辛伐他汀對(duì)冠心病患者血漿氧化還原態(tài)的影響*

黃彥生 吳 彧 孫 琳 趙士超 段紅艷 吳金濤 王樹(shù)人

氧化應(yīng)激與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病（冠心?。┟芮邢嚓P(guān)[1]，冠心病患者血漿氧化還原態(tài)向氧化方向發(fā)生偏移[2]。辛伐他汀除具有調(diào)脂功能以外，還具有抗動(dòng)脈粥樣硬化的功能，但有關(guān)其對(duì)冠心病患者血漿氧化還原態(tài)的影響尚少見(jiàn)報(bào)道。本研究對(duì)比觀察了辛伐他汀和降膽固醇藥物考來(lái)烯胺對(duì)冠心病患者調(diào)脂作用及對(duì)血管內(nèi)皮功能、氧化還原態(tài)的影響，報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 依據(jù)2001年中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)等制定的冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇2006年3月—2007年9月河南省人民醫(yī)院心內(nèi)科住院的冠心病患者。排除風(fēng)濕性心臟病、肺心病、原發(fā)性心肌病、心肌炎、大動(dòng)脈炎、嚴(yán)重的肝、腎功能不全、腎病綜合征、難以控制的糖尿病、惡性腫瘤、精神病及隨訪資料不完整者。將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的112例冠心病患者按就診順序，用隨機(jī)數(shù)字表方法分為辛伐他汀組（56例）和考來(lái)烯胺組（56例），2組一般情況具有可比性，見(jiàn)表1。

表1 2組患者一般情況比較 （±s）

表1 2組患者一般情況比較 （±s）

均 P>0.05

組別辛伐他汀組考來(lái)烯胺組t或 χ2性別（男/女）30/26 29/27 0.856年齡（歲）56.45±11.91 57.24±12.12 0.929病程（年）9.16±8.89 8.97±8.65 1.347體質(zhì)指數(shù)（kg/m2）25.04±2.96 24.98±2.79 1.322

1.2 治療方法 2組均給予β受體阻滯劑、鈣離子拮抗劑、阿司匹林、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑或血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑等常規(guī)藥物治療，辛伐他汀組、考來(lái)烯胺組分別有39、41例每早口服5-單硝酸異山梨醇酯緩釋膠囊50 mg。辛伐他汀組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用辛伐他?。ㄉ唐访娼抵?，杭州默沙東制藥公司生產(chǎn)）20 mg每晚口服；考來(lái)烯胺組給予考來(lái)烯胺（商品考來(lái)烯胺散，厚生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)），第1周每天4 g口服，第2周每天8 g口服，第3周及以后每天12 g口服，均連服8周。

1.3 指標(biāo)測(cè)定 治療前及治療8周后晨起空腹抽取肘正中靜脈血，分離出血清或血漿備用。

1.3.1 血脂 膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）采用酶法以Beckman試劑測(cè)定，低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）采用過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）清除法測(cè)定。

1.3.2 血管內(nèi)皮功能指標(biāo) 采用特異性放射免疫均相競(jìng)爭(zhēng)法直接測(cè)定血漿中內(nèi)皮素-1（ET-1），ET-1試劑盒購(gòu)自解放軍總醫(yī)院東亞免疫技術(shù)研究所。一氧化氮（NO）試劑盒購(gòu)自法國(guó)Coulter公司，采用硝酸還原酶法測(cè)定血清中NO。所有檢測(cè)嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。

1.3.3 氧化還原態(tài)指標(biāo) 還原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）和氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione，GSSG）按熒光分光光度法測(cè)定。GSH/GSSG氧化還原電位值根據(jù)公式 Eh(GSH/GSSG)＝E0＋（RT/2F）ln（GSSG/GSH2）計(jì)算。其中 E0為GSH/GSSH的標(biāo)準(zhǔn)電位值，血液pH=7.4時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)E0為-264mV，R為氣體常數(shù)，T為絕對(duì)溫度，F(xiàn)為Faraday常數(shù)[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 全部數(shù)據(jù)采用SPSS 10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，均數(shù)間的比較采用成組t檢驗(yàn)或配對(duì)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

治療8周后，辛伐他汀組1例因轉(zhuǎn)氨酶升高3倍退出試驗(yàn)，考來(lái)烯胺組3例因惡心腹脹、Q-T間期延長(zhǎng)退出試驗(yàn)。

2.1 2組降脂療效的比較 治療8周后，辛伐他汀組TC、LDL-C和TG明顯減低；考來(lái)烯胺組TC和LDL-C明顯減低，TG無(wú)明顯變化。2組相比TC和LDL-C治療前后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，治療前后TG差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表2 2組降脂療效的比較 （mmol/L，±s）

表2 2組降脂療效的比較 （mmol/L，±s）

*P＜0.05，**P＜0.01，表3、4 同

組別 n辛伐他汀55考來(lái)烯胺53辛伐他汀考來(lái)烯胺55 53治療前治療后t治療前治療后t治療前后差值治療前后差值t TC 5.68±1.47 3.94±1.36 3.915**5.73±1.52 4.15±1.29 3.760**1.71±0.13 1.64±0.11 1.953 LDC-C 3.43±1.36 2.28±1.11 4.160**3.47±1.35 2.56±1.06 4.035**1.13±0.29 0.98±0.27 1.874 TG 1.73±0.6 6 1.45±0.59 2.187*1.72±0.67 1.69±0.57 1.893 0.32±0.09 0.15±0.06 2.620*

2.2 2組內(nèi)皮功能變化 治療8周后，辛伐他汀組NO升高，ET-1減低，NO/ET-1升高；考來(lái)烯胺組NO、ET-1和NO/ET-1變化差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2組治療前后NO、ET-1和NO/ET-1改變差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表3。

表3 2組血管內(nèi)皮功能變化比較 （±s）

表3 2組血管內(nèi)皮功能變化比較 （±s）

組別 n辛伐他汀55考來(lái)烯胺53辛伐他汀考來(lái)烯胺55 53治療前治療后t治療前治療后t治療前后差值治療前后差值t NO（μmol/L）48.41±16.53 64.40±18.86 3.725**48.13±15.92 49.42±17.51 1.469 15.71±4.33 2.29±1.71 3.953**ET-1（ng/L）154.43±63.06 121.71±59.11 2.168*154.77±62.35 151.36±58.56 1.135 32.19±14.58 3.48±1.27 2.374*NO/ET-1 0.31±0.16 0.53±0.19 3.987**0.31±0.17 0.32±0.17 1.543 0.26±0.10 0.12±0.07 4.621**

2.3 2組氧化還原態(tài)變化比較 治療8周后，辛伐他汀組GSH和GSH/GSSG增高，GSSG和Eh(GSH/GSSG)減低；考來(lái)烯胺組以上指標(biāo)變化均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2組治療前后上述指標(biāo)改變差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表4。

表4 2組氧化還原態(tài)變化比較 （±s）

表4 2組氧化還原態(tài)變化比較 （±s）

組別 n辛伐他汀55考來(lái)烯胺53辛伐他汀考來(lái)烯胺55 53治療前治療后t治療前治療后t治療前后差值治療前后差值t GSH（μmol/L）284.23±38.23 321.27±56.47 3.894**284.31±38.05 289.46±40.89 1.435 33.16±13.24 5.97±2.35 4.953**GSSG(μmol/L)34.51±1.74 31.92±1.59 2.325*34.23±1.72 33.28±1.66 1.169 3.52±1.04 1.08±0.39 2.374*GSH/GSSG 8.24±1.18 10.06±1.70 4.168**8.31±1.21 8.61±1.27 1.479 1.91±0.72 0.32±0.08 4.726**Eh(GSH/GSSG)(mV)-135.83±1.34-142.61±1.39 3.687*-136.03±1.37-137.23±1.65 1.398 6.87±1.13 1.29±0.32 2.621*

3 討論

目前發(fā)現(xiàn)，膽固醇異常升高、高血壓、糖尿病、吸煙、高同型半胱氨酸血癥等動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病的諸多危險(xiǎn)因素中及在分子水平的損傷機(jī)制中都有氧化應(yīng)激的參與，氧化應(yīng)激通過(guò)引起脂質(zhì)過(guò)氧化及內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞的氧化損傷繼而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，氧化應(yīng)激與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病關(guān)系密切[1]。但機(jī)體對(duì)于氧化應(yīng)激又有著非常強(qiáng)大的防御和拮抗機(jī)制，兩者的平衡構(gòu)成了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的一個(gè)重要穩(wěn)態(tài)機(jī)制，被稱為氧化-還原態(tài)[4]。

GSH/GSSG被認(rèn)為是細(xì)胞中主要的氧化還原緩沖對(duì)（redox buffer），GSH可清除活性氧（ROS），維持生物大分子的巰基（-SH）活性中心，使維生素（Vc）和α-生育酚維持還原狀態(tài)，反應(yīng)中GSH被氧化為GSSG后，在GSSG還原酶催化下，以還原型輔酶Ⅱ（NADPH）傳遞氫，GSSG可被重新還原為GSH，遂可重復(fù)利用[5]。另一方面，蛋白質(zhì)分子中大量的二硫鍵(-S-S-)結(jié)構(gòu)亦與蛋白質(zhì)的功能密不可分，這需要一定的氧化態(tài)維系。因此，機(jī)體內(nèi)必有一個(gè)相當(dāng)恒定的GSH/GSSG氧化-還原態(tài)[6]。資料顯示，不同類型的細(xì)胞中GSH/GSSG氧化還原電位一致，并與細(xì)胞的增殖、分化及凋亡等有關(guān)[7]。目前認(rèn)為，血漿中GSH/GSSG可一定程度上反應(yīng)機(jī)體氧化還原內(nèi)穩(wěn)態(tài)的改變，GSH/GSSG向氧化方向偏移時(shí)可產(chǎn)生類似過(guò)氧化氫增多時(shí)產(chǎn)生的氧化損傷效應(yīng)[8]。因此，本研究選擇測(cè)量GSH/GSSG作為反映機(jī)體氧化還原態(tài)的一個(gè)主要指標(biāo)，以探討GSH/GSSG氧化還原態(tài)的改變?cè)趧?dòng)脈粥樣硬化中的作用。本研究前期工作發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化患者GSH/GSSG氧化還原對(duì)向氧化方向偏移[5]。本研究提示，辛伐他汀和考來(lái)烯胺對(duì)冠心病患者均可有效降脂，但僅辛伐他汀對(duì)冠心病患者血管內(nèi)皮功能有一定的保護(hù)作用，且可糾正冠心病患者GSH/GSSG氧化還原對(duì)向氧化方向偏移。

因此，了解冠心病患者的氧化還原態(tài)，特別是GSH/GSSG的氧化還原態(tài)，糾正其偏移，可能是針對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的氧化應(yīng)激損傷機(jī)制的一條合理思路，有必要從矯正GSH/GSSG氧化還原態(tài)偏移的角度觀察其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的影響。

[1]Veskoukis AS,Nikolaidis MG,Kyparos A,et al.Effects of xanthine oxidase inhibition on oxidative stress and swimming performance in rats[J].Appl Physiol Nutr Metab,2008,33(6):1140-1154.

[2]Wang QL,Wang SR,Ding Y,et al.Age-related changes of the redox state of glutathione in plasma[J].Chin Med J(Engl),2005,118(18):1560-1563.

[3]Sokalski T,Kucza W,Danielewski M,et al.Time-dependent phenomena in the potential response of ion-selective electrodes treated by the Nernst-Planck-Poisson model.Part 2:Transmembrane processes and detection limit[J].Anal Chem,2009,81(12):5016-5022.

[4]Koike Y,Hisada T,Utsugi M,et al.Glutathione redox regulates airway hyperresponsiveness and airway inflammation in mice[J].Am J Respir Cell Mol Biol,2007,37(3):322-329.

[5]Huang YS,Zhi YF,Kong SY,et al.Plasma glutathione of patients with coronary heart disease measured by fluorospectrophotometer[J].Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi,2006,26(5):936-940.

[6]Findrik Z,Vrsalovi? Presecki A,Vasi?-Racki D.Mathematical modelling of NADH oxidation catalyzed by new NADH oxidase from Lactobacillus brevis in continuously operated enzyme membrane reactor[J].J Biosci Bioeng,2007,104(4):275-280.

[7]Marty L,Siala W,Schwarzl覿nder M,et al.The NADPH-dependent thioredoxin system constitutes a functional backup for cytosolic glutathione reductase in Arabidopsis[J].Proc Natl Acad Sci USA,2009,106(22):9109-9014.

[8]Yang Z,Sharma AK,Marshall M,et al.NADPH oxidase in bone marrow-derived cells mediates pulmonary ischemia-reperfusion injury[J].Am J Respir Cell Mol Biol,2009,40(3):375-381.