近年來中藥對(duì)肺癌模型鼠的干預(yù)作用研究初探

★　許燕　王保芹　朱潔　童佳兵　李澤庚　(.安徽中醫(yī)藥大學(xué)　合肥 30038；.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院　合肥 30038)

近年來中藥對(duì)肺癌模型鼠的干預(yù)作用研究初探

★許燕1王保芹1朱潔1童佳兵2李澤庚1(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)合肥 230038；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院合肥 230038)

摘要：近年來關(guān)于中藥對(duì)肺癌模型小鼠作用的研究日益增多，其中不乏對(duì)小鼠自身免疫力影響、化療增效減毒、抗腫瘤機(jī)制等的研究。本文就近年中藥對(duì)肺癌模型鼠的干預(yù)作用實(shí)驗(yàn)研究做了簡要的概述。

關(guān)鍵詞：肺癌模型鼠;化療;中藥;增效減毒;抗癌

在中國的很多地區(qū)特別是城市，肺癌的發(fā)病率和死亡率日益增高，肺癌已成為人類健康不容忽視的強(qiáng)大殺手。在我國，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)結(jié)合中醫(yī)藥治療肺癌是一大特色，大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了中醫(yī)藥在腫瘤防治中的積極作用，特別是在增強(qiáng)免疫力、化療的增效減毒、逆轉(zhuǎn)耐藥性、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等方面都有相應(yīng)的研究。目前中藥對(duì)肺癌模型鼠的研究很多，通過查閱文獻(xiàn)，現(xiàn)將研究的大致情況綜述如下。

1中藥制劑增強(qiáng)模型鼠免疫力研究

近來有很多學(xué)者對(duì)中藥制劑提高肺癌模型鼠免疫力，從而達(dá)到抑制腫瘤的作用做了很多相關(guān)研究。如曾梅等[1]研究補(bǔ)氣化瘀方對(duì)Lewis肺癌小鼠血清TNF和IL-2的影響，證實(shí)其有調(diào)節(jié)免疫因子TNF和IL-2的作用，從而增強(qiáng)荷瘤小鼠的免疫力，達(dá)到抗腫瘤的作用。卞方等[2]觀察補(bǔ)腎益肺解毒方對(duì)Wista大鼠肺癌干預(yù)作用及其機(jī)理,得出結(jié)論，中藥高劑量組可降低K-ras的表達(dá)，抑癌基因p21表達(dá)高于模型組，補(bǔ)腎益肺解毒方能增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，抑制大鼠肺癌的發(fā)生、發(fā)展，為臨床進(jìn)一步應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。張錦林等[3]觀察補(bǔ)康靈對(duì)輻射損傷肺癌小鼠免疫功能的作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，補(bǔ)康靈聯(lián)合放療較單純放療可以提高荷瘤小鼠血清中細(xì)胞因子IL-2和IL-6的水平，調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能。劉偉等[4]探討靈芝孢子粉對(duì)肺癌模型小鼠腹腔巨噬細(xì)胞(M5)吞噬功能和血清IL-2的影響，實(shí)驗(yàn)表明靈芝孢子粉能明顯提高肺癌小鼠的抗腫瘤免疫水平，對(duì)肺癌具有一定的抑制作用。曹志友等[5]研究白桃湯劑對(duì)Lewis肺癌模型小鼠的治療作用及機(jī)制，得出結(jié)論，白桃湯的抑瘤作用可能與其能升高血清TNF-a水平，降低IL-6水平，提高免疫功能有關(guān)。張永軍等[6]觀察十全大補(bǔ)湯對(duì)肺癌小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用,同時(shí)觀察其抑瘤作用，得出結(jié)論，十全大補(bǔ)湯通過增強(qiáng)荷瘤小鼠免疫功能，而與瘤共存。張波等[7]研究蟲類攻毒法、草木解毒法對(duì)小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及其作用機(jī)制，得出結(jié)論，蟲類攻毒方、草木解毒方可以通過激活胸腺功能，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)，從而起到增強(qiáng)免疫、對(duì)抗腫瘤的作用。

2中藥對(duì)化療增效減毒的作用研究

中藥對(duì)肺癌患者化療中的增效及減毒作用，近年的實(shí)驗(yàn)研究也取得了不小的進(jìn)展。如王成剛等[8]通過研究中藥復(fù)方對(duì)Lewis肺癌移植鼠腫瘤微環(huán)境中吲哚胺2,3-二氧化酶表達(dá)的影響，證實(shí)中藥復(fù)方及化療藥物順鉑均可在不同程度上影響IDO表達(dá)水平，同時(shí)中藥復(fù)方與化療藥物順鉑具有協(xié)同作用，兩者在不同環(huán)節(jié)調(diào)控調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的作用與單一治療相比存在一定優(yōu)勢(shì)。鄭心等[9]通過研究肺康方對(duì)小鼠Lewis肺癌模型血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的抑制作用，得出結(jié)果肺康方對(duì)Lewis肺癌小鼠局部腫瘤生長有顯著抑制作用，對(duì)環(huán)磷酰胺抗腫瘤有協(xié)同增效作用，其配合化療能有效抑制腫瘤組織VEGF的表達(dá)。賀珊珊等[10]通過實(shí)驗(yàn)探討肺積1號(hào)方對(duì)la-795肺腺癌小鼠移植瘤生長的抑制作用，發(fā)現(xiàn)肺積1號(hào)方能夠明顯抑制la-795肺腺癌小鼠移植瘤的生長,與DDP合用有明顯增效作用。郝靜等[11]觀察Fas/FasL在荷瘤小鼠肺癌模型中的表達(dá)，得出結(jié)論中藥復(fù)方肺積散可影響荷瘤小鼠Fas/FasL蛋白的表達(dá),與順鉑合用可加強(qiáng)抗Lewis肺癌的作用。曹勇等[12]以Lewis肺癌移植小鼠建立肺癌模型，研究健脾補(bǔ)腎解毒方對(duì)肺癌的抑制作用及機(jī)理，發(fā)現(xiàn)健脾補(bǔ)腎解毒方對(duì)小鼠Lewis肺癌有一定的抑制作用,能增強(qiáng)順鉑對(duì)肺癌細(xì)胞的抑制殺傷作用。嚴(yán)慶文等[13]以小鼠Lewis肺癌為模型，運(yùn)用RT-PCR技術(shù)，觀察補(bǔ)腎化瘀解毒復(fù)方對(duì)小鼠Lewis肺癌肺轉(zhuǎn)移的抑制作用，以及瘤組織中nm23(腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因)mRNA表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎化瘀解毒復(fù)方能明顯抑制小鼠Lewis肺癌的自發(fā)性轉(zhuǎn)移，與化療藥有協(xié)同增效作用，其作用機(jī)制可能與促進(jìn)nm23mRNA的表達(dá)有關(guān)。齊路霞等[14]以動(dòng)物移植腫瘤造模的實(shí)驗(yàn)方法,觀察中藥復(fù)方肺積散對(duì)Lewis肺癌模型動(dòng)物的影響，結(jié)果表明中藥復(fù)方肺積散可影響荷瘤小鼠組織蛋白酶B的表達(dá),與順鉑合用可加強(qiáng)抗Lewis肺癌的作用。黃利敏等[15]采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以Lewis肺癌小鼠為模型，觀察六神丸的抗癌抗轉(zhuǎn)移作用，用免疫組化方法檢查移植瘤組織bFGF、CD34表達(dá)的影響，結(jié)果表明六神丸低劑量加順鉑組明顯增強(qiáng)抑瘤作用。在減輕化療毒性方面，也有學(xué)者做了相關(guān)研究。如張翠等[16]研究泰山四葉參對(duì)烏拉坦誘導(dǎo)的小鼠肺癌的作用及其可能的作用機(jī)理研究通過測(cè)定各組小鼠血清、肺、肝臟SOD活性，可以看出泰山四葉參水煎劑具有較強(qiáng)的抗氧化能力，可以激活小鼠體內(nèi)SOD活性，通過清除過氧化物損傷達(dá)到預(yù)防、治療肺癌的效果。同時(shí)通過及時(shí)消除體內(nèi)過氧自由基延緩或消除機(jī)體疲勞，改善小鼠的生存狀態(tài)，有利于改善肺癌治療過程中的毒副作用。

3中藥抗癌的其它機(jī)理研究

3.1誘導(dǎo)腫瘤凋亡包素珍等[17]通過實(shí)驗(yàn)研究黃芪建中湯對(duì)脾氣虛證肺癌小鼠抑瘤作用的可能作用機(jī)制，采用RT-PCR方法檢測(cè)caspase-3(細(xì)胞凋亡的重要因子)，發(fā)現(xiàn)黃芪建中湯組caspase-3/β-actin比值均高于腫瘤對(duì)照組和模型對(duì)照組，由此得出黃芪建中湯抑制脾氣虛證肺癌小鼠腫瘤的生長可能與上調(diào)caspase-3-mRNA的表達(dá)的轉(zhuǎn)錄有關(guān)。王海倫等[18]研究白藜蘆醇(Res)對(duì)小鼠Lewis肺癌細(xì)胞凋亡的影響，Res中、高劑量組AI明顯高于對(duì)照組，結(jié)果顯示白藜蘆醇可明顯抑制小鼠Lewis肺癌的生長，其機(jī)制可能與促進(jìn)細(xì)胞凋亡有關(guān)。張梅等[19]研究益氣養(yǎng)陰解毒方對(duì)Lewis肺癌(LLC)小鼠移植瘤生長及細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果顯示益氣養(yǎng)陰解毒方對(duì)Lewis肺癌小鼠移植瘤具有生長抑制作用，其作用機(jī)制可能與促進(jìn)Caspase-3表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)，與DDP聯(lián)合，這種作用增強(qiáng)。

3.2對(duì)腫瘤細(xì)胞周期的影響孫玲玲等[20]觀察益氣除痰方對(duì)Lewis肺癌小鼠腫瘤生長及細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)因子P16, p21/W IF1/CIP1、蛋白激酶C (PKC)、c-myc的影響，結(jié)果表明益氣除痰方能抑制小鼠Lewis肺癌的生長，其機(jī)制可能與其能通過上調(diào)P16、p21/WIF1/CIP1，下調(diào)PKC表達(dá)引起細(xì)胞周期阻滯，延長腫瘤細(xì)胞倍增時(shí)間相關(guān)。李秀麗等[21]觀察肺復(fù)康對(duì)Lewis肺癌模型小鼠腫瘤及細(xì)胞周期的影響，通過細(xì)胞周期分析表明肺復(fù)康將腫瘤細(xì)胞阻滯于G1期，對(duì)Lewis肺癌移植瘤有顯著抑制作用，其抗腫瘤作用可能與調(diào)控腫瘤細(xì)胞周期及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)。

3.3抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移王淑美等[22]研究益氣除痰方對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞及LEWIS肺癌小鼠腫瘤組織基質(zhì)金屬蛋白酶MMP1、MMP2、MMP9、MMP14等促腫瘤轉(zhuǎn)移因子表達(dá)的影響，益氣除痰方能抑制肺腺癌A549細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，降低MMP2、MMP14 mRNA轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)；能抑制LEWIS肺癌小鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移，降低其腫瘤組織MMP2、MMP14的表達(dá)，抗轉(zhuǎn)移可能是益氣除痰方治療肺癌的作用機(jī)制之一。郭斌等[23]建立小鼠Lewis肺癌模型,實(shí)驗(yàn)分為模型組、不同劑量苦參堿組、環(huán)磷酰胺組,計(jì)算原發(fā)瘤抑制率及肺轉(zhuǎn)移灶數(shù);采用Western blotting檢測(cè)原發(fā)瘤組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2、MMP-9)蛋白表達(dá)，結(jié)果顯示苦參堿明顯抑制小鼠Lewis肺癌原發(fā)瘤的生長和轉(zhuǎn)移,可能與其抑制腫瘤組織MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)有關(guān)。崔德利等[24]研究六君二陳解毒湯及其拆方對(duì)小鼠Lewis肺癌轉(zhuǎn)移的抑制作用及對(duì)移植瘤細(xì)胞VEGF和nm 23-H1表達(dá)的影響，結(jié)果表明六君二陳解毒湯及其拆方能抑制小鼠Lewis肺癌腫瘤自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的發(fā)生,其抗腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制可能與影響Lewis肺癌細(xì)胞VEGF和nm 23-H1的表達(dá)有關(guān)。

3.4逆轉(zhuǎn)耐藥性井歡等[25]研究補(bǔ)中益氣湯對(duì)A549/DDP細(xì)胞荷瘤小鼠實(shí)體瘤中耐藥相關(guān)酶GST和TopoⅡ表達(dá)的影響，探討補(bǔ)中益氣湯的作用機(jī)制，結(jié)果顯示補(bǔ)中益氣湯能下調(diào)A549/DDP實(shí)體瘤中耐藥相關(guān)酶GST和TopoII的表達(dá)水平。劉亞莉等[26]研究補(bǔ)中益氣湯對(duì)肺腺癌順鉑耐藥細(xì)胞株A549/DDP裸鼠移植瘤的作用機(jī)制。結(jié)果表明補(bǔ)中益氣湯能通過調(diào)控PI3K、AKT基因和蛋白的表達(dá)而干預(yù)順鉑的耐藥機(jī)制，這種干預(yù)作用具有一定的量效關(guān)系。

4小結(jié)

中藥對(duì)肺癌的抑制作用及其機(jī)制的研究日益完善，從各家的研究結(jié)果中，我們可以看出，在化療的同時(shí)予以相應(yīng)的中藥輔助治療，可以起到增效減毒，甚至逆轉(zhuǎn)機(jī)體對(duì)化療藥物的耐藥性。根據(jù)研究顯示，中藥制劑抗腫瘤作用可能與其提高機(jī)體免疫力、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、作用于腫瘤細(xì)胞周期等有關(guān)。但是因肺癌的中醫(yī)證型復(fù)雜，研究仍有一定難度，不同證型的中藥作用機(jī)制仍不是很完善，對(duì)于抗癌中藥單體提取物，復(fù)方制劑的研究仍有待進(jìn)一步發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

[1]曾梅.自擬補(bǔ)氣化瘀方對(duì)Lewis肺癌小鼠血清TNF和IL-2的影響[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2012,18(3)：76-78.

[2]卞方,曹勇.補(bǔ)腎益肺解毒方對(duì)大鼠肺癌的干預(yù)及K-ras、p21基因表達(dá)的影響[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2011,22(1):127-128.

[3]張錦林，倪美鑫，蔡晶，等.補(bǔ)康靈對(duì)輻射損傷肺癌小鼠免疫功能影響的觀察[J].中華腫瘤防治雜志，2012,19(9)：655-657.

[4]劉偉.靈芝孢子粉對(duì)Lewis肺癌小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能及血清IL-2的影響[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥，2010,30(5)：85-86.

[5]曹志友，王爽，歐陽瑾，等.白桃湯劑治療Lewis肺癌小鼠的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2009，20(4):914-915.

[6]張永軍，包素珍，張愛琴，等.十全大補(bǔ)湯促進(jìn)小鼠與瘤共存的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009，27(6):1 308-1 310.

[7]張波，柴智.蟲類攻毒法、草木解毒法對(duì)小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及其機(jī)制的研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,6(3):203-233.

[8]王成剛.中藥復(fù)方對(duì)Lewis肺癌移植鼠腫瘤微環(huán)境中吲哚胺2，3-雙加氧酶表達(dá)的影響[J].中國臨床醫(yī)學(xué),2012，19(3):225-226.

[9]鄭心，李士濤，孟慶坤.肺康方對(duì)小鼠Lewis肺癌血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華臨床醫(yī)師雜志，2012,6(18)：

5 680-5 682.

[10]賀珊珊，莊靜，楊靜，等.肺積1號(hào)方抑制la-795肺腺癌小鼠移植瘤生長的實(shí)驗(yàn)研究[J].預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇，2010,16(12)：1 169-1 170.

[11]郝靜，齊路霞，張自強(qiáng)，等.中藥復(fù)方肺積散對(duì)肺癌小鼠Fas/FasL蛋白表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥信息，2009,26(6)：82-83.

[12]曹勇，孟金成，夏清華，等.健脾補(bǔ)腎解毒方對(duì)小鼠Lewis肺癌的抑制及A549細(xì)胞周期的影響[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009,32(1)：38-41.

[13]嚴(yán)慶文，曹勇，許林利，等.補(bǔ)腎化瘀解毒復(fù)方對(duì)小鼠肺癌轉(zhuǎn)移及nm23 mRNA表達(dá)的影響[J].中醫(yī)藥通報(bào),2012，11(3)：60-62.

[14]齊路霞，郝靜，姜家康，等.中藥復(fù)方肺積散對(duì)肺癌小鼠組織蛋白酶B表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥信息，2009,26(3)：90-91.

[15]黃利敏，劉寨東，齊元富，等.六神丸對(duì)Lewis肺癌模型小鼠移植瘤bFGF、CD34表達(dá)的影響[J].山東中醫(yī)雜志,2011，30(10):727-730.

[16]張翠，賈法玲.泰山四葉參對(duì)小鼠肺癌的作用及機(jī)制初探[J].泰山學(xué)院學(xué)報(bào)，2011,33(3)：98-101.

[17]包素珍，鄭小偉，孫在典等.黃芪建中湯對(duì)脾氣虛證肺癌小鼠caspase-3表達(dá)的影響[J].浙江中醫(yī)雜志,2010，48(3):166-168.

[18]王海倫，趙其輝.白藜蘆醇對(duì)小鼠Lewis肺癌細(xì)胞凋亡的影響[J].南華大學(xué)學(xué)報(bào)，2009,37(1)：51-53.

[19]張梅，李平，靳福鵬，等.益氣養(yǎng)陰解毒方抑制Lewis肺癌小鼠移植瘤生長及誘導(dǎo)移植瘤細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011,34(10)：679-682.

[20]孫玲玲，林麗珠.益氣除痰方對(duì)Lewis肺癌小鼠種植瘤細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)因子的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2014，29(6):1 846-1 848.

[21]李秀麗，畢經(jīng)旺，朱慶均，等.肺復(fù)康對(duì)Lewis肺癌模型小鼠腫瘤及細(xì)胞周期的影響[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010，34(2):171-175.

[22]王淑美，林麗珠，熊紹權(quán)，等.益氣除痰方對(duì)肺癌系列基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的影響[J].中藥新藥與臨床藥理,2011，22(2):135-138.

[23]郭斌，申洪波，李智，等.苦參堿對(duì)小鼠Lewis肺癌的影響[J].中草藥,2010，41(12):2 037-2 039.

[24]催德利，陳華圣，許愛華，等.六君二陳解毒湯及其拆方抑制Lewis肺癌及對(duì)VEGF和nm 23-H1表達(dá)的影響[J].中藥材，2010,33(11)：1 771-1 773.

[25]井歡，于丹，唐瑩，等.補(bǔ)中益氣湯對(duì)A549/DDP動(dòng)物模型實(shí)體瘤中耐藥相關(guān)酶GST和TopoⅡ表達(dá)的影響[J].解剖科學(xué)進(jìn)展,2014，20(3):249-252.

[26]劉亞莉，唐瑩，易佳麗，等.補(bǔ)中益氣湯對(duì)肺腺癌順鉑耐藥細(xì)胞株裸鼠移植瘤作用及其機(jī)制的研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2014，25(9):2 091-2 093.

Preliminary Study of the Intervention Effection on Lung Cancer Mouse Model of Traditional Chinese Medicine In recent Years

XU Yan1, WANG Bao-qin1, ZHU Jie1, TONG Jia-bing2, LI Ze-geng1

1.AnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Hefei230038,China;

2.TheFirstAffiliatedHospitalofAnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Hefei230038,China.

Abstract:In recent years, the research on the role of Traditional Chinese Medicine on mice with lung cancer is increasing, many of which including on monse's own immune system, chemotherapy and reduction toxicity study of anti-tumor mechanism. This paper briefly reviews the experimental study of the intervention effect on lung cancer mouse madle of Traditional Chinese Medicine in recent years.

Key words:Lung Cancer Mouse Model; Chemotherapy; Traditional Chinese Medicine; Efficacy Enhancing and Toxicty Reducing; Anti Cancer

收稿日期：(2015-01-08)編輯：秦小瓏

中圖分類號(hào)：R243

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A