實(shí)驗(yàn)室常用生物安全設(shè)備的使用與維護(hù)

張燕婉葉 玨時(shí) 那宋 莉孟憲敏

實(shí)驗(yàn)室常用生物安全設(shè)備的使用與維護(hù)

張燕婉①葉 玨①時(shí) 那①宋 莉①孟憲敏①

為落實(shí)國(guó)家有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全的法規(guī)政策，提升實(shí)驗(yàn)室的管理水平，針對(duì)Ⅱ級(jí)生物安全防護(hù)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的生物安全柜、高壓滅菌器、超凈臺(tái)和通風(fēng)柜等防護(hù)設(shè)備，從設(shè)備的工作原理、操作規(guī)程和檢定維護(hù)幾方面進(jìn)行了闡述, 從而強(qiáng)調(diào)了生物安全設(shè)備安全操作和規(guī)范管理的重要性和意義，并結(jié)合自身工作介紹了經(jīng)驗(yàn)與體會(huì)。

實(shí)驗(yàn)室；生物安全；設(shè)備；使用；維護(hù)

實(shí)驗(yàn)室常用的生物安全設(shè)備主要有：生物安全柜、高壓滅菌器、通風(fēng)柜、超凈臺(tái)。國(guó)家根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)病原微生物的生物安全防護(hù)水平（BSL），并依照實(shí)驗(yàn)室生物安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按操作的病原微生物危害程度從弱到強(qiáng)，將實(shí)驗(yàn)室分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室必須經(jīng)過(guò)國(guó)家批準(zhǔn)并通過(guò)實(shí)驗(yàn)室國(guó)家認(rèn)可(CNAS)，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室屬于生物安全防護(hù)一級(jí)或二級(jí)實(shí)驗(yàn)室。我們可以根據(jù)所在實(shí)驗(yàn)室從事的生物實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定的生物安全防護(hù)級(jí)別，選擇相應(yīng)的生物安全防護(hù)設(shè)備。

表1 實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)活動(dòng)和生物安全的防護(hù)措施

1 生物安全柜(Biological safety cabinet,BSC)

從表1我們可以看出，從事生物實(shí)驗(yàn)主要產(chǎn)生的危害是有害氣溶膠的產(chǎn)生，而生物安全柜是降低這一危害的最有效的辦法。當(dāng)我們實(shí)驗(yàn)的對(duì)象涉及原代培養(yǎng)物、菌毒種以及診斷性標(biāo)本等具有潛在感染性材料時(shí)，都應(yīng)在生物安全柜中操作。我們把具備氣流控制及高效空氣過(guò)濾裝置的操作柜稱為：生物安全柜，它能有效降低生物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的有害氣溶膠(aerosols)對(duì)操作者和環(huán)境的危害，同時(shí)，還可以減少樣本之間由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。

1.1 生物安全柜的組成和工作原理

生物安全柜是由定向氣流（風(fēng)幕）、高效過(guò)濾器（HEPA）、風(fēng)機(jī)壓力系統(tǒng)和必需的在線監(jiān)測(cè)儀表組成的箱形負(fù)壓裝置[1]。其中的HEPA過(guò)濾器起著重要的過(guò)濾阻擋氣溶膠顆粒的作用。HEPA過(guò)濾器是一種一次性使用的、框架內(nèi)有多重褶迭的干性材料的過(guò)濾器，能對(duì)0.3μm氣溶膠顆粒有效過(guò)濾達(dá)99.97%，保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無(wú)菌狀態(tài)。圖1是Ⅱ級(jí)生物安全柜的工作原理圖：

當(dāng)啟動(dòng)生物安全柜時(shí)，風(fēng)機(jī)開(kāi)始運(yùn)轉(zhuǎn)，房間內(nèi)的空氣經(jīng)前窗開(kāi)口A處進(jìn)入生物安全柜內(nèi)，經(jīng)進(jìn)氣格柵進(jìn)入風(fēng)機(jī)系統(tǒng)F，鼓出的氣流從安全柜后部進(jìn)入柜體上方，分成兩路。一路經(jīng)上部的HEPA過(guò)濾器排放外界（房間/管道），另一路經(jīng)HEPA過(guò)濾器E向下進(jìn)入安全柜內(nèi)，經(jīng)過(guò)柜面再次經(jīng)進(jìn)氣格柵進(jìn)入下一個(gè)循環(huán)。這樣反復(fù)帶走污染空氣，經(jīng)過(guò)濾凈化后再進(jìn)行氣體循環(huán)，確保了實(shí)驗(yàn)中環(huán)境和人員不被污染。

1.2 生物安全柜的種類

目前，我國(guó)將生物安全柜分為三個(gè)等級(jí)，即Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)，它們分別有各自的特點(diǎn)，下邊分別進(jìn)行敘述：

Ⅰ級(jí)生物安全柜：氣溶膠排放大氣前也經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾，但過(guò)濾后的氣體全部排放出去，柜內(nèi)沒(méi)有凈化后循環(huán)氣體。因此，這種安全柜只用于保護(hù)人員和環(huán)境不被污染，但不保護(hù)樣品。

Ⅱ級(jí)生物安全柜：氣溶膠經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后，一部分排放出去，一部分再次循環(huán)進(jìn)入安全柜內(nèi)，其中：前部開(kāi)口區(qū)的吸入氣流用以保護(hù)操作者的安全，經(jīng)HEPA過(guò)濾的垂直氣流用以保護(hù)樣本，排出的氣流經(jīng)HEPA過(guò)濾是為了保護(hù)環(huán)境。因此，這種安全柜是真正的生物安全柜，它既保護(hù)環(huán)境、人員，也保護(hù)樣本，是目前BSL-2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最多的生物安全柜。

表2 Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)生物安全柜的性能指標(biāo)

Ⅲ級(jí)生物安全柜：為完全密閉的、不漏氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全柜。送入氣流經(jīng)HEPA過(guò)濾器后過(guò)濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，排出的氣流經(jīng)雙層HEPA過(guò)濾器或過(guò)濾和焚燒兩次處理。人員通過(guò)與生物安全柜連接的密閉手套實(shí)施操作，安全柜內(nèi)維持至少120 Pa的負(fù)壓。這種安全柜適用于BSL-3實(shí)驗(yàn)室，生物危險(xiǎn)等級(jí)Ⅳ級(jí)的高致病性病原微生物的操作。

1.3生物安全柜的正確使用

1.3.1 生物安全柜的使用要求

1.3.1.2 個(gè)人防護(hù)要求：

(1) 在使用生物安全柜時(shí)必須穿個(gè)人防護(hù)服；

(2) 必須戴手套，最后戴口罩和帽子，必要時(shí)戴防護(hù)口罩或面罩（如BSL-3實(shí)驗(yàn)室）；

1.3.1.3 生物安全柜內(nèi)物品的擺放原則：

(1) 潔凈區(qū)與污染區(qū)一定要嚴(yán)格分開(kāi)，一般遵守從左到右為潔凈區(qū)到污染區(qū)；

(2) 所用物品盡量放在柜內(nèi)工作臺(tái)的后面，前面留出操作空間；

(3) 前面的進(jìn)氣格柵要保證進(jìn)氣暢通，不要被實(shí)驗(yàn)物品擋住。

1.3.1.4 對(duì)紫外燈的要求：

定期更換燈管，確保紫外線的照射強(qiáng)度，保證殺菌效果。

1.3.1.5 避免使用明火：

明火會(huì)造成生物安全柜的氣流紊亂，干擾氣流模式，還會(huì)損壞HEPA過(guò)濾器。

1.3.1.6 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)有備用風(fēng)機(jī)和不間斷供電，確保安全柜工作時(shí)負(fù)壓不變。

1.3.2 生物安全柜使用前的準(zhǔn)備工作

(1) 首先打開(kāi)紫外燈照射30 min，消毒柜內(nèi)臺(tái)面；

(2) 關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)安全柜的風(fēng)機(jī)，排走柜內(nèi)的空氣污染物，約5 min;

(3) 同時(shí),打開(kāi)日光燈，擦拭消毒安全柜的內(nèi)表面和所有要用到的物品。

1.3.3 生物安全柜的正確操作和注意事項(xiàng)

(1) 雙臂垂直緩慢進(jìn)入安全柜前面的開(kāi)口，在安全柜內(nèi)靜止等待一分鐘；

(2) 待安全柜調(diào)整完畢后，保持身體離前窗10 cm以外，在安全柜內(nèi)進(jìn)行各種生物實(shí)驗(yàn)操作；

(3) 操作結(jié)束后，應(yīng)讓生物安全柜繼續(xù)運(yùn)行至少3 min來(lái)完成柜內(nèi)空氣凈化過(guò)程。

(4) 在操作時(shí)為避免對(duì)氣流干擾，應(yīng)避免胳膊在前窗開(kāi)口處快速移動(dòng)和頻繁進(jìn)出；

(5) 廢棄物應(yīng)存放在生物安全柜內(nèi)的容器中，待密閉消毒后再拿出安全柜；

(6) 在生物安全柜內(nèi)操作時(shí)，不要進(jìn)行文字工作；

(7) 操作這身后盡量不要站人，更不要來(lái)回走動(dòng)；

(8) 操作完畢后，應(yīng)在安全柜內(nèi)對(duì)污染的手套先消毒后再脫下。

1.3.4 生物安全柜的維護(hù)

(1) 定期清潔生物安全柜：用70%醫(yī)用酒精擦拭消毒安全柜的內(nèi)壁和臺(tái)面，保持清潔；

(2) 當(dāng)生物安全柜被污染時(shí)，可用：甲醛、過(guò)氧化氫熏蒸法消毒；

(3) 每年需要檢查和更換消毒用的紫外燈；

(4) 每年應(yīng)更換一次HEPA過(guò)濾器，確保生物安全柜的有效性；

(5) 定期對(duì)生物安全柜進(jìn)行檢定，內(nèi)容包括：

正面進(jìn)氣的氣流速度，柜內(nèi)頂部向下氣流的速度，HEPA過(guò)濾器的完整性，人員、產(chǎn)品和交叉污染保護(hù)測(cè)試，柜體泄漏測(cè)試等。

2 高壓滅菌器(Pressure sterilizer)

在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中工程菌的增殖、重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和細(xì)胞培養(yǎng)等工作，均要求所使用的試劑、器皿和實(shí)驗(yàn)用具嚴(yán)格滅菌；有害生物實(shí)驗(yàn)的廢棄物的無(wú)害化處理；有的實(shí)驗(yàn)還要求無(wú)核酸酶的污染，因此實(shí)驗(yàn)室對(duì)實(shí)驗(yàn)器械、試劑等的高壓滅菌是必不可少的。由于蒸汽獲取方法簡(jiǎn)單、溫度高、穿透力強(qiáng)、無(wú)污染，因此，用蒸汽真空滅菌器作為熱力滅菌的主要生物安全設(shè)備，在生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用[2]。

消毒和滅菌的概念是不一樣的。消毒（disinfection）是指殺滅或消除傳播媒介上的病原微生物，使其數(shù)量減少到不再能引起人發(fā)病，即達(dá)到無(wú)害化處理的目的，如煮沸、巴氏消毒、紫外線照射等。滅菌(sterilization)是指不僅要?dú)绾颓宄齻魅拘圆≡⑸铮€要?dú)绾颓宄课⑸铮ㄈ纾杭?xì)菌芽胞等），包括非致病性微生物，即沒(méi)有活菌存在，如：高壓蒸汽滅菌、環(huán)氧已烷滅菌等。

2.1 高壓蒸汽滅菌器的原理

將滅菌的物品放在一個(gè)密閉的壓力容器內(nèi)，通過(guò)加熱使水沸騰產(chǎn)生蒸汽（如蒸汽鍋爐），將蒸汽輸入壓力容器內(nèi),先通過(guò)熱蒸汽將容器內(nèi)的冷空氣排盡，再關(guān)閉閥門，繼續(xù)加熱。由于熱蒸汽在密閉容器中體積急劇膨脹（約1700倍），容器內(nèi)的壓力增加(室內(nèi)壓力表壓力＞0.1 MPa)，使容器內(nèi)的溫度迅速升高(沸點(diǎn)升高)，達(dá)到121℃以上的高溫，利用蒸汽釋放的潛熱使微生物體內(nèi)蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的[3]。

2.2 高壓滅菌器的組成和分類

壓力容器的結(jié)構(gòu)主要是由:殼體(本體和封頭)、連接件、密封元件、接管、安全附件(安全閥和壓力表)和支座組成。見(jiàn)下圖所示：

圖1 圓桶形壓力容器的基本結(jié)構(gòu)

目前普遍使用的高壓滅菌器可分為兩類：一類為下排氣式高壓滅菌器，具有溫度高、熱穿透力強(qiáng)、滅菌效果好優(yōu)點(diǎn)；另一類是抽真空脈動(dòng)式真空滅菌器，屬于目前較先進(jìn)的壓力容器設(shè)備,具有排出冷空氣快、滅菌時(shí)間短、對(duì)物品損壞輕、環(huán)境溫度低和自動(dòng)干燥等優(yōu)點(diǎn)。

2.3 高壓滅菌器的安全操作

高壓滅菌器屬于一類壓力容器（0.1 MPa≤P設(shè)計(jì)＜1.6 MPa），是涉及生命安全、危險(xiǎn)性較大的特種設(shè)備之一，國(guó)家早已頒布了有關(guān)的法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)，如2003年國(guó)務(wù)院制定并實(shí)施的《特種設(shè)備安全監(jiān)察條例》、2000年實(shí)施的國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局制定的《壓力容器安全技術(shù)監(jiān)察規(guī)程》等，明確規(guī)定了壓力容器操作人員的職責(zé)和安全管理制度,壓力容器操作人員要通過(guò)“壓力容器操作人員考核”合格后方能使用壓力容器，即持證上崗。

2.3.1 人員培訓(xùn)，持證上崗

操作人員要定期參加專門的技術(shù)培訓(xùn)，學(xué)習(xí)壓力容器的基本知識(shí)，熟悉國(guó)家的有關(guān)安全技術(shù)法規(guī)。了解本崗位壓力容器的結(jié)構(gòu)、類別、工藝技術(shù)參數(shù)和主要技術(shù)性能。應(yīng)在取得當(dāng)?shù)卣跈?quán)的壓力容器安全監(jiān)察機(jī)構(gòu)頒發(fā)的《壓力容器操作人員合格證》資格后，才能獨(dú)立承擔(dān)壓力容器的操作。

2.3.2 規(guī)范操作

要嚴(yán)格按照“安全及工藝參數(shù)操作規(guī)程”精心操作，做好操作前各項(xiàng)安全檢查(本體和安全附件)和操作過(guò)程中的巡回檢查, 認(rèn)真填寫運(yùn)行記錄。

2.3.3 正確應(yīng)對(duì)突發(fā)情況

壓力容器容器運(yùn)行中,如果發(fā)生異常危及安全時(shí)，應(yīng)采取緊急措施,并及時(shí)上報(bào)。

2.3.4 高壓滅菌器的操作例舉(以臥式壓力滅菌器為例)

2.3.4.1 滅菌前的準(zhǔn)備工作

（1）檢查安全附件是否齊全、完好；

（2）本體及受壓元件有無(wú)裂紋、變形、泄漏等現(xiàn)象；

（3）各種閥門和密封元件是否完好,有無(wú)跑、冒、滴、漏和筒內(nèi)積水；

（4）快開(kāi)門式壓力容器應(yīng)做端蓋與筒體法蘭緊固嚙合實(shí)驗(yàn)；

（5）在設(shè)備通蒸汽前壓力表的壓力應(yīng)在在零位；（6）將柜室內(nèi)擦拭清潔,排氣管要暢通；

（7）將要準(zhǔn)備滅菌的物品按要求放入金屬藍(lán)內(nèi)，要松散放置，使蒸汽能均勻作用于裝載的物品。消毒玻璃容器時(shí)，要將敞口的玻璃容器口朝下放置或平放。

2.3.4.2 滅菌操作步驟:

（1）將滅菌物品放入柜室內(nèi),關(guān)閉柜門；

（2）把蒸汽控制閥門移至“關(guān)閉”位置、截止柜室；

（3）開(kāi)啟進(jìn)入夾管的蒸汽閥門，將夾管內(nèi)冷氣排走；

（4）待夾管壓力表壓力達(dá)到滅菌壓力要求（一般為0.11MPa）時(shí)，把蒸汽閥轉(zhuǎn)至“消毒”位置，蒸汽進(jìn)入內(nèi)，使柜室的冷氣排出；

（5）待柜室壓力達(dá)到要求時(shí)（一般為0.11 MPa），旋動(dòng)調(diào)整閥保持定記錄滅菌時(shí)間；

（6）待達(dá)到滅菌時(shí)間后，把蒸汽控制閥轉(zhuǎn)至“排汽”位置，排出柜內(nèi)蒸汽；

（7）確定蒸汽排凈,表壓為“0”,將柜門打開(kāi),取出滅菌過(guò)的物品;

（8）滅菌結(jié)束，關(guān)緊進(jìn)氣閥。

2.4 高壓滅菌器使用的注意事項(xiàng)

2.4.1 嚴(yán)禁超溫超壓運(yùn)行

由于壓力容器允許使用的溫度、壓力、流量及介質(zhì)充裝等參數(shù)是依據(jù)工藝設(shè)計(jì)要求和保障安全生產(chǎn)的前提下制定的，故應(yīng)在設(shè)計(jì)壓力和溫度范圍內(nèi)操作，以確保安全運(yùn)行。

2.4.2 應(yīng)注意平穩(wěn)操作

緩慢地進(jìn)行加載和卸載。操作時(shí)要做到:四慢一平穩(wěn),即慢升溫慢升壓慢降壓慢降溫,恒溫操作時(shí)工藝參數(shù)要穩(wěn)定。因?yàn)殚_(kāi)始加壓時(shí)，過(guò)快的加載速度會(huì)降低材料的斷裂韌性，使存微小缺陷的容器在壓力的沖擊下發(fā)生脆性斷裂。

2.4.3 嚴(yán)禁帶壓操作

不帶壓松緊螺栓和維修;門關(guān)到位后才能通汽升壓,滅菌后一定要等蒸汽排凈,表壓為“0”時(shí)才能開(kāi)門。

2.4.3 注意裝載容量

下排氣滅菌器的裝載量不得超過(guò)壓力容器內(nèi)容量的80%,預(yù)真空滅菌器的裝載量不得超過(guò)90%。且不能小于容器內(nèi)容量的10～5%，以防止“小裝量效應(yīng)”。

2.4.4 滅菌物品盡量分類滅菌

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備消毒的物品和實(shí)驗(yàn)后要滅菌的廢棄物，應(yīng)分開(kāi)滅菌；容易和難于滅菌的物品也應(yīng)分開(kāi)高壓，或以最難滅菌的物品的溫度壓力要求為準(zhǔn)。

2.4.5 滅菌物品應(yīng)按要求擺放

（1）消毒玻璃容器時(shí)，要將敞口的玻璃容器口朝下放置或平放;

（2）消毒有包裝材料的物品時(shí)，應(yīng)用自動(dòng)啟閉式或帶氣孔的器具裝放，以保證物品內(nèi)部空氣的排出和蒸汽的進(jìn)入;

（3）消毒器皿時(shí)，盡量單獨(dú)包裝，蓋要打開(kāi)，以利蒸汽滲入；

（4）難于滅菌的物品、織物包放上層，較易滅菌的物品、金屬物品放下層，不要靠門和四壁擺放物品，以防吸入較多的冷凝水。

2.4.6 廢棄物滅菌前的消毒：

大多數(shù)生物實(shí)驗(yàn)室（Ⅰ、Ⅱ級(jí)）,使用脈動(dòng)真空滅菌器，滅菌前隨著冷空氣的排放會(huì)有沒(méi)有消毒滅菌的熱蒸汽排出，導(dǎo)致容器中內(nèi)氣溶膠隨蒸汽向周圍環(huán)境擴(kuò)散。如果滅菌物品是污染過(guò)有害病原微生物，這時(shí)會(huì)在滅菌器周圍會(huì)產(chǎn)生有害氣溶膠，污染環(huán)境，威脅人的健康。故在對(duì)有害廢棄物滅菌前，應(yīng)對(duì)污染過(guò)的物品先進(jìn)行消毒即無(wú)害化處理，如用含氯消毒液的浸泡等。

2.4.7 根據(jù)滅菌消毒物品的不同選擇不同的消毒程序

消毒液體時(shí),排出冷空氣應(yīng)選擇“置換式”,不要用“脈動(dòng)式”。

2.5 滅菌器的檢定與維護(hù)

國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局已有明確規(guī)定：“壓力容器的使用單位及其主管部門，必須及時(shí)安排壓力容器的定期檢驗(yàn)工作，并將壓力容器年度檢驗(yàn)計(jì)劃報(bào)當(dāng)?shù)匕踩O(jiān)察機(jī)構(gòu)及檢驗(yàn)單位?！盵4]壓力容器的定期檢驗(yàn)包括：外部檢驗(yàn)、內(nèi)部檢驗(yàn)和耐壓試驗(yàn)，本文主要介紹實(shí)驗(yàn)室常用的幾種滅菌器滅菌效果的監(jiān)測(cè)方法。

2.5.1 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)法

指每次運(yùn)行操作滅菌器時(shí)，對(duì)滅菌鍋內(nèi)、套層內(nèi)和蒸汽輸送管道內(nèi)的溫度、壓力等指標(biāo)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，觀察滅菌設(shè)備是否達(dá)到各項(xiàng)性能指標(biāo)，并且要對(duì)滅菌各步驟的時(shí)間進(jìn)行記錄。這種監(jiān)測(cè)方法是實(shí)驗(yàn)室里最經(jīng)常和最容易實(shí)施的監(jiān)測(cè)方法。

2.5.2 化學(xué)指示卡（管）監(jiān)測(cè)方法

指將既能指示蒸汽溫度，又能指示溫度持續(xù)時(shí)間的化學(xué)指示卡被滅菌的物品中央，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，取出指示卡，根據(jù)其顏色和性狀的改變，判斷設(shè)備是否達(dá)到滅菌效果。

2.5.3 生物監(jiān)測(cè)法

指將內(nèi)函式壓力蒸汽滅菌監(jiān)測(cè)管置于檢驗(yàn)包的中心位置，經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，取出，擠出里邊的培養(yǎng)基，按規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基的顏色變化。監(jiān)測(cè)時(shí)應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，如：嗜熱脂肪芽胞菌。

2.5.4 壓力容器使用單位應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)向當(dāng)?shù)丶夹g(shù)監(jiān)督部門注冊(cè)登記,核定壓力容器的安全狀況等級(jí)。使用部門對(duì)在用容器應(yīng)建立:滅菌器的檢驗(yàn)、維修和報(bào)廢等技術(shù)檔案。

2.5.5 當(dāng)滅菌器暫時(shí)停用時(shí)，應(yīng)作好停用期間的維護(hù)工作，如：保持容器內(nèi)的清潔和干燥，防止設(shè)備受到大氣的腐蝕；清除容器內(nèi)的物品，尤其是有腐蝕性物品。

3 超凈臺(tái)(Purificatory cabinet)

超凈臺(tái)作為目前實(shí)驗(yàn)室最常用的無(wú)菌操作設(shè)備廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室。它體積小，凈化效率高，操作簡(jiǎn)便，可有效保護(hù)實(shí)驗(yàn)樣品，適用于無(wú)毒無(wú)害樣品的無(wú)菌操作。早在生物安全柜使用之前，超凈臺(tái)是當(dāng)時(shí)實(shí)驗(yàn)室最有效的無(wú)菌操作設(shè)備。

3.1 超凈臺(tái)的工作原理

超凈臺(tái)由三相電動(dòng)機(jī)作為鼓風(fēng)動(dòng)力，將超凈臺(tái)周圍的空氣從超凈臺(tái)的下方的兩側(cè)面或背面鼓入，經(jīng)過(guò)上部金屬網(wǎng)內(nèi)的“超級(jí)濾清器”過(guò)濾，形成連續(xù)不斷的無(wú)塵無(wú)菌的潔凈空氣層流，即“高效的無(wú)菌空氣”，它已經(jīng)濾去了0.3μm以上的塵埃顆粒、真菌和細(xì)菌孢子等大部分微生物。潔凈的氣流從超凈臺(tái)上部送入下邊的操作臺(tái)面上，經(jīng)正面出口處排出?？諝饬鞒鏊俣葹椋?0m/ min,足以阻止外部的空氣直接流入超凈臺(tái)。

3.2 超凈臺(tái)的使用注意事項(xiàng)

3.2.1 超凈臺(tái)操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)備時(shí)間短，打開(kāi)開(kāi)關(guān)運(yùn)行10 min就可以進(jìn)行操作，使用方便。

3.2.2 要在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行接種操作時(shí)，超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)保持清潔，凡與接種無(wú)關(guān)的物品不要放入，以保持無(wú)菌狀態(tài)。超凈臺(tái)周圍的空氣也應(yīng)保持新鮮和清潔，可在通氣窗上覆上4層紗布以簡(jiǎn)單濾塵。

3.2.3 任何時(shí)候不應(yīng)將超凈臺(tái)的進(jìn)風(fēng)孔對(duì)著開(kāi)啟的門或窗戶，以免影響濾清器的過(guò)濾效果。

3.2.4 除每次使用前應(yīng)用紫外燈照射超凈臺(tái)的無(wú)菌室外，還應(yīng)定期用70%的醫(yī)用酒精或2%新潔爾滅擦拭消毒臺(tái)面。

4 通風(fēng)櫥(Ventilator)

通風(fēng)櫥也是實(shí)驗(yàn)室常用的生物安全設(shè)備，可有效將櫥內(nèi)的有毒有害的揮發(fā)性試劑排到室外，保護(hù)操作者和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。

4.1 通風(fēng)櫥的工作原理

通風(fēng)櫥的設(shè)計(jì)原理很像一級(jí)生物安全柜，所不同的是沒(méi)有HEPA過(guò)濾器。通過(guò)位于通風(fēng)櫥上部的一電動(dòng)式鼓風(fēng)機(jī)將櫥內(nèi)的空氣抽走，即外部空氣從通風(fēng)櫥正面進(jìn)入櫥內(nèi)，隨櫥內(nèi)氣體一同上排到管道中。

4.2 通風(fēng)櫥的正確使用

4.2.1 通風(fēng)櫥雖然能將大部分有害氣體排走，但由于不是密封式操作，還是會(huì)有少量有害氣體泄漏，建議在通風(fēng)櫥前操作時(shí)戴上口罩、護(hù)目等。

4.2.2 如用通風(fēng)櫥操作腐蝕性試劑時(shí)，應(yīng)選擇用耐腐蝕材料制成的通風(fēng)櫥設(shè)備，定期用清水擦拭櫥內(nèi)墻壁，保持櫥內(nèi)清潔。

以上討論了實(shí)驗(yàn)室常用的幾種生物安全設(shè)備，盡管它們?cè)谏锇踩雷o(hù)方面起到了一定的作用，但它們也只是降低操作的風(fēng)險(xiǎn)，生物安全最重要的是實(shí)驗(yàn)者自身的防護(hù)意識(shí)和規(guī)范的生物操作，僅僅靠生物安全設(shè)備的作用是不夠的。

[1]周維華.生安全柜醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S]. YY0569-2005.

[2]雷東鋒. 現(xiàn)代生物化學(xué)與分子生物學(xué)儀器與設(shè)備[M].科學(xué)出版社，2006.

[3]石智豪.壓力容器安全操作技術(shù)[J].中國(guó)鍋爐壓力容器安全雜志，1989.

[4]國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局.壓力容器安全技術(shù)監(jiān)察規(guī)程[J].中國(guó)鍋爐壓力容器安全雜志，2000.

Manipulation and maintenance of biological safety equipment in laboratory

Zhang Yanwan, Ye Jue, Shi Na, et al

In order to perform the state rule of biosafety and promote the managing level, this paper have discussed the several biological safety equipments such as biological safety cabinet, pressure sterilizer, purificatory cabinet and ventilator in medical laboratory (BSL-2) etc. The working principle, operating standard and maintenance of the equipments were elaborated respectively. The importance and significance on securing operation and standard management of biological safety equipment have been emphasized. This paper introduced and showed the author’s working experience and realization in combination with routine work.

Laboratory; Biosafety; Equipment; Manipulation; Maintenace

1672-8270(2010)01-0015-06

TH 772

B

張燕婉,女,(1957- ),北京大學(xué)畢業(yè)，生物化學(xué)專業(yè)，大學(xué)本科，理學(xué)學(xué)士?，F(xiàn)就職于阜外心血管病醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，主任技師，主要從事儀器分析、生化分析和實(shí)驗(yàn)室管理工作。

2009-11-14

①中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外心血管病醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室 北京 100037

China Medical Equipment, 2010, 7(1):15-20.

[First-author's address]Central Laboratory, Fuwai Hospital of Cardiovascular Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing 100037, China.

近年來(lái)，我國(guó)為加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理，減少醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全事件和感染事故的發(fā)生，政府頒布了各種有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB19781-2005《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室 安全要求》、GB19489-2008《實(shí)驗(yàn)室 生物安全通用要求》、國(guó)務(wù)院令第424號(hào)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》,使政府和廣大科研工作人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室中產(chǎn)生的生物危害有了更為深刻的認(rèn)識(shí)，明確了使用生物安全防護(hù)設(shè)備（安全隔離裝置）是實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的有效措施，是保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境的重要手段。下表列舉了醫(yī)學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常從事的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中可能發(fā)生的危害和應(yīng)該使用的生物安全防護(hù)設(shè)備：見(jiàn)表1。