一種中國南海枝網(wǎng)刺柳珊瑚次級代謝產(chǎn)物研究*

趙 杰,侯改芳,李秀保,邵長倫,劉 洋,管華詩,魏玉西,王長云**

(1.中國海洋大學(xué)醫(yī)藥學(xué)院,海洋藥物教育部重點實驗室,山東青島266003;2.中國科學(xué)院南海海洋研究所,廣東廣州510000;3.青島大學(xué)生物系,山東青島266071)

自從Weinheimer等人于1969年從柳珊瑚中發(fā)現(xiàn)豐富的具有獨特結(jié)構(gòu)和強烈生物活性的前列腺素類化合物以來[1],柳珊瑚化學(xué)成分的研究成為海洋天然產(chǎn)物研究的1個熱點。近年來對柳珊瑚的研究仍很活躍,僅在2006—2008年3 a間,從不同種屬的柳珊瑚中發(fā)現(xiàn)新化合物200余個[2-4],包括甾體、萜類、前列腺素類和生物堿等結(jié)構(gòu)類型,大多數(shù)具有克生、抗炎、抗腫瘤、抗菌、抗氧化等活性。

枝網(wǎng)刺柳珊瑚Echinogorgia sassapo reticulata(Esper)屬珊瑚蟲綱(Anthozoa),八放珊瑚亞綱(Octocorallia),柳珊瑚目(Dendrophylliidae),類尖柳珊瑚科(Paramuriceidae),刺柳珊瑚屬(Echinogorgia)。該屬柳珊瑚化學(xué)成分的研究報道比較少[5-8]。目前為止,從Echinogorgia屬中發(fā)現(xiàn)的化學(xué)成分主要有倍半萜、多羥基甾醇、酯類等。本研究組已對采自海南島東岸萬寧海域的枝網(wǎng)刺柳珊瑚E.sassapo reticulata的化學(xué)成分進行了研究[8],本文對采自海南島西岸臨高海域的同種柳珊瑚進行了進一步研究,從其提取物的乙酸乙酯相中分離得到13個單體化合物,包括3個核苷類化合物(1-3),1個堿基類化合物(4),2個甘油醚類化合物(5-6),1個倍半萜類化合物(7),2個苯衍生物類化合物(8-9),以及4個甾醇類化合物(10-13)。并對化合物1-3進行了活性測試。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

實驗材料:枝網(wǎng)刺柳珊瑚Echinogorgia sassapo reticulata(Esper)樣品于2006年采自海南臨高新盈鎮(zhèn)海域。由中國科學(xué)院南海海洋研究所黃暉研究員鑒定,樣品(HN-LCJ-20060032)存于中國海洋大學(xué)海洋藥用生物資源標(biāo)本室。

實驗試劑:石油醚(60～90℃)、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇、冰醋酸、二氯甲烷等均為分析純,甲醇為分析純和色譜純。柱層析硅膠100～200目,200～300目;硅膠GF254為分析純。

顯色劑:香草醛-濃硫酸(15%濃硫酸的香草醛飽和溶液);10%硫酸的乙醇溶液;碘。

1.2 實驗儀器

JEOLJNM-ECP600型核磁共振波譜儀(600 M Hz)(日本電子);M icromass Q-TOF型質(zhì)譜儀(美國Waters公司);Agilent 6890GC/5973MS色質(zhì)聯(lián)用儀;ZF-I型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠);Nicolet Nexus 470型紅外波譜儀(Thermo Electron公司);高效液相色譜儀(w aters公司)(1525泵,2996二極管陣列檢測器,717自動進樣器);Kromasil C18柱:7μm,10 mm×250 mm(瑞典Eka公司);LABOROTA 4000-efficient旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(德國Heidoph公司);BP121S萬分之一電子天平(Sarto rius公司);柱層析硅膠與正相薄層層析板(青島海洋化工廠);反相RP-18層析硅膠板(德國Merck公司);Sephadex LH-20凝膠色譜填料(Amersham Pharmacia Biotech中國分裝);層析用玻璃減壓色譜柱(天津Synthw are公司)。

1.3 提取與分離

取冷凍枝網(wǎng)刺柳珊瑚樣品(1 200 g)進行粉碎,用95%乙醇和氯仿-甲醇混合液(1∶1)各浸提3次,每次1 d并超聲1 h。將提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,用10倍量的甲醇脫鹽3次,減壓濃縮得總浸膏(10.2 g)。浸膏用水稀釋后,用二倍體積的乙酸乙酯萃取6次,減壓濃縮萃取液得到乙酸乙酯相浸膏(4.0 g)。對乙酸乙酯相進行了鹵蟲致死活性及斑馬魚胚胎毒性測定,發(fā)現(xiàn)其具有弱的鹵蟲致死活性。

乙酸乙酯相先經(jīng)正相減壓硅膠柱層析(VLC),石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫,得到8個組分(1～8)。經(jīng)過硅膠、Sephadex L H-20、反相硅膠ODS柱層析,以及高效液相色譜分離,從組分4得到化合物7(4.5 mg)和13(25.4 mg);從組分5得到化合物5(6.7 mg);從組分6得到化合物6(5.5 mg),10(2.1 mg),11(2.3 mg)和12(2.8 m g);從組分7得到化合物1(15.7 mg),2(10.3 mg),3(8.9 mg)和4(7.8 mg);從組分8得到化合物8(3.5 mg)和9(2.8 m g)。

1.4 鹵蟲致死活性實驗

鹵蟲致死活性實驗依照Solis的改良法[9-10]。鹵蟲致死活性采用校正死亡率表示:

校正死亡率%=[(DM SO對照組存活率-樣品組存活率)/DMSO對照組存活率]×100%。

空白對照組(海水)的情況用于觀察自然條件下鹵蟲的狀態(tài),跟蹤、判斷實驗情況。

1.5 斑馬魚胚胎毒性模型試驗

斑馬魚胚胎毒性模型試驗參照文獻方法進行[11-12]。采用Excel 2003對實驗數(shù)據(jù)進行處理;用SPSS17.0軟件計算各化合物對受試生物的毒性。

2 結(jié)果與討論

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色固體,香草醛硫酸溶液顯色為橘紅色,在紫外燈λ256 nm下有暗斑。ESI-M S m/z:245[M+H]+。IR譜顯示分子中含有羥基或氨基(3 500～3 000 cm-1)、C=C雙鍵(1 690 cm-1)、C=N雙鍵(1 601 cm-1);結(jié)合1H NM R、13C NM R譜確定其分子式為C9H12N2O6,不飽和度為5?；衔锏?3C NM R譜和DEPT譜在δC164.5,151.7處顯示2個季碳信號,在δC142.3,102.6處顯示2個CH信號,連同1H NM R譜中可觀測到的δH11.35(brs)處的1個H信號,δH7.87(d,J=7.8 Hz),5.63(d,J=7.8 Hz)2個相關(guān)的氫信號,可以推測化合物中含有尿嘧啶片段。1H NM R中δH4.01(dd,J=6.0,4.8 Hz),3.96(dd,J=4.8,4.2 Hz),3.83(1H,m),3.61(1H,m),3.55(1H,m)的連氧氫信號結(jié)合13C NMR中的δC88.6,85.5,74.3,70.5,61.4的連氧碳信號提示化合物中含有糖基片段。以上數(shù)據(jù)結(jié)合文獻報道,鑒定該化合物為尿嘧啶核糖核苷(uridine)[13]。

化合物2 白色粉末,香草醛硫酸溶液顯色為藍(lán)色,在紫外燈λ256 nm下有暗斑。ESI-M S m/z:229[M+H]+。其氫譜與化合物1極為相似。與化合物1相比,化合物2缺少了δH4.01(dd,J=6.0,4.8 Hz)的氫信號,而多出了δH2.08(m)的2個氫信號,提示化合物的C-2’位沒有被羥基取代。以上數(shù)據(jù)與文獻對照,鑒定化合物為2’-脫氧尿嘧啶核苷(2’-de-oxyuridine)[14]。

化合物3 羽狀無色結(jié)晶,香草醛硫酸溶液顯色為藍(lán)色,在紫外燈λ256 nm下有暗斑。ESI-MS m/z:243[M+H]+。其氫譜和碳譜都與化合物2極為相似。與化合物2相比,化合物3的13C NM R中δC12.3處多出1個甲基信號,而且雙鍵上的碳信號由δC102.6的CH信號變化為δC109.4的季碳信號,說明化合物雙鍵上C-5位的氫被甲基取代。1H NMR中化合物3比化合物2缺少了δH5.63(d,J=7.8 Hz)的氫信號,而多出了δH1.78(s)的1個甲基信號,驗證了以上的推論。綜合以上信息并與文獻對照,鑒定化合物為2’-脫氧胸腺嘧啶核苷(2’-deoxythymidine)[15-17]。

化合物4 淡黃色固體,香草醛硫酸溶液無顯色,在紫外燈λ256 nm下有暗斑。ESI-M S m/z:113[M+H]+。IR顯示有NH(3 017 cm-1)、C=O(1 695 cm-1)、C=C(1 603 cm-1)。1H NMR中有δH11.0(brs),10.92(brs),表明化合物中含有2個連氮的氫;13C NM R中有δC164.5,151.6,表明化合物中含有羰基。將以上數(shù)據(jù)與文獻報道的尿嘧啶比較,確定化合物為尿嘧啶(uracil)[13]。

化合物5 白色固體,香草醛硫酸溶液顯色為紫紅色。ESI-M S m/z:345[M+H]+。IR顯示有2個OH(3 410,3 389 cm-1)。1H NM R中可觀測到δH3.86(1H,m),3.71(dd,J=11.4,3.6 Hz),3.65(dd,J=11.4,5.4 Hz),3.53(dd,J=9.0,3.6 Hz),3.49(dd,J=9.0,6.6 Hz),3.45(m)的連氧的氫信號,推測化合物為有甘油的結(jié)構(gòu),且1個羥基被醚化。δH0.87(t,J=7.2 Hz)的三重甲基峰信號,以及δH1.26附近的CH2信號,表明化合物具有1個長鏈結(jié)構(gòu)。以上數(shù)據(jù)提示化合物為單鏈被醚化的甘油醚,由δH1.26(m)的氫信號的積分值30,結(jié)合文獻可推測化合物為batyl alcohol[18]。

化合物6 白色固體,香草醛硫酸溶液顯色為紫紅色。ESI-M S m/z:373[M+H]+。NM R譜與化合物5極為相似,只是在δH1.25(m)的氫信號的積分值為34,可推測化合物6也為甘油醚類化合物,脂肪鏈的鏈長與化合物5不同。結(jié)合文獻可推測化合物為1-O-eicosanylglycerol[19]。

化合物7 無色油狀液體。香草醛硫酸溶液顯色為黃色。ESI-M S m/z:231[M+H]+。其1H NMR譜在低場給出4個末端雙鍵質(zhì)子信號δH5.15(s),5.10(s),5.04(s),4.96(s),在高場給出1個甲基信號δH1.86(s)。結(jié)合文獻報道,確定化合物為11,13-dihydro-7,11-dehydro-3-desoxy-zaluzalanin C[20]。

化合物8 無色油狀物。香草醛硫酸溶液無明顯顯色,在紫外燈λ256 nm下有暗斑。ESI-M S m/z:301[M+Na]+。在1H NM R低場芳香區(qū)觀測到2個質(zhì)子信號δH7.72(dd,J=3.0,5.4 Hz),7.68(dd,J=3.0,5.4 Hz),可判斷芳環(huán)為1,2-鄰位取代且為對稱結(jié)構(gòu)。δH4.30(m)為與氧相連的CH2信號,δH0.96(t,J=7.8 Hz)為1個甲基信號。綜合以上分析,并與文獻對照,可確定化合物為鄰苯二甲酸二丁酯[21]。

化合物9 無色油狀物。香草醛硫酸溶液無明顯顯色,在紫外燈λ256 nm下有暗斑。ESI-M S m/z:315[M+Na]+。由在1H NMR低場芳香區(qū)觀測到的2個質(zhì)子信號δH7.73(dd,J=3.0,5.4 Hz),7.69(dd,J=3.0,5.4 Hz),可判斷芳環(huán)為1,2-鄰位取代。δH4.30(m)和4.21(m)為與氧相連的CH2信號,表明化合物不是對稱結(jié)構(gòu),所連接的2條鏈不一樣。δH0.96(t,J=7.2 Hz),0.92(t,J=7.2 Hz),0.86(d,J=7.2 Hz)為3個甲基信號;綜合以上分析,并與化合物8比較,可確定化合物為鄰苯二甲酸1-(2-甲基-丁基)酯-2-丁酯[22]。

化合物10 白色針狀晶體,香草醛硫酸溶液顯色為藍(lán)綠色。ESI-MS m/z:419[M+H]+。1H NMR中在低場區(qū)有δH5.24(m)和5.17(m)2個雙鍵氫信號。在δH3.78(m)和3.74(d,J=3.6 Hz)的連氧氫信號以及在高場區(qū)δH0.97(d,J=6.6 Hz),0.85(s),0.83(d,J=6.6 Hz),0.82(d,J=6.6 Hz),0.58(s)的甲基信號,均符合多羥基甾醇的特征。結(jié)合TLC以及文獻推斷該化合物為(22E)-5α-cholest-22-ene-3α,5α,6β-triol[23]。

化合物11 白色針狀晶體,香草醛硫酸溶液顯色為藍(lán)綠色。ESI-M S m/z:469[M+H]+。IR顯示羥基吸收(3 392 cm-1)。在低場區(qū)的δH5.19(m)及5.07(d,J=5.4 Hz)3個雙鍵氫信號表明化合物中含有2個雙鍵。由在高場區(qū)在δH0.98(d,J=6.6 Hz),0.90(s),0.88(d,J=6.6 Hz),0.79(d,J=6.6 Hz),0.81(d,J=6.6 Hz),0.54(s)的甲基信號以及在3.82(m)和3.50(brs)的連氧氫信號,可推測化合物為多羥基甾體類化合物。結(jié)合TLC及文獻以推斷該化合物為(22E,24S)-24-M ethyl-5α-cholesta-7,22-diene-3β,5α,6β,9-tetraol[24]。

化合物12 白色針狀晶體,香草醛硫酸溶液顯色為藍(lán)綠色。ESI-MS m/z:473[M+Na]+。在低場區(qū)有δH4.69(d,J=11.4 Hz),3.40(d,J=11.4 Hz)的2個連氧氫信號,提示化合物中含有1個CH2OH,在δH3.93(m)和3.37(m)的連氧氫信號,在高場區(qū)的δH0.99(d,J=6.6 Hz),0.97(s),0.92(d,J=6.6 Hz),0.81(d,J=6.6 Hz),0.79(d,J=6.6 Hz)的甲基信號可推測化合物為甾體類化合物。結(jié)合TLC以及文獻推斷該化合物為(24S)-methylene cholestane-3β,5α,6β,18-tetrol[25]。

化合物13 白色針狀晶體,香草醛硫酸溶液顯色為紫紅色。ESI-M S m/z:409[M+Na]+。1H NM R低場區(qū)的δH5.37(t,J=3.0 Hz)雙鍵氫信號,δH3.54(m)的連氧氫信號,在高場區(qū)的δH1.03(s),0.94(d,J=6.6 Hz),0.88(d,J=6.6 Hz),0.70(s)的甲基信號,結(jié)合TLC以及文獻推斷該化合物為膽甾醇[26]。

對3個核苷類化合物1、2和3進行了鹵蟲致死活性及斑馬魚胚胎毒性的測試?；衔镌?0μg/m L下對鹵蟲的致死率分別為10%、5%、5%,而在50μg/m L濃度下對斑馬魚胚胎均無明顯毒性。

本研究從枝網(wǎng)刺柳珊瑚中分離得到13個化合物,化合物3和13與從采自萬寧海域的枝網(wǎng)刺柳珊瑚E.sassapo reticulata中的化合物相同[8],表明,來自不同海區(qū)的柳珊瑚所含化合物有顯著差異。其他11個化合物為首次從該屬柳珊瑚中分離得到。此外,化合物9此前僅從煙草的揮發(fā)油中檢測到[22],本研究首次作為天然產(chǎn)物單體化合物分離得到,并首次報道其波譜數(shù)據(jù)?；衔?2僅從軟珊瑚Lobophy tum crassum中分離到過[25],此次為首次從柳珊瑚中分離得到。

2 物理常數(shù)與波譜數(shù)據(jù)

化合物1 ESI-M S m/z:245[M+H]+;IR(KBr)νmax3 500～3 000,1 690,1 601 cm-1;1H NM R(DM SO-d6,600 M Hz)δ:11.35(NH,brs),7.87(1H,d,J=7.8 Hz,H-6),5.78(1H,d,J=5.4 Hz,H-l’),5.63(1H,d,J=7.8 Hz,H-5),5.38(1H,d,J=4.8 Hz,OH),5.11(1H,d,J=4.8 Hz,OH),4.01(1H,dd,J=6.0,4.8 Hz,H-2’),3.96(1H,dd,J=4.8,4.2 Hz,H-3’),3.83(1H,m,H-4’),3.61(1H,m,H-5’),3.55(1H,m,H-5’);13CNMR(DMSO-d6,150 M Hz)δ:164.5(C,C-4),151.7(C,C-2),142.3(CH,C-6),102.6(CH,C-5),88.6(CH,C-1’),85.5(CH,C-4’),74.3(CH,C-2’),70.5(CH,C-3’),61.4(CH2,C-5’)。

化合物2 ESI-M S m/z:229[M+H]+;1H NMR(DMSO-d6,600 M Hz)δ:11.27(1H,brs,H-3),7.85(1H,d,J=7.8 Hz,H-6),6.15(1H,t,J=7.2 Hz,H-1’),5.63(1H,d,J=7.8 Hz,H-5),5.25(1H,d,J=4.8 Hz,OH),5.01(1H,t,J=4.8 Hz,OH),4.23(1H,m,H-3’),3.78(1H,dd,J=7.1,3.8 Hz,H-4’),3.55(2H,dd,J=12.0,3.6 Hz,H-5’),2.08(2H,m,H-2’)。

化合物3 ESI-M S m/z:243[M+H]+;1H NMR(DM SO-d6,600 M Hz)δ:11.28(1H,s,H-3),7.70(1H,s,H-6),6.17(1H,t,J=6.9 Hz,H-1’),5.25(1H,d,J=4.8 Hz,OH),5.04(1H,t,J=4.8 Hz,OH),4.24(m,1H,H-3’),3.77(1H,q,J=3.6 Hz,H-4’),3.56(2H,m,H-5’),2.06(2H,m,H-2’),1.78(3H,s,H-7);13C NM R(DM SO-d6,150M Hz)δ:163.8(C,C-4),150.5(C,C-2),136.2(CH,C-6),109.4(C,C-5),87.3(CH,C-4’),83.8(CH,C-1’),70.5(CH,C-3’),61.4(CH2,C-5’),39.6(CH2,C-2’),12.3(CH3,C-7)。

化合物4 ESI-M S m/z:113[M+H]+;IR(KBr)νmax3 017,1 695,1 603 cm-1;1H NMR(DM SO-d6,600 M Hz)δ:11.0(1H,brs,NH),10.92(1H,brs,NH),7.39(1H,d,J=7.8 Hz,H-6),5.42(1H,d,J=7.8 Hz,H-5);13C NMR(DMSO-d6,150M Hz)δ:164.4(C,C-4),151.1(C,C-2),142.4(CH,C-6),100.3(CH,C-5)。

化合物5 ESI-M S m/z:345[M+H]+;IR(KB r)νmax3 410,3 389 cm-1;1H NM R(CDCl3,600 M Hz)δ:3.86(1H,m,H-2),3.71(1H,dd,J=11.4,3.6 Hz,H-1),3.65(1H,dd,J=11.4,5.4 Hz,H-1),3.53(1H,dd,J=9.0,3.6 Hz,H-3),3.49(1H,dd,J=9.0,6.6 Hz,H-3),3.45(2H,m,H-1’),1.60(2H,m,H-2’),1.26(30H,m,H-3’～H-17’),0.87(3H,t,J=7.2 Hz,H-18’)。

化合物6 ESI-M S m/z:373[M+H]+;1H NM R(CDCl3,600 M Hz)δ:3.87(1H,m,H-2),3.72(1H,dd,J=11.4,3.6 Hz,H-1),3.64(1H,dd,J=11.4,5.4 Hz,H-1),3.52(1H,dd,J=9.0,3.6 Hz,H-3),3.48(1H,dd,J=9.0,6.6 Hz,H-3),3.43(2H,m,H-1’),1.59(2H,m,H-2’),1.25(34H,m,H-3’～H-19’),0.88(3H,t,J=7.2 Hz,H-20’)。

化合物7 ESI-MS m/z:231[M+H]+;IR:1 763,1 670,1 640,900 cm-1。1H NMR(CDCl3,600 M Hz)δ:5.15(1H,brs,H-15),5.10(1H,brs,H-15),5.04(1H,brs,H-14),4.96(1H,brs,H-14),4.68(1H,d,J=2.4 Hz,H-6),2.94(1H,d,J=13.2 Hz,H-5),2.86(1H,m,H-1),2.56(2H,m,H-9),2.51(2H,m,H-3),2.24(1H,t,J=12.6 Hz,H-8),2.03(2H,m,H-2),1.85(1H,m,H-8),1.86(3H,s,H-13)。

化合物8 ESI-M S m/z:301[M+Na]+;IR(KBr)νmax3 046,2 960,2 929,2 876,1 730,1 520,1 382,1 122,1 073 cm-1;1H NM R(CDCl3,600 M Hz)δ:7.72(1H,dd,J=3.0,5.4 Hz,H-3),7.68(1H,dd,J=3.0,5.4 Hz,H-4),4.30(2H,m,H-5),1.63(1H,m,H-6),0.96(3H,t,J=7.8 Hz,H-11)。

化合物9 ESI-M S m/z:315[M+Na]+;1H NMR(CDCl3,600 M Hz)δ:7.73(2H,dd,J=3.2,5.4 Hz,H-2,2’),7.69(2H,dd,J=3.2,5.4 Hz,H-3,3’),4.30(2H,m,H-5),4.21(2H,m,H-5’),1.63(2H,m,H-6,6’),0.96(3H,t,J=7.2 Hz,H-11),0.92(3H,t,J=7.2 Hz,H-11’),0.86(3H,d,J=7.2 Hz,H-12)。

化合物10 ESI-M S m/z:419[M+H]+;1H NMR(DM SO-d6,600 M Hz)δ:5.24(lH,m,H-23),5.17(lH,m,H-22),4.30(IH,d,J=4.8 Hz,OH),4.15(1H,d,J=4.8 Hz,OH),3.78(1H,m,H-3),3.74(1H,d,J=3.6 Hz,H-6),3.63(1H,brs,OH),2.10(1H,m,H,-4),1.95(1H,m,H-20),1.88(1H,m,H-24),1.72(1H,m,H-4),1.61(1H,m,H-25),0.97(3H,d,J=6.6 Hz,H,-21),0.85(3H,s,H-19),0.83(3H,d,J=6.6 Hz,H-26),0.82(3H,d,J=6.6 Hz,H-27),0.58(3H,s,H-18)。

化合物11 ESI-M S m/z:469[M+H]+;IR(KBr)νmax3 392 cm-1;1H NM R(DM SO-d6,600 M Hz)δ:5.19(2H,m,H-22,H-23),5.07(1H,d,J=5.4 Hz,H-7),4.52(1H,d,J=4.8 Hz,OH),4.25(1H,d,J=4.8 Hz,OH),3.82(1H,m,H-3),3.62(1H,brs,OH),3.39(1H,brs,OH),3.50(1H,brs,H-6),2.20(1H,ddd,J=12.6,3.6,3.6 Hz,H-1),2.01(1H,m,H-20),1.95(1H,dd,J=13.2,14.4 Hz,H-4),1.90(2H,s,H-24),1.84(1H,m,H-2),1.66(1H,dd,J=13.2,6.0 Hz,H-4),1.62(1H,d,J=4.8 Hz,H-24),1.61(1H,m,H-15),1.54(1H,m,H-15),1.54(1H,m,H-2),1.47(1H,m,H-25),1.31(1H,m,H-1),0.98(3H,d,J=6.6 Hz,H-21),0.90(3H,s,H-19),0.88(3H,d,J=6.6 Hz,H-28),0.81(3H,d,J=6.6 Hz,H-26),0.79(3H,d,J=6.6 Hz,H-27),0.54(3H,s,H-18)。

化合物12 ESI-M S m/z:473[M+Na]+;1H NMR(DMSO-d6,600 M Hz)δ:4.69(1H,d,J=11.4 Hz,H-18),4.40(1H,d,J=11.4 Hz,H-18),4.30(1H,d,J=4.8 Hz,OH),4.16(1H,d,J=4.8 Hz,OH),3.76(1H,m,H-3),3.73(1H,m,H-6),3.62(1H,brs,OH),0.99(3H,d,J=6.6 Hz,H-21),0.97(3H,s,H-19),0.92(3H,d,J=6.6 Hz,H-28),0.81(3H,d,J=6.6 Hz,H-27),0.79(3H,d,J=6.6 Hz,H-26)。

化合物13 ESI-MS m/z:409[M+Na]+;1H NMR(CDCl3,600 M Hz)δ:5.37(1H,t,J=3.0 Hz,H-6),3.54(1H,m,H-3),1.03(3H,s,H-19),0.94(3H,d,J=6.6 Hz,H-21),0.88(6H,d,J=6.6 Hz,H-26,H-27),0.70(3H,s,H-18)。

[1] Weinheimer A J,Sp raggins R L.Chemistry of coelenterates.XV.The occurrence of two new p rostaglandin derivatives(15-epi-PGA 2 and its acetate,methyl ester)in the gorgonian Plexaura homomalla[J].Tetrahedron Lett.,1969,59:5185-5188.

[2] Blunt JW,Copp B R,Hu W P,et al.Marine natural p roducts[J].Nat Prod Rep,2008,25:35-94.

[3] Blunt JW,Copp B R,Hu W P,et al.Marine natural p roducts[J].Nat Prod Rep,2009,26:170-244.

[4] Blunt JW,Copp B R,Munro M H G,et al.Marine natural p roducts[J].Nat Prod Rep,2010,27:165-237.

[5] Tillekeratne L M V,De Sikva E D,Mahindaratne MPD,et al.Xanthyletin and xanthoxyletin f rom a gorgonian,Echinogorgia sp.[J].J Nat Prod,1989,52(6),1303-1304.

[6] Tanaka J I,Miki H,Higa T.Echinofuran,a new furanosesquiterpene from the gorgonian Echinogorgza praelonga[J].J Nat Prod,1992,55(10):1522-1524.

[7] Qiu Y,Qi S,Zhang S,et al.New polyoxygenated steroids from the South China Sea gorgonian Echinogorgia aurantiaca[J].Pharmazie,2006,61(7):645-647.

[8] 郭奇,魏玉西,王長云,等.枝網(wǎng)刺柳珊瑚Echinogorgia sassapo reticulata(Esper)的化學(xué)成分研究[J].中國海洋藥物,2010,29(1):32-35.

[9] Solis PN,Wright CW,Anderson M M,et al.Amicro well cytotoxicity assay using A rtimiasalina(brine shrimp)[J].Planta Medica,1993,59(3):250-252.

[10] Meyer B N,Ferrigni N R,Putnam J E,et al.Brine shrimp:a convenient general bioassay for active plant constituents[J].Planta Medica,1982,45:31-34.

[11] Schulte C,and Nagel R.Testing acute toxicity in the embryo of zebra fish Brachy daniorerio.as an alternative to the acute fish test:Preliminary results[J].A TLA,1994,22:12-19.

[12] Strmac M,Braunbeck T.Effects of triphenyltin acetate on sur-vival,hatching success,and liver ultrastructure of early life stages of zebrafish(Daniorerio)[J].Ecotoxicol Environ Saf,1999,44(1),25.

[13] 周淑梅,周琨,肖定軍.南海小束格海綿中的天然含氮化合物[J].中國海洋藥物,2005,24(4):31-35.

[14] 鄒崢嶸,易楊華,姚新生,等.海地瓜化學(xué)成分研究[J].中國天然藥物,2004,2(6):348-350.

[15] 林文翰,馬愛英,季宇彬.中國南海軟珊瑚化學(xué)成分Sinularia sp.的研究[J].哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2006,22(2):1-3.

[16] 廖小建,徐石海,黃啟昌,等.海綿Callyspongia fibrosa的化學(xué)成分研究(I)[J].光譜實驗室,2005,22(2):281-283.

[17] 饒志剛,鄧松之,李鳳英.南海軟珊瑚Sarcophytonmolle化學(xué)成分的研究(一)[J].廣州化學(xué),1994,19(3):13-16.

[18] Radhika P,Rao V L,Laatsch H.Chemical constituents of amarine soft coral of the genus Lobophytum[J].Chem Pharm Bull,2004,52(11):1345-1348.

[19] Ouijano L,Cruz F,Navarrete I,et al.Alkyl glycerol monoethers in themarine sponge Desmapsamma anchorata[J].Lipids,1994,29(10):731-734.

[20] Bohlmann F,Van N L.Neue Guajanolide aus Podachaenium eminens[J].Phytochemistry,1977,16:1304-1306.

[21] 石瑛,田黎,王婧,等.海洋放線菌Micromonospora sp.與細(xì)菌Oceanospirillum sp.發(fā)酵液中化學(xué)成分的研究[J].中國海洋藥物雜志,2006,25(1):6-10.

[22] Leffingwell J C,Alford ED.Volatile constituents of Perique tobacco[J].Electron J Environ Agric Food Chem,2005,4(2):889-915.

[23] Notaro G,Piccialli V,Sica D.3β,5α,6β-trihydroxylated sterols with a saturated nucleus from two populations of the marine sponge Cliona copiosa[J].J Nat Prod,1991,54(6):1570-1575.

[24] Migliuolo A,OtaroI,Piccialli V,et al.New Tetrahydroxylated sterols from the marine sponge Spongia officinalis[J].J Nat Prod,1990,53(6):1414-1424.

[25] Venkateswarlu Y,Rao R M,Ramesh P.A new polyhydroxy sterol from the soft coral Lobophytum crassum[J].J Nat Prod.1997,60:1301-1302.

[26] 黃建設(shè),李慶欣,吳軍,等.粗吻海龍的化學(xué)成分研究[J].中草藥,2004,35(5):485-487.