溴甲酚綠分光光度法檢測定喘口服液中麻黃堿含量

王長江，趙寧紅，周曉紅

（嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院藥劑科，浙江 嘉興 314000）

定喘口服液由麻黃、桂枝、半夏等9味中藥組成，麻黃為平喘止咳化痰藥，效果確切。筆者采用溴甲酚綠分光光度法[1-2]測定麻黃堿含量，較溴麝香草酚蘭比色法操作更為簡單，避免了水蒸餾時的操作誤差，抗干擾效果更好，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

756-PC型分光光度計，pH計。鹽酸麻黃堿標準對照品（中國藥品生物制品檢定所）,定喘口服液（本院自制,批號分別為080102，080331，080529），磷酸鹽緩沖液（pH=5.0），氯仿（分析純）。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

精密稱取70℃干燥至恒重的鹽酸麻黃堿對照品適量，加水溶解，制成每1 mL含0.050 mg鹽酸麻黃堿的溶液，即得對照品溶液。同法制成缺鹽酸麻黃堿的陰性對照品溶液。

2.2 吸收光譜測定

取定喘口服液和陰性對照品溶液各5 mL，分別置50 mL量瓶中,加水至刻度,搖勻。精密量取上述兩種溶液各1 mL和鹽酸麻黃堿對照品溶液1 mL，分別置分液漏斗中，加pH為5.0的磷酸鹽緩沖液1 mL和0.1%溴甲酚綠溶液5 mL，混勻，靜止5 min，分別用氯仿10 mL萃取2次，每次搖勻1 min，放置10 min，合并2次萃取液，置25 mL量瓶內(nèi)，精密加NaOH-乙醇溶液2 mL，再加氯仿至刻度。用紫外分光光度儀在500～700 nm波長間掃描吸收光譜。結(jié)果在625 nm波長處，對照品溶液和定喘口服液有最大吸收，而陰性對照品溶液無吸收(圖1)。

2.3 方法學(xué)考察

標準曲線繪制：精密吸取鹽酸麻黃堿對照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mL，按試驗方法進行操作，換算成樣品的質(zhì)量濃度，得標準曲線 A=0.570 14 C+0.150 86，r=0.999 4，結(jié)果表明線性范圍為0.250～1.500 g/L。

精密度試驗：取對照品溶液，按試驗方法，重復(fù)測定5次。結(jié)果的RSD為 0.52%（n=5），表明精密度良好。

圖1 紫外吸收光譜圖

重現(xiàn)性試驗：取批號為080102的樣品5份，依法測定含量。結(jié)果平均含量為0.482 g/L，RSD=1.10%(n=5)。

pH選擇：按試驗方法操作，分別加入pH為3.5,4.4,4.5,5.0,5.5,5.8的磷酸鹽緩沖液。當(dāng)pH為5.0時，在625 nm波長處陰性對照品溶液幾無吸收，而樣品溶液有較大吸收，且峰形良好。

穩(wěn)定性試驗：按試驗方法進行操作，顯色后放置0.5,1.0,2.0,4.0 h，測定其吸光度，結(jié)果的 RSD=1.029%(n=4)，表明該溶液在顯色后4 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗：取已知含量的同一批（批號為080102）定喘口服液5 mL，稀釋10倍，精密吸取1 mL，分別加入鹽酸麻黃堿對照品溶液（質(zhì)量濃度為0.050 g/L）0.5,1.0,1.5 mL，各制備2份，按照吸收光譜測定法操作，測得回收率，結(jié)果見表1。

表1 鹽酸麻黃堿加樣回收試驗結(jié)果（n=6）

2.4 樣品含量測定

取不同批號的3批定喘口服液，按吸收光譜測定法進行含量測定，結(jié)果批號為080102，080331，080529的3批樣品中，麻黃堿含量分別為 0.482，0.519，0.504 g/L(n=5)。

3 討論

溴甲酚綠染色法較常用于測定莨菪堿類含量[3]，筆者以其測定麻黃堿含量，方法操作簡單易控,結(jié)果準確,適合于定喘口服液的含量測定。但操作過程中應(yīng)嚴格控制定喘口服液和鹽酸麻黃堿對照品溶液的pH在5.0左右。

[1]柯良江，馬輝明.紫外分光光度法測定半夏露中鹽酸麻黃堿的含量[J].中成藥，1997，19（10）：20.

[2]陳葉琴.紫外分光光度法測定咳嗽合劑#中鹽酸麻黃堿的含量[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究，2004，12（2）：18.

[3]沈衛(wèi)華，陳正良，林小文.分光光度法測定顛茄合劑中莨菪堿的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，26（2）：908.