m進(jìn)行育珠, 育珠期間每個(gè)月進(jìn)行一次清貝工作, 12月31日結(jié)束育珠期, 開貝收獲珍珠。

1.4 各指標(biāo)的測(cè)定

休養(yǎng)期間, 每組測(cè)定50個(gè)插核貝的體質(zhì)量變化,分別在第6天、第11天、第16天、第21天稱量一次貝體的體質(zhì)量, 計(jì)算體質(zhì)量的日增長(zhǎng)速度。記錄每組50個(gè)貝在第6天、第8天、第10天和第12天的傷口愈合率, 愈合率=愈合個(gè)數(shù)/存活的插核貝數(shù)。按珍珠質(zhì)量統(tǒng)計(jì)素珠、污珠棱柱珠、異形珠、商品珠和優(yōu)質(zhì)珠的粒數(shù), 計(jì)算各品質(zhì)珍珠所占的比例[13-14]。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用 Excel對(duì)愈合率和休養(yǎng)期、育珠期的存活率、留核率、珍珠質(zhì)量進(jìn)行樣本頻率的假設(shè)檢驗(yàn)[15],以此來(lái)統(tǒng)計(jì)各組差異的顯著性, 比較各組優(yōu)質(zhì)珠比率的差異。采用One-way ANOVA分析體質(zhì)量的日增長(zhǎng)速度[16]。

2 結(jié)果

2.1 中藥處理對(duì)體質(zhì)量增長(zhǎng)的影響

術(shù)后至第21天休養(yǎng)期間, 各組體質(zhì)量日增長(zhǎng)速度變化趨勢(shì)基本相同, 但同一藥物不同處理次數(shù)對(duì)體質(zhì)量日增長(zhǎng)的影響不大(表1)。術(shù)后第6天, 除CⅡ組外(0.06 g/d), 其余試驗(yàn)組的體質(zhì)量均呈負(fù)增長(zhǎng)(-0.01～0.26 g/d), 對(duì)照組下降最大(-0.49 g/d)。第11天測(cè)量, 各組均開始體質(zhì)量增長(zhǎng), 其中AⅡ[(0.23±0.15)g/d]和 CⅡ[(0.17±0.13)g/d]組的增速最慢, 顯著低于對(duì)照組[(0.70±0.37)g/d,P＜0.05],BⅡ[(0.65±0.25)g/d]組增速最快, 顯著高于 CⅡ組[(0.17±0.13)g/d,P＜0.05]。第 16 天后, 各組體質(zhì)量增速變化不大, 表明已基本恢復(fù)到正常生長(zhǎng)狀態(tài), 但至第21天, CI組的增速(1.52 g/d)明顯高于其余各組(0.50～0.82 g/d), 顯著高于 BI(0.50 g/d)、BII(0.63 g/d)和對(duì)照組(0.34 g/d)(P＜0.05)。

表1 3種中藥處理后合浦珠母貝插核貝體質(zhì)量日增長(zhǎng)速度的比較Tab. 1 Daily growth rates of body weight for Pinctada fucata treated with three Chinese traditional medicines after nucleus insertion

2.2 藥物處理后傷口的愈合率

術(shù)后6 d各組愈合率達(dá)到50%左右(表2), 其中AⅡ(63.78%)和 BⅡ(66.40%)組的愈合率最高, 顯著高于AⅠ(46.51%)、BⅠ(42.86%)和對(duì)照組(36.29%)(P＜0.05), 其余各組間及其與對(duì)照組間沒(méi)有顯著性差異(P＞0.05); 術(shù)后 8天, 除 AI(65.12%)和 BI(71.43%)外, 其余各組的愈合率均在80%以上(80.00%～93.75%), 顯著高于對(duì)照組(60.48%)(P＜0.05), 但相互之間不存在顯著差異(P＞0.05); 插核10天后, 90%個(gè)體(90.70%～99.22%)的傷口已基本愈合,顯著高于對(duì)照組的 79.84%(P＜0.05), 但組間不存在顯著性差異(P＞0.05); 至第 12天, 試驗(yàn)組和對(duì)照組的傷口全部愈合。

表2 休養(yǎng)期間傷口愈合率的比較Tab. 2 Recuperation rates during recovery period

2.3 中藥處理對(duì)珍珠質(zhì)量的影響

各組的素珠、污珠和異形珠的比例均比較低, 絕大部分都在 5%以下, 商品珠率則高達(dá) 85%以上(表3), 但優(yōu)質(zhì)珠比例則差異較大, 其中, AⅠ和CⅠ組最高, 分別為 52.42%和 54.81%, 均顯著高于對(duì)照組(41.23%)(P＜0.05)。CⅡ組的優(yōu)珠率(37.38%)最低,AII、BI和BII組均在45%左右, 高于對(duì)照組。

表3 藥物處理對(duì)珍珠質(zhì)量的影響Tab. 3 Impact of traditional Chinese medicines on the quality of pearls

3 討論

3.1 藥物處理對(duì)術(shù)后體質(zhì)量日增長(zhǎng)和愈合效果的影響

在早期各處理組體質(zhì)量日增長(zhǎng)速度呈下降趨勢(shì),至16 d后體質(zhì)量增長(zhǎng)速度基本恢復(fù)正常, 但云南白藥單次處理組在后期增長(zhǎng)速度比其他組高許多, 且其愈合率也是比較高的, 而且云南白藥多次用藥組的愈合率最高, 表明云南白藥對(duì)貝體生理機(jī)能有一定影響, 但其作用機(jī)制還有待研究?？赡芘c其具有促進(jìn)組織修復(fù)的效用有關(guān)[17]?，F(xiàn)代藥理研究表明, 云南白藥具有抗炎、促進(jìn)傷口修復(fù)和抑菌等功能[18]。此外, 3種中藥早期的愈合效果均優(yōu)于對(duì)照組, 表明中藥對(duì)傷口愈合均能起到一定的效用, 相同藥物單次和多次處理后的體質(zhì)量差異不顯著, 說(shuō)明處理次數(shù)對(duì)傷口的治愈效果影響不大。試驗(yàn)10 d后傷口愈合率均達(dá)到90%以上, 與企鵝貝的情況(6～10 d基本都能愈合)差不多[19]。

3.2 藥物處理對(duì)珍珠質(zhì)量的影響

各試驗(yàn)組中, 白藜蘆醇和云南白藥單次用藥組的優(yōu)質(zhì)珠比例最高, 分別為 52.4%和 54.8%, 且與對(duì)照組存在顯著差異, 表明這兩種中藥對(duì)提高珍珠質(zhì)量具有促進(jìn)作用。在以前的研究報(bào)道中不同研究者不同處理方法所獲得的優(yōu)質(zhì)珠比例不同, 如鄧陳茂等只進(jìn)行術(shù)前處理的優(yōu)質(zhì)珠比例低于 35%[20], 低于本研究的優(yōu)質(zhì)珠比例。但在勞贊等的研究中, 經(jīng)過(guò)術(shù)前處理后優(yōu)質(zhì)珠比例達(dá)到53.1%和51.4%[17], 優(yōu)質(zhì)珠比例高于本研究結(jié)果, 因此橫向比較意義不大, 主要看與對(duì)照組差異是否顯著。但從商品珠比例來(lái)看,各試驗(yàn)組差異不大, 且與對(duì)照組差異不顯著。因此白藜蘆醇和云南白藥對(duì)優(yōu)質(zhì)珠比例影響的穩(wěn)定性還有待進(jìn)一步檢驗(yàn)。

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Impact of traditional Chinese medicines on recuperation of nucleus inserting cut and pearl quality in pearl oysterPinctada fucata

ZHANG Xi1,2, XIN Kong-wu1, YU Da-hui1, HUANG Gui-ju1
(1. Key Laboratory of Mariculture, Ecology and Quality Control, Ministry of Agriculture; South China Sea Fisheries Research Institute, the Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China; 2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201603, China)

Oct., 25, 2010

Pinctada fucata; traditional Chinese medicine treatment; recover rate; pearl quality

The effects of three traditional Chinese medicines on daily growth rates of body weight, wound recover rates after nucleus insertion, and pearl quality were investigated. Resveratrol, Aloe gel and Yunnanbaiyao were used to treat the implanted oysters by single or multiple administrations (treated at 5 d and 10 d after implantation). The results showed that daily growth rates of body weight in each group changed in the same manner. Negative daily growth rates in the early stage were observed. Daily growth rates were not normal until 16 days after first treatment,reaching 0.54～0.93g/d. At the end of the recovery period, the group with Yunnanbaiyao single treatment showed the greatest daily growth rate (1.52 g/d), which was significantly higher than that of the control group (0.34 g/d) (P＜0.05). However, there was little difference between single and multiple treatments in daily growth rates. The recover rates were generally high for all treatments and get to over 90% (90.7% ～ 99.2%) after 10 days, which were significantly higher than that of the control group (79.8%) (P＜ 0.05). The highest recover rate was observed in the group treated with Yunnanbaiyao. The proportion of commercial pearls was high in each group (87%～90%), but the proportions of elite pearls showed significant difference among groups, while the groups with single treatment of Resveratrol or Yunnanbaiyao reached the highest, being 52.4% and 54.8%, respectively. This study suggested that the three traditional Chinese medicines are beneficial to wound recuperation and pearl quality, among which Resveratrol and Yunnanbaiyao single treat are better.

S966.23

A

1000-3096(2011)06-0025-05

2010-10-26;

2011-01-29

國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2006BAD01A13); 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(200903028); 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2006B20201063); 廣東省海洋漁業(yè)科技推廣項(xiàng)目(A200901A10)

張希(1984-), 女, 河北石家莊人, 碩士, 從事海洋生物技術(shù)研究, E-mail： vivicici-0627@163.com; 喻達(dá)輝, 通信作者, 博士,博士研究生導(dǎo)師, 研究員, E-mail： pearlydh@163.com

梁德海)