五靈脂的脂溶性成分GC-MS分析△

楊琦，趙巖，陳文學(xué)，王健，王寅秀，張連學(xué)

（吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，吉林 長春 130118）

化學(xué)成分

五靈脂的脂溶性成分GC-MS分析△

楊琦，趙巖，陳文學(xué)，王健，王寅秀，張連學(xué)*

（吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，吉林 長春 130118）

目的：研究五靈脂中的脂溶性成分及相對含量。方法：采用連續(xù)回流提取法提取，GC-MS法測定相對含量。結(jié)果：鑒定出42種化合物，其中脂肪酸15種，占脂溶性成分總含量的49.162%，非脂肪酸類成分27種，占脂溶性成分總含量的44.184%。結(jié)論：用該方法快捷可靠，可對中藥五靈脂進(jìn)行質(zhì)量評價。

五靈脂；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用；脂肪酸；含量測定

五靈脂為脊索動物門哺乳綱鼯鼠科（Petauristidae）復(fù)齒鼯鼠Trogopterus xanthipesMilne-Edwards的干燥糞便，主產(chǎn)于山西、河北等省及北京市郊，湖北、四川等省亦有少量飼養(yǎng)，全年均可在巖洞或石縫周圍尋找收集［1］。五靈脂主要有效成分為五靈脂酸，為異海松酸的衍生物；并含鄰苯二酚、苯甲酸、3-蒈烯-9，10-二羧酸、尿嘧啶、間羥基苯甲酸、原兒茶酸、次黃嘌呤、尿囊素、L-酪氨酸［1］。五靈脂性溫，味咸、甘，無毒，入肝經(jīng)。具有疏通血脈，散瘀止痛的功效，是婦科要藥。主治血滯、經(jīng)閉、腹痛；胸脅刺痛跌撲腫痛和蛇蟲咬傷等癥。魏垠等［2］利用同時蒸餾萃取法（SDE）提取五靈脂中的揮發(fā)性組分，得到化合物的種類主要為醇類（10種），酮類（8種），醛類（6種），烯類（5種），酸類（4種），酚類（4種）。目前對于五靈脂的脂肪酸的研究尚未見報道，因此本文主要對五靈脂脂肪酸及其他脂溶性成分進(jìn)行了GC-MS分析。

1 材料

1.1 樣品

本樣品2009年6月份采于河北省，經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院張連學(xué)教授鑒定為五靈脂。

1.2 儀器與試劑

石油醚、苯、甲醇、氫氧化鉀均為分析純，超純水，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫公司），HH-6B數(shù)顯恒溫水浴鍋（泰特牌），RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），索氏提取器。

2 方法

2.1 五靈脂脂肪酸成分提取

取干燥至恒重的五靈脂，精密稱取45.03 g置于索式提取器中，以石油醚為溶劑提取8 h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收石油醚，得到油狀物。

2.2 脂肪酸的甲酯化

加入4 mL苯－石油醚（1∶1）混合溶劑于油狀物中使之溶解，將其置于25 mL具塞試管中，再加入0.4 mol·L－1氫氧化鉀－甲醇溶液4 mL，混勻，40℃恒溫水浴30 min，然后加入10 mL超純水，靜置24 h，待其完全分層后，取上清液作色譜分析試樣。

2.3 脂肪酸成分的GC-MS分析條件

2.3.1 氣相色譜條件 RTX-5MS型彈性石英毛細(xì)管色譜柱（0.25 mm×30 m，0.25μm）；進(jìn)樣口溫度為250℃；升溫程序：從80℃開始，先以10℃·min－1升至200℃，再以1℃·min－1升至220℃，220℃維持2 min，然后以8℃·min－1升至280℃，280℃再維持3 min；載氣為高純度氦氣；柱內(nèi)載氣流量1.26 mL·min－1；分流比為20∶1；進(jìn)樣量2μL；汽化室溫度為250℃。

2.3.2 質(zhì)譜條件 EI離子源，電子能量70 eV；離子源溫度200℃；接口溫度250℃；溶劑延時4 min；倍增器電壓0.9 kV；掃描范圍40～600 amu。

3 結(jié)果與分析

在上述實驗條件下，用毛細(xì)管氣相色譜法從五靈脂中分離出組分。以面積歸一法定量分析各成分的相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)，按上述GC-MS分析條件對五靈脂成分進(jìn)行分析，得其總離子流圖如圖1所示。

圖1 五靈脂脂溶性成分總離子流色譜圖

總離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到質(zhì)譜圖，經(jīng)過質(zhì)譜計算機(jī)數(shù)椐系統(tǒng)檢索，人工譜圖解析，按各色譜峰的質(zhì)譜裂片圖與文獻(xiàn)核對，查對質(zhì)譜資料［3-6］，對基峰、質(zhì)荷比和相對豐度等方面進(jìn)行比較，分別對各色譜峰加以確認(rèn)，綜合各項分析鑒定，確定出五靈脂脂肪酸中的化學(xué)成分，結(jié)果見表1。

如表1所示，共鑒定出15種脂肪酸，其中飽和脂肪酸10種，不飽和脂肪酸5種。

除脂肪酸成分外，五靈脂中還含有醇、醛、酸等成分，對臨床應(yīng)用也有一定價值，共鑒定出27種非脂肪酸成分，見表2。

表1 五靈脂脂肪酸成分組分及相對含量

表2 五靈脂非脂肪酸成分組分及相對含量

續(xù)表2

4 結(jié)論

五靈脂脂肪酸中含量較高的是十四碳二酸（8.843%）、亞油酸（7.770%）、棕櫚酸（5.538%），亞油酸能與膽固醇結(jié)合成酯并促使其降解為膽酸而排出，進(jìn)而使血中膽固醇水平降低；通過改變膽固醇在體內(nèi)分布，減少了脂質(zhì)在血管壁的沉積；使血管壁的功能得到維持和改善，并降低血中低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白及三酰甘油水平，使高密度脂蛋白水平升高，醫(yī)藥上用于降低血脂和膽固醇、減少動脈粥樣硬化、抑制癌細(xì)胞生長和促進(jìn)大腦發(fā)育等。棕櫚酸可以將人體內(nèi)的氧自由基加以分解，起到延緩衰老，促進(jìn)細(xì)胞再生，預(yù)防心腦血管疾病的功效［7］。

五靈脂非脂肪酸成分中含量較高的是葉綠醇（7.422%）、雪松醇（5.716%）。葉綠醇是由4個異戊二烯單位組成的雙萜，是一個親脂的脂肪鏈，它決定了葉綠素的脂溶性，是合成維生素K及維生素E的原料，有綜合利用價值，并有較高經(jīng)濟(jì)效益。雪松醇主要存在于松柏科植物中［8］，有較強(qiáng)的抗肺癌細(xì)胞活性［9］。但五靈脂和松針、側(cè)柏葉中都含有石竹烯、葉綠醇、雪松醇這些成分，這可能與復(fù)齒鼯鼠多以松針、松子及側(cè)柏葉等為食有關(guān)。

本文通過氣相色譜-質(zhì)譜-計算機(jī)聯(lián)用技術(shù)分析了五靈脂中的脂溶性化學(xué)成分，共鑒定出15種脂肪酸、27種非脂肪酸，并就其中含量較多的幾種進(jìn)行分析，非脂肪酸中很多組分都有殺菌消炎作用［9］，例如低沸點的醇、醛、酸，殺菌抗感染性強(qiáng)。至于哪些組分使五靈脂既可“行血”又可“止血”，有待于進(jìn)一步研究。

［1］康廷國.中藥鑒定學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：526.

［2］魏垠，張秀，黃愛今.毛細(xì)管氣相色譜和氣相色譜／質(zhì)譜法分析五靈脂揮發(fā)性成分［J］.分析化學(xué)，2001，29（2）：195-198.

［3］叢浦珠.質(zhì)譜學(xué)在天然有機(jī)化學(xué)中的應(yīng)用［M］.北京：科學(xué)出版社，1987.

［4］Masada Y.Analysis of Essential oils by Gas Chromatography and Mass Spectrometry［M］.New York：John Wiley and sons Inc，1976.

［5］中國質(zhì)譜學(xué)會有機(jī)專業(yè)委員會.香料質(zhì)譜圖集［M］.北京：科學(xué)出版社，1992：146.

［6］Heller SR.EPA PNIH mass spectral data bese［M］.Washington：Govemment Printing office，1978.

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［8］GRANTHAMJ，DOUGLASA.G.The nature and origin of sesquiterpenoids in some tertiary fossil resins［J］.Geochim.Cosmochim.Acta，1980，44（8）：1801-1810.

［9］蔣繼宏，李曉儲，高雪芹.側(cè)柏?fù)]發(fā)油成分及抗腫瘤活性的研究［J］.林業(yè)科學(xué)研究，2006，19（3）：314.

Analysis of Fat-soluble Com ponents in Faeces Trogopterorum by GC-MS

Yang Qi，Zhao Yan，Chen Wenxue，Wang Jian，Wang Yinxiu，Zhang Lianxue
（College of Chinese Medicinal Materials，Jilin Agricultural University，Changchun Jilin130118，China）

Objective：To determine fat-soluble components and relative content fromFaeces trogopterorum.Methods：The fat-soluble components were extracted by continuous reflux extraction，the constituents and their relative content were determined by GC-MS.Results：42 compounds fromFaeces trogopterorumwere isolated and identified，15 kinds of fatty acids account for 49.162%of the total volatility components，27 kind of non-fatty acids account for 44.184%of the total volatility components.Conclusion：The method is rapid and reliable for evaluating the quality ofFaeces trogopterorum.

Faeces trogopterorum；GC-MS；Fatty acids；Content determination

國家科技支撐計劃項目——平地栽參關(guān)鍵技術(shù)研究（2007BAI38B01）

*張連學(xué)，E-mail：zlx863＠163.com

2010-04-26）