朱華云,談獻和*,楊卉,徐柏頤,沈小林
(1.南京中醫(yī)藥大學(xué),江蘇 南京 210046;2.江蘇蘇中藥業(yè)集團股份有限公司,江蘇 姜堰 225500)
質(zhì)量標準
黃蜀葵種子品質(zhì)檢驗及質(zhì)量標準初步研究
朱華云1,談獻和1*,楊卉1,徐柏頤2,沈小林2
(1.南京中醫(yī)藥大學(xué),江蘇 南京 210046;2.江蘇蘇中藥業(yè)集團股份有限公司,江蘇 姜堰 225500)
目的:研究黃蜀葵種子的品質(zhì)檢驗方法和質(zhì)量分級標準,為黃蜀葵種子檢驗規(guī)程及質(zhì)量標準的制定提供依據(jù)。方法:依據(jù)種子檢驗方法對不同產(chǎn)地、不同年份的黃蜀葵種子的品質(zhì)進行測定。結(jié)果與結(jié)論:測定了不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的千粒重、含水率、生活力、發(fā)芽率等,并初步制定了黃蜀葵種子的質(zhì)量分級標準。
黃蜀葵;種子;品質(zhì)檢驗;質(zhì)量標準
黃蜀葵Abelmoschus manihot(L.)Medic為錦葵科植物,全草入藥,能清熱,涼血,解毒,其花性味甘寒滑,無毒,具有清利濕熱,消炎解毒之功效,內(nèi)服主治五淋,水腫;外用治療癰疽腫毒,湯水燙傷[1]。果實種子具有補脾健胃,生肌功效功能。治療消化不良、不思飲食,跌打損傷等[2]?,F(xiàn)代藥理學(xué)證明,黃蜀葵花具有良好的清熱利濕解毒功能,顯示該藥具有明顯的抗炎,抗菌,鎮(zhèn)痛等藥理作用[3]。近年來對黃蜀葵的研究主要集中在化學(xué)成分分析與測定[4,5]、藥理作用[6]、栽培及繁育[7]方面,有關(guān)黃蜀葵種子質(zhì)量標準方面的研究未見報道。作者通過對黃蜀葵種子凈度、千粒重、含水量、生活力等主要品質(zhì)檢驗指標的研究,初步制訂了黃蜀葵種子的質(zhì)量分級標準。
GZP-30013光照培養(yǎng)箱,DHG-9023A型電熱恒溫鼓風干燥箱,F(xiàn)A-1004電子分析天平。實驗用黃蜀葵種子采自江蘇南通、泰州、鎮(zhèn)江等7個栽培產(chǎn)地,具體來源和編號見表1。經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)談獻和教授鑒定,室溫儲藏備用。
表1 黃蜀葵種子編號及來源
采用四分法分別將已抽取的3份樣品倒在光潔的桌面上,把純凈種子、廢種子和雜質(zhì)分開。若樣品混有較大或多量的雜物時,要在樣品稱重后,在分取測定樣品前進行必要的清理并稱重。重復(fù)3次,余同[8]。
種子凈度(%)=100%-廢種子含量(%)-雜質(zhì)含量(%)
將全部純凈種子用四分法分成4份,從每份中隨機取250粒,共1 000粒為1組,用1/10 000電子天平稱重。
105℃恒重法(標準法)。取5g整粒種子直接用于含水量的測定。先將稱量盒于105℃下烘干至恒重,稱重,再將樣品放入預(yù)先烘干和稱重過的樣品盒內(nèi),在感量為0.001g的天平上稱取試樣3份。然后,打開盒蓋,一起放入預(yù)熱至110℃的烘箱內(nèi)關(guān)好箱門,保持(105±2)℃,經(jīng)6h后取出,蓋上蓋子置于干燥器內(nèi)冷卻后稱重;再放入(105±2)℃烘箱內(nèi)2h取出,蓋上蓋子置于干燥器內(nèi)冷卻后稱重,直至后次稱重和前次稱重不超過0.02g為止,記下最后一次結(jié)果作為烘干后重,進行水分含量計算[9]。
種子水分=[(烘前試樣重-烘后試樣重)/烘前試樣重]×100%
采用紅墨水法和四氮唑染色法(TTC法)測定黃蜀葵種子生活力。
2.4.1 TTC法 將待測種子在30~35℃溫水中浸泡2h,將各組種子沿種脊縱切成兩瓣,使胚1/2分,取半粒放入裝有0.5%TTC試管中,于30℃培養(yǎng)箱中染色1h。重復(fù)3次,每次50粒[10]。
2.4.2 紅墨水法 將待測種子在30~35℃溫水中浸泡2h,將各組種子沿種脊縱切成兩瓣,使胚1/2分,取半粒放入裝有5%紅墨水試管中,于30℃培養(yǎng)箱中染色15min,染色后倒去紅墨水,用清水沖洗多次直至沖洗液無色為止。重復(fù)3次,每次50粒。
生活力=有生活力種子數(shù)/供試驗種子數(shù)×100%
取純凈種子,于25℃光照恒溫紙質(zhì)發(fā)芽,3次重復(fù),每重復(fù)50粒種子,每日統(tǒng)計發(fā)芽情況,稱重補水,第15天統(tǒng)計發(fā)芽率。根據(jù)生產(chǎn)需要,以第5天的種子的發(fā)芽率為發(fā)芽勢。
發(fā)芽率=發(fā)芽種子總數(shù)/供試種子總數(shù)×100%;
發(fā)芽勢=前五天發(fā)芽種子總數(shù)/供試種子總數(shù)×100%
黃蜀葵種子的凈度多在95%以上,不同產(chǎn)地的黃蜀葵種子顯著性差異不大,但是其中ns-3的凈度最低,含黃蜀葵宿存花萼、種殼和其他混雜物較多,凈度僅為85.43%,結(jié)果見表2。
表2 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子凈度、千粒重、含水量
黃蜀葵種子的千粒重在15.74~17.49g,其中ns-4的種子鈍圓,大而飽滿,其千粒重高達17.492 2g,而gg種子的千粒重較小,結(jié)果見表2。
黃蜀葵種子含水量在7%~11%。其中sy種子含水率最高,為10.95%,而gg種子含水率最低,為7.71%,結(jié)果見表2。
用TTC法和紅墨水法測定不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的生活力在84%~94%,sy、jr-2,ns-2,ns-4的種子生活力較高,結(jié)果見表3。
表3 兩種方法測定不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的生活力
不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢之間存在明顯差異。其中發(fā)芽率最高的是ns-3、ns-4黃蜀葵種子,達99%;發(fā)芽勢最高的是sy種子,為86%,結(jié)果見表4。編號為qd的種子不同時間發(fā)芽情況見圖1~3。
表4 不同產(chǎn)地黃蜀葵種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢
圖1 qd第3天的發(fā)芽情況
圖2 qd第7天的發(fā)芽情況
圖3 qd第15天的發(fā)芽情況
以黃蜀葵種子凈度、千粒重、含水量、生活力和發(fā)芽率5項指標作為黃蜀葵種子分級標準的參考值,結(jié)合生產(chǎn)實際和可操作性,在此基礎(chǔ)上初步制定了黃蜀葵種子質(zhì)量分級標準,見表5。
表5 黃蜀葵種子質(zhì)量分級標準
種子生活力測定方法有多種,作者采用TTC法和紅墨水法測定黃蜀葵種子的生活力,實驗結(jié)果顯示用TTC法測定的生活力稍高于用紅墨水法測定的生活力。考察了黃蜀葵種子的不同浸泡時間(1,2,4,10,24h)、不同濃度的四氮唑溶液(0.5%,0.4%,0.3%,0.2%,0.1%)、不同染色時間,確定黃蜀葵種子生活力測定的最佳條件為浸泡2h,0.5%四氮唑溶液染色1h,5%紅墨水溶液染色15min,染色溫度30℃。
種子質(zhì)量包含內(nèi)在和外在的指標。作者以發(fā)芽率、千粒重、水分和凈度以及生活力5項指標初步制定了黃蜀葵種子質(zhì)量的分級標準。分級方法采用最低定級原則,即任何一項指標不符合規(guī)定標準都不能作為相應(yīng)等級的合格種子。在分級的5項指標中,發(fā)芽率最為重要,因其可較直接反映種子的田間出苗率。生活力的高低在一定程度上反映了種子活力的高低,可以作為種子活力的判斷依據(jù)。千粒重可反映種子飽滿程度和種子成熟度等。而凈度和水分卻不同,往往可通過再加工如清選和干燥等來提高質(zhì)量。但是發(fā)芽率是以凈種子測定的,離不開凈度分析。綜上所述,可將發(fā)芽率、生活力作為衡量黃蜀葵種子分級標準的主要依據(jù),黃蜀葵種子的千粒重、含水量、凈度可作為衡量其標準的次要依據(jù)。
不同來源黃蜀葵種子質(zhì)量波動較大,種子質(zhì)量最重要的指標發(fā)芽率相差懸殊,最低值為72%,最高值可達100%。目前,藥用植物種子質(zhì)量標準及品質(zhì)檢驗研究方法主要參考農(nóng)作物種子,同時結(jié)合藥用植物種子自身的特性進行一定的修改,作者亦是參照其他農(nóng)作物的基礎(chǔ)上對黃蜀葵種子質(zhì)量檢測研究進行了初步的探討。
[1]吳征鎰,周太炎,肖培根,等.新華本草綱要(第二冊)[M].上海:上??萍汲霭嫔?,1991.
[2]史剛榮.黃蜀葵的研究進展[J].中國野生植物資源,2003,22(6):28-29.
[3]司徒曼麗,李培智.黃蜀葵臨床應(yīng)用與作用原理研究發(fā)現(xiàn)可喜苗頭[J].安徽醫(yī)藥,1998,4(15):32-33.
[4]徐柏頤.HPLC法測定黃蜀葵花中金絲桃苷的含量[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究,2006,14(2):32-34.
[5]周正華,杜安全,王先榮.黃蜀葵花中黃酮類成分的含量測定[J].中藥材,2004,27(11):835.
[6]徐錫蘭,鄔嘉琛,黃啟金,等.黃蜀葵花膠囊治療慢性腎炎濕熱證43例[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2000,24(5):345-347.
[7]繆辰,胡星.加快黃蜀葵栽培技術(shù)推廣提升姜堰種植業(yè)發(fā)展水平[J].上海農(nóng)業(yè)科技,2007,(3):18.
[8]賀玉林,李先恩,淡紅梅,等.遠志種子質(zhì)量分級標準研究[J].種子,2007,26(1):106-107.
[9]郭巧生,厲彥森,王長林.明黨參種子品質(zhì)檢驗及質(zhì)量標準研究[J].中國中藥雜志,2007,32(6):478-480.
[10]郭巧生,趙榮梅,劉麗,等.桔梗種子品質(zhì)檢驗及質(zhì)量標準研究[J].中國中藥雜志,2007,32(5):377-381.
Study on Seed Quality Test and Quality Standard of Abelmoschus manihot L.
Zhu Huayun1,Tan Xianhe1,Yang Hui1,Xu Boyi2,Shen Xiaolin2
(1.Nanjing University of Traditional Chinese Medicine,Nanjing Jiangsu210046,China;2.SZYYGroup Pharmaceutical Limited,Jiangyan Jiangsu225500,China)
Objective:To study seed quality testingmethods and grade scale,and provide basis
for establishing seed inspective procedure and quality standard of Abelmoschus manihot(L.)Medic.Methods:The seed quality and planting quality of Abelmoschus manihot(L.)Medic from different producing aeras with different year of production weremeasured.Results and conclusion:The range of seed purity,weight per 1 000 seeds,seed moisture content,seed viability and sprouting rate were determined and the primary seed quality classification standard was established.
Abelmoschus manihotL.;Seed;Quality test;Quality standard
*談獻和,E-mail:xianhetan@163.com
2009-12-20)