綜合評(píng)分法優(yōu)選獨(dú)活揮發(fā)油包合工藝

陳芳芳 顏新宇 陳紅霞

綜合評(píng)分法優(yōu)選獨(dú)活揮發(fā)油包合工藝

陳芳芳 顏新宇 陳紅霞

目的 探討β-CD包合獨(dú)活揮發(fā)油最佳工藝。方法 正交設(shè)計(jì),并對(duì)包合物進(jìn)行薄層鑒別。結(jié)果 優(yōu)選包合工藝為：揮發(fā)油 6 g：1 ml,加 6倍量水,恒溫?cái)嚢?3 h。結(jié)論 此工藝穩(wěn)定、可行,適合大生產(chǎn)。

獨(dú)活;揮發(fā)油;β-CD;正交試驗(yàn)

獨(dú)活為傘形科重齒毛當(dāng)歸 Angelica pubescensMax im.f.shanetYucm的干燥根,成分復(fù)雜,揮發(fā)油是主要成分之一,但易揮發(fā),遇光熱不穩(wěn)定,用β-環(huán)糊精 (β-CD)包合后可有效地保存。近年對(duì)獨(dú)活揮發(fā)油的研究較多,但用β-CD包合的報(bào)道少見(jiàn),筆者用β-CD包合其揮發(fā)油,考察最佳工藝,且對(duì)包合物進(jìn)行薄層鑒別。

1 儀器與試藥

表 1 不同濃度乙醇與包合效果 (%)

DF-101B型集熱式恒溫磁力攪拌器 (浙江樂(lè)清市樂(lè)成電器廠);UV-2501PC分光光度計(jì) (日本島津);β-CD(北京奧博星生物技術(shù)公司);其他試劑均為 AR級(jí);獨(dú)活購(gòu)自湖南振興中藥飲片公司,經(jīng)張志國(guó)教授鑒定符合現(xiàn)行《中國(guó)藥典》[1](簡(jiǎn)稱(chēng)“藥典 ”)規(guī)定。

2 方法與結(jié)果

2.1 揮發(fā)油提取

獨(dú)活粉碎成粗粉,加 8倍量水,浸泡 45 min,按藥典法提取,乙醚萃取多次,合并,無(wú)水硫酸鈉脫水,揮干乙醚,備用。

表 2 正交設(shè)計(jì)因素與水平

2.2 不同濃度乙醇溶解獨(dú)活揮發(fā)油與包合效果考察

取 4份β-CD各 8 g,加熱制成β-CD飽和水溶液;另取 4份揮發(fā)油各 1 ml,分別用不同濃度乙醇 l0 ml溶解,加入前液攪拌包合。結(jié)果表明 85%乙醇包合效果最佳。見(jiàn)表 1。

2.3 包合物制備

文獻(xiàn)[2-4]與預(yù)試表明,用飽和水溶液法包合。稱(chēng)取一定量β-CD,加水加熱制成飽和液,置攪拌器上,調(diào)節(jié)溫度和轉(zhuǎn)速 (30℃、400 r/min),加入上述用 85%乙醇稀釋的揮發(fā)油,攪拌至規(guī)定時(shí)間。于冰箱中冷藏 24 h,抽濾,濾渣用 10 ml石油醚洗滌 3次,置干燥箱中 30℃干燥 5 h。

表 3 正交設(shè)計(jì)與結(jié)果 (率,%)

2.4 油利用率、收率、含油率測(cè)定

取干包合物約 1 g,精密稱(chēng)定,置 500 ml圓底燒瓶中,加入蒸餾水適量,按藥典法測(cè)定[1]。用下式計(jì)算油利用率、收率、含油率。

油利用率 (%)=包合物實(shí)際含油量 (g)/加入揮發(fā)油的質(zhì)量(g)100%

收率 (%)=[β-CD包合物質(zhì)量 (g)/(β-CD質(zhì)量 (g)+揮發(fā)油投入量(g))]100%

含油率 (%)=包合物中揮發(fā)油量 (g)/包合物重量(g)100%。

2.5 正交設(shè)計(jì)與結(jié)果分析

表 4 方差分析

2.5.1 因素與水平 預(yù)試及文獻(xiàn)[4]表明,β-CD與揮發(fā)油的比例、包合時(shí)間、加水量為主要影響包合效果。因此,各取 3個(gè)水平,用 L9(34)正交表安排試驗(yàn),見(jiàn)表 2。

2.5.2 評(píng)價(jià)指標(biāo) 用綜合評(píng)分法處理數(shù)據(jù),以油利用率、收率、含油率為指標(biāo),將實(shí)驗(yàn)結(jié)果用 Excel進(jìn)行因素間方差分析,用 SPSS 12.0進(jìn)行各因素不同水平間的多重比較,結(jié)果分別見(jiàn)表 3～5。油利用率為衡量包合效果的主要指標(biāo),權(quán)重系數(shù)定為 0.6;收率在實(shí)際生產(chǎn)中具有重要意義,而含油率是控制制劑質(zhì)量的關(guān)鍵因素,權(quán)重系數(shù)分別定為 0.2。

由表 3～5可知：各因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響的程度依次為B＞A＞C。A、C兩因素各水平間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可取任意水平。B因素及各水平間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)合生產(chǎn)及表 3,從節(jié)省能源方面考慮,最優(yōu)方案為 A1B3C1,即β-CD與揮發(fā)油之比為 6 g：1 ml,加 6倍量的水,恒溫?cái)嚢?3 h。

表 5 正交設(shè)計(jì)水平間方差分析

2.5.3 驗(yàn)證 按 2.3方法制備包合物,照 A1B3C1進(jìn)行驗(yàn)證 ,見(jiàn)表 6。

2.6 β-CD包合物的薄層檢查

稱(chēng)取包合物 1 g,加 85%乙醇 10 ml攪拌,浸泡 45 min后過(guò)濾,濾液點(diǎn)于以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠板上,以正己烷-醋酸乙酯 (7：1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出晾干,噴以 5%香草醛-濃硫酸試液,于 105℃加熱,無(wú)斑點(diǎn)。表明揮發(fā)油已與β-CD形成包合物。

表 6 驗(yàn)證結(jié)果

3 討論

3.1 展開(kāi)劑的選擇

3.2 溫度與速度的選擇

在包合物制備中攪拌時(shí)溫度不宜過(guò)高,速度不宜過(guò)快,否則揮發(fā)油容易揮發(fā)。故本實(shí)驗(yàn)采用恒溫 30℃、速度 400 r/min。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[S].2005：附錄 XD-64.

[2] 張慶萍.β-環(huán)糊精包合川芎、獨(dú)活揮發(fā)油的工藝研究.湖北中醫(yī)雜志 ,2007,29(9)：61-62.

[3] 楊福炎,李偉,陳興.多指標(biāo)試驗(yàn)全概率評(píng)分法對(duì)羌活、當(dāng)歸混合揮發(fā)油包合工藝的研究.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2009,3(7)：7-9.

[4] 俞丹,胡小蒔,尹蓮.蒼術(shù)揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備研究.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(1)：130-131.

421400湖南省衡東縣人民醫(yī)院