米諾環(huán)素對臨床幾種常見假絲酵母菌體外藥敏的初步探究

鄧 群,李澤玉,余 旻

(三峽大學(xué)人民醫(yī)院宜昌市第一人民醫(yī)院檢驗科,湖北宜昌 443000)

米諾環(huán)素對臨床幾種常見假絲酵母菌體外藥敏的初步探究

鄧 群,李澤玉＊,余 旻

(三峽大學(xué)人民醫(yī)院宜昌市第一人民醫(yī)院檢驗科,湖北宜昌 443000)

探究米諾環(huán)素在體外對常見酵母菌的藥敏特點。采用Rosco紙片擴散法對168株常見的幾種假絲酵母菌進行米諾環(huán)素的藥敏試驗。米諾環(huán)素有抑菌環(huán)的比率:白假絲酵母菌41%,光滑假絲酵母菌1.2%,熱帶假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌沒有抑菌環(huán)。在常見幾種酵母菌中,米諾環(huán)素幾乎只對白假絲酵母菌在體外有抗菌活性。

米諾環(huán)素;假絲酵母;抗菌活性

目前住院患者侵襲性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)備受關(guān)注,據(jù)統(tǒng)計,深部真菌感染的絕大多數(shù)由酵母菌引起,占67.29%[1],其中以白假絲酵母菌(Candida albicans)的比例最高,且深部白假絲酵母菌感染的致死率達40%[2-3]。分離出酵母菌最多的部位是呼吸道,占真菌標(biāo)本的76.39%,其種類以白假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌和熱帶假絲酵母菌為主,分別占72.42%、13.45%和10.07%[4]。目前我院臨床分離的假絲酵母菌構(gòu)成比為白假絲酵母菌66.27%,光滑假絲酵母菌15.23%,熱帶假絲酵母菌12.17%,克柔假絲酵母菌3.12%,其他酵母菌3.21%。市場上抗真菌的藥物都各具特點,但都有不同程度的不良反應(yīng),而且隨著新藥的研發(fā),抗真菌藥的價格不斷攀升。在日常工作中發(fā)現(xiàn)米諾環(huán)素(Minocycline,別名二甲胺四環(huán)素)具有不同于其他抗細(xì)菌藥物的特點,就是K-B紙片擴散法在M-H瓊脂上對白假絲酵母菌有抑菌環(huán)。本實驗力圖通過體外Rosco紙片擴散法對168株常見的幾種酵母菌進行米諾環(huán)素的藥敏試驗,分析其產(chǎn)生抑菌環(huán)的構(gòu)成比。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 自2010年3月至2010年7月臨床分離的168株假絲酵母菌(其中白假絲酵母菌115株、光滑假絲酵母菌27株、熱帶假絲酵母菌19株、克柔假絲酵母菌7株);病人年齡23～90歲,平均年齡(70.16±10.24)歲,分別來自痰、咽拭子、纖支鏡沖洗液、血液、中段尿、分泌物等標(biāo)本。均用科瑪嘉顯色培養(yǎng)基進行初步鑒定,然后用API20C AUX鑒定到種。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)菌株 白假絲酵母菌ATCC 90028。

1.1.3 培養(yǎng)基 沙保羅培養(yǎng)基(蛋白胨10 g/L,葡萄糖40 g/L,瓊脂13 g/L,PH 5.6±0.2);科瑪嘉顯色培養(yǎng)基;Shadomy瓊脂培養(yǎng)(廣州迪景)。

1.1.4 藥敏紙片 米諾環(huán)素紙片(美國歐賽)。

1.1.5 儀器 電熱恒溫培養(yǎng)箱PBX-272(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)[5]將臨床各種標(biāo)本接種于沙保培養(yǎng)基,35℃培養(yǎng)24～72 h,生長出可疑菌落經(jīng)革蘭染色確定為真菌后,用API20C AUX真菌D板條進行鑒定分型。

1.2.2 菌懸液制備 將沙保瓊脂上的待檢假絲酵母菌轉(zhuǎn)種于科瑪嘉顯色培養(yǎng)基,35℃24～48 h;Shadomy瓊脂培養(yǎng)基先置35℃干燥20～25 min,挑取直徑＞1 mm的純培養(yǎng)菌落用生理鹽水制成菌懸液,0.5麥?zhǔn)蠞岫?備用。

1.2.3 Rosco紙片擴散法 將0.5麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙河蒙睇}水1∶1稀釋傾倒于Shadomy瓊脂培養(yǎng)基,用L型玻棒涂抹均勻,吸走多余的液體,35℃干燥10 min,貼米諾環(huán)素紙片,培養(yǎng)18～24 h后量取抑菌環(huán)直徑(抑菌環(huán)邊緣少量菌落生長忽略不計)。

2 結(jié) 果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株

抑菌環(huán)直徑平均14～15 mm。

2.2 藥敏實驗

臨床分離株藥敏實驗結(jié)果(圖1)。其中,米諾環(huán)素對白假絲酵母菌的作用最好,有抑菌環(huán)的構(gòu)成比為41%;米諾環(huán)素對光滑假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌等的作用很差(見表1)。

圖1 米諾環(huán)素在白假絲酵母菌平板上的抑菌環(huán)Fig.1 Inhibitory ring of minocycline on Candida albicansplate

表1 假絲酵母菌屬臨床分離株對米諾環(huán)素藥物紙片的敏感試驗結(jié)果Table 1 Sensitivity experiment results of clinically Candidaspp.isolates to minocycline sheet

3 討 論

盡管米諾環(huán)素(Minocycline)是抗細(xì)菌藥物, CLSI指南上只有抗細(xì)菌的解釋標(biāo)準(zhǔn),Rosco紙片擴散法也沒有抗真菌的解釋標(biāo)準(zhǔn),但本研究中發(fā)現(xiàn)米諾環(huán)素對白假絲酵母菌在體外有抗菌活性,而且抑菌環(huán)直徑多在11～15 mm,且有抑菌環(huán)的構(gòu)成比為41%;光滑假絲酵母菌僅有2株有抑菌環(huán),直徑在7～10 mm,熱帶假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌沒有抑菌環(huán),也不排除非白假絲酵母菌株數(shù)少的原因。酵母菌是深部真菌感染的主要病原菌[1],而白假絲酵母菌又是酵母菌感染里的最大構(gòu)成比[2],因此白假絲酵母菌感染的治療是抗真菌治療的重點。由于白假絲酵母菌對唑類抗真菌藥物耐藥問題的日益凸顯,而兩性霉素B的毒副作用也不容忽視,米諾環(huán)素在體外表現(xiàn)出對白假絲酵母菌的抗菌活性給體內(nèi)藥理學(xué)研究打下了良好的基礎(chǔ)。

[1]馮文莉,楊靜,奚志琴,等.侵襲性真菌醫(yī)院內(nèi)感染的流行病學(xué)調(diào)查[J].中華流行病學(xué)雜志,2009,30(10):1043-1046.

[2]Lee I,fishman NO,Lautenbach E,et al.Risk factors for fluconazole-resistact Candida glabrata bloodstream infection[J]. Arch Intern Med,2009,169(4):379-383.

[3]Lockhart S R,Messer S A,Dickema D J,et al.identification of Candida nirariensis and Candada bracarensisin a large global collection of Candida glabrataisolates:comparison to the literature[J].J Chin Microbiol,2009,47(4):1216-1217.

[4]鐘曉艷,陳慧玉,何加寧,等.1182株假絲酵母菌感染特性及耐藥性分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(8):816-817.

[5]中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3版)[S].南京:東南大學(xué)出版社,2006:920-922.

Initial Drug Sensitivity Exploration of Minocycline to Common Candidaspp.in V itro

DENG Qun,LI Ze-yu,YU Min
(First People’s Hosp.of Yichang City;Dept.of Lab.,Three Gorges Uni.People’s Hosp.,Yichang443000)

Drug sensitivity of minocycline was tested to 168 strains of common C and idaspeciesin vitroadopting Rosco disc diffusion method Methods:The results showed that the rate of bacteriostat ring to minocycline:Candida albicans was 41%,and C.glabrata1.2%;while C.tropicalis and C.kruseihad no bacteriostat ring.Therefore minocycline had the antifungal activity only on Candida albicans in vitro.

minocycline;C andidaspp.;antifungal activity

R379.4

B

1005-7021(2010)06-0086-03

宜昌市2009年醫(yī)療衛(wèi)生科技攻關(guān)計劃項目(A09301-15)

鄧群 女,副主任技師。主要從事臨床微生物檢驗。E-mail:dq0.1234@163.com

＊通訊作者。E-mail:53666135@qq.com

2010-10-18;

2010-11-15