急性單核細(xì)胞白血病非特異性酯酶染色與CD14表達(dá)的比較

余蓉暉

(湖南省常德市第一人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，湖南常德 415000)

急性單核細(xì)胞白血病按FAB分型[1]分為M5a和M5b，尤其M5a在形態(tài)學(xué)上易與M1混淆，通過(guò)細(xì)胞酯酶染色及免疫分型等檢查有助于M5的診斷。非特異性酯酶可存在于多種血細(xì)胞中，只有單核細(xì)胞對(duì)NaF敏感而被抑制。CD14則是單核細(xì)胞系特異性的表面標(biāo)志。我們對(duì)31例AML-M5患者的NAE染色、NaF抑制試驗(yàn)和CD14表達(dá)情況進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)總結(jié)如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

31例均經(jīng)我科中心實(shí)驗(yàn)室確診，根據(jù)FAB分型的急性單核細(xì)胞白血病M5a10例和M5b21例。

1.2 方法

非特異性酯酶染色應(yīng)用文獻(xiàn)[2]中的染色方法，基質(zhì)液以α-醋酸萘酚（α-NAE，國(guó)產(chǎn)）為底物，重氮鹽為堅(jiān)固蘭B，同時(shí)做NaF抑制試驗(yàn)。標(biāo)本均為骨髓細(xì)胞涂片。免疫學(xué)分型應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)，儀器和試劑均來(lái)自于美國(guó)BD公司。

1.3 結(jié)果判定

α-NAE染色結(jié)果陽(yáng)性反應(yīng)為細(xì)質(zhì)內(nèi)呈灰黑色彌漫性或黑色顆粒沉淀，以計(jì)數(shù)100個(gè)原幼單核細(xì)胞陽(yáng)性率作為檢測(cè)結(jié)果；NaF抑制試驗(yàn)，以計(jì)數(shù)抑制后陽(yáng)性率作為檢測(cè)結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 α-NAE染色結(jié)果

31例患者α-NAE均呈陽(yáng)性反應(yīng)，最高陽(yáng)性率達(dá)96%（M5a），最低陽(yáng)性率為13%（M5b），并且所有病例均對(duì)NaF敏感而被抑制。α-NAE染色結(jié)果陽(yáng)性率明顯，高于NaF抑制后的陽(yáng)性率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

2.2 免疫分型檢測(cè)結(jié)果

31例AML-M5患者CD14表達(dá)（＞20%）8例，弱表達(dá)（＜20%）1例，均為M5b型，其表達(dá)率為22.65%，見(jiàn)表1。

表1 31例AML-M5患者的免疫分型結(jié)果（例）

3 討論

細(xì)胞化學(xué)染色是應(yīng)用涂片染色的方法來(lái)研究細(xì)胞化學(xué)成分的性質(zhì)，包括各種蛋白質(zhì)、酶類、脂類、糖類、無(wú)機(jī)鹽和核酸等。它能在形態(tài)學(xué)的基礎(chǔ)上進(jìn)一鑒別各類血液細(xì)胞，為某些血液?。ò籽　⒘馨土?、貧血、血紅蛋白病及組織細(xì)胞疾?。┑脑\斷和鑒別治療提供依據(jù)。酯酶是一組具有較大PH范圍的水解酶類，在骨髓各系細(xì)胞中分布不盡相同，按其對(duì)不同脂肪酸水解選擇性不同，可分為非特異性酯酶和特異性酯酶兩大類。非特異性酯酶可有在于多種血細(xì)胞中，只有單核細(xì)胞系對(duì)NaF敏感而被抑制。我們應(yīng)用中性非特異性酯染色法，結(jié)果顯示，此方法有較高的敏感性和特異性，對(duì)以FAB分型區(qū)分粒系和單核系白血病具有重要的診斷和鑒別診斷價(jià)值。隨著單克隆抗體（McAb）技術(shù)不斷發(fā)展，一些免疫標(biāo)志物在白血病分型中有較高的特異性[3]，CD14特異性較好，但敏感性較差。本組病例CD14表達(dá)率為22.65%，與國(guó)內(nèi)報(bào)導(dǎo)道的20%左右的表達(dá)率相一致。我們還發(fā)現(xiàn)對(duì)分化較低的單核細(xì)胞即M5a，α-NAE染色陽(yáng)性反映較強(qiáng)，胞質(zhì)呈黑色顆粒狀沉淀（+++～++++）；而CD14表達(dá)則相反，對(duì)分化較好的單核細(xì)胞即M5b較為敏感。

[1]張文南.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].第2版.北京:科學(xué)出版社,1997:174-175.

[2]李家增,王鴻利,韓忠朝.血液實(shí)驗(yàn)學(xué)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1997:59-60.

[3]湯美華,周 宇,沈德誠(chéng),等.從AML細(xì)胞表面標(biāo)記特點(diǎn)看AML、ALL鑒別時(shí)單招的選擇[J].中華血液學(xué)雜志,1994,15:466-468.