冰凍切片與細胞印片聯(lián)合應(yīng)用在臨床病理術(shù)中診斷的價值

李淑蓮，李麗娟，代海平

牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院 病理科，黑龍江 牡丹江 157011

近幾年環(huán)保型立式恒冷箱式冰凍切片機以其優(yōu)越的性能，精密的厚度取代了以往的二氧化碳冰凍法和半導(dǎo)體制冷冰凍切片法[1]。我科在7年多使用恒冷箱冰凍切片機的過程中，其精密的厚度、超薄的制片，給術(shù)中病理診斷帶來了極大方便。另外我科在做冰凍切片的同時，也采用了細胞印片，二者相結(jié)合，相互補充，聯(lián)合應(yīng)用，從而大大提高了術(shù)中冰凍病理診斷的準確率，降低冰凍切片的誤診率。

1 材料與方法

1.1 一般材料

收集2009年1月～2009年12月在我院病理科進行術(shù)中冰凍快速診斷的甲狀腺138例，乳腺73例。

1.2 操作方法

使用德國Leica CM1900立式恒冷箱式冰凍切片機1臺，內(nèi)附5個組織固定臺，以便更換組織，Leica819刀片1片、細毛筆刷1只。操作前，先檢查箱內(nèi)溫度是否為（-20）～（-22）℃（每天上班先把機器溫度調(diào)至-20℃，下班時再把溫度調(diào)至-4℃。這樣可以減輕發(fā)動機的消耗，增加使用壽命。溫度設(shè)定過高，組織切片容易打折不平整；溫度過低，組織脆且易碎，切片不完整而且組織細胞變化大，均影響診斷）；刀片是否有劃痕。操作時，先將送檢的新鮮標(biāo)本由病理醫(yī)師用取材刀做多切面剖開，選擇病變明顯的部位，用潔凈的載玻片輕輕按壓做2張印片，同時組織塊做冷凍切片，均進行固定，染色。將印片與冷凍切片兩者聯(lián)合分析，發(fā)出診斷報告，最后結(jié)果以石蠟切片為標(biāo)準，必要時免疫組化支持。

2 結(jié)果

經(jīng)Leica CM1900冷凍切片機制出的冰凍片，其厚度4～5μm，能平整且連續(xù)切片，染色后顏色鮮艷亮麗，甚至優(yōu)于石蠟制片。由于組織在快速制冷時，組織細胞會有不同程度的變形，所以診斷難免會有誤差。綜觀國內(nèi)外有關(guān)資料，冰凍切片診斷的確診率為94%～97.4%，誤診率不到2%，未能確診率1%。文獻報道細胞印片準確率為85%～100%，與冷凍切片相似[2]。本文73例乳腺腫物冰凍切片，細胞印片及聯(lián)合診斷結(jié)果對比見表1。38例甲狀腺腫物術(shù)中冰凍切片，細胞印片及聯(lián)合診斷結(jié)果對照見表2。

表1 73例乳腺腫物冰凍切片，細胞印片及聯(lián)合診斷結(jié)果對比

表2 138例甲狀腺腫物術(shù)中冰凍切片，細胞印片及聯(lián)合診斷結(jié)果對照

由表1中可看出73例乳腺腫物術(shù)中冰凍診斷，確診70例，確診率95.91%。誤診1例，誤診率1.36%，出現(xiàn)于導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌誤診為乳頭狀瘤伴上皮不典型增生（此例印片細胞學(xué)也誤診）。延遲診斷2例，1例為乳腺增生癥伴導(dǎo)管上皮非典型增生；1例為纖維組織瘤樣增生。術(shù)中印片細胞學(xué)確診69例。確診率94.52%，誤診1例，延遲診斷3例，其中2例為乳腺增生性病變伴導(dǎo)管上皮不典型增生，1例為炎癥性病變。冷凍切片與細胞印片學(xué)檢查聯(lián)合確診71例，確診率97.26%。表2中138例甲狀腺腫物術(shù)中冰凍切片，確診131例，確診率94.92%，誤診3例，誤診率2.27%。其中2例為甲狀腺微小乳頭狀癌，誤認為甲狀腺乳頭狀增生，細胞印片學(xué)也如此誤診；1例為低分化濾泡癌誤診為結(jié)節(jié)性甲狀腺腫。延遲診斷4例，其中2例為結(jié)節(jié)性甲狀腺腫伴乳頭狀增生；1例為濾泡樣甲狀腺腫；1例為濾泡增生而延發(fā)。術(shù)中印片細胞學(xué)確診132例，確診率95.65%。誤診3例，其中1例為結(jié)節(jié)性甲狀腺腫伴甲狀腺炎；2例為微小乳頭狀癌；遲發(fā)3例，均為甲狀腺橋本氏病，印片中見到明顯核異性細胞而延診。冷凍切片與細胞印片聯(lián)合確診134例，確診率為97.1%。

3 討論

冰凍切片技術(shù)系由Pieter deRiemer于1818年首創(chuàng)，1891年Welsh開始用于病理診斷，1905年Wilson Mecarty將其列為正式診斷方法。目前國內(nèi)外普遍應(yīng)用冰凍切片技術(shù)及其他快速診斷技術(shù)來解決手術(shù)臺上的診斷問題[3]。

手術(shù)中病理診斷（Intraoperative Pathology Diagnosis）的方法包括冰凍切片法、快速石蠟切片法和手術(shù)中印片細胞學(xué)診斷。它們之間的比較如下：

(1)快速石蠟制片法要求。① 組織塊較小，否則脫水浸蠟不佳，無法切片，影響診斷，觀察范圍小，易遺漏病變；② 時間長；③ 組織塊不易長期保存。

(2)印片細胞學(xué)診斷優(yōu)點是：① 細胞結(jié)構(gòu)清晰；② 適用于難于切片的組織，如脂肪、骨組織和鈣化組織；③ 制片速度快，節(jié)省時間。缺點是：① 印片或涂片缺乏組織結(jié)構(gòu)，有時不能肯定診斷；② 炎癥或其他原因可引起細胞異型性改變，核染色質(zhì)深染，核固縮，細胞大小不等，在細胞學(xué)觀察中可能誤認為惡性腫瘤細胞，造成假陽性錯誤診斷；③ 細胞印片不均勻，質(zhì)量差，印片中細胞成分少，均影響細胞學(xué)診斷的準確性。

(3)冰凍切片中誤診原因大致可歸納為以下幾點：① 標(biāo)本取材有限或不當(dāng)，病理醫(yī)師無目的地隨便取材，造成假陰性的結(jié)果；② 制片技術(shù)問題：切片過厚，過碎，撈片不全，染色不佳等制片技術(shù)原因，均直接影響冰凍切片的診斷；③ 閱片解釋錯誤：在冰凍切片上細胞形態(tài)不典型，辨認常不準確，容易發(fā)生誤診，如將漿細胞誤認為癌細胞；④ 冰凍切片技術(shù)不適用于骨和脂肪組織，因骨組織未脫鈣，不能切片，脂肪組織難以冷凍，亦不能切片。

以上分析可以看出，優(yōu)勢互補，聯(lián)合使用印片細胞學(xué)檢查與冰凍切片相結(jié)合，有助于診斷的準確性[4,5]，前者看細胞，后者看結(jié)構(gòu)，二者可以互相彌補，綜合分析，減少誤診。

總之，冰凍切片診斷對外科醫(yī)生來說是非常重要的，正如Ackerman所說：冰凍切片是為外科醫(yī)生確定治療的決心所必需[6]。從而說明，要想在術(shù)中冰凍中得到一份及時、準確的病理結(jié)果，不僅要有經(jīng)驗豐富的病理醫(yī)師承擔(dān)，技術(shù)過硬的技術(shù)員操作，而且還要有一臺性能優(yōu)良、質(zhì)量上等的冰凍切片機與細胞印片相結(jié)合才行[7,8]。

[1]龔志錦,詹镕洲.病理組織制片和染色技術(shù)[M].上海:科學(xué)技術(shù)出版社,1993:26.

[2]錢利華,闞秀.術(shù)中印片細胞學(xué)診斷的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志,1996,2(3):93.

[3]史景泉,陳意生.現(xiàn)代外科病理學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,1998:5-7.

[4]陳樂真,于占洋.提高冷凍切片診斷準確性的經(jīng)驗和體會[J].中華病理學(xué)雜志,2000,29(2):140-142.

[5]李平,王燕霞,趙俊軍,等.乳腺腫瘤術(shù)中細胞學(xué)與冷凍診斷的互補作用[J].診斷病理學(xué)雜志,2004,11(2):112.

[6]柴小蘭,張興義,王艷紅.乳腺腫塊術(shù)中印片細胞學(xué)及冷凍切片染色結(jié)果對比分析[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2009(6):120-121.

[7]魏永敬,等.154例乳腺病變術(shù)中印片細胞學(xué)與冷凍切片診斷分析[J].西南軍醫(yī),2006(4):20-22.

[8]劉自光.250例乳腺病變術(shù)中冷凍切片結(jié)合組織印片快速診斷分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010(1):103-104.