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    南五味子不同生長期鞣質(zhì)含量的測定

    2010-09-06 09:10:08湘潭職業(yè)技術(shù)學(xué)院李君李俊雅吳梅青
    河南科技 2010年21期
    關(guān)鍵詞:鎢酸鞣質(zhì)棕色

    湘潭職業(yè)技術(shù)學(xué)院李君李俊雅吳梅青

    南五味子不同生長期鞣質(zhì)含量的測定

    湘潭職業(yè)技術(shù)學(xué)院李君李俊雅吳梅青

    南五味子來源于木蘭科植物科植物華中五味子Schisandra sphenantheraRehd.etWils.的干燥成熟果實(shí)。本品能益氣生津、斂肺滋腎、止瀉、澀精、安神,可治療久咳虛喘、津少口干、久瀉、健忘失眠等癥,是中醫(yī)臨床常用的名貴傳統(tǒng)藥物之一。本文以南五味子中鞣質(zhì)含量變化為依據(jù),用紫外-可見分光光度法結(jié)合干酪素法測定不同生長期南五味子中鞣質(zhì)的含量。

    一、儀器與試藥

    Aglient8455型紫外-可見分光光度計(jì),HS6150D超聲提取儀(昆山市超聲儀器有限公司),電子天平(BS224S,北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。南五味子樣品由貴州GAP基地提供,經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院生藥教研室陳隨清教授鑒定為木蘭科植物華中五味子的果實(shí)。沒食子酸對照品(中國藥品生物制品檢定所),干酪素(北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠),無水碳酸鈉。

    二、方法與結(jié)果(本實(shí)驗(yàn)應(yīng)避光操作)

    1.對照品溶液的制備。精密稱取沒食子酸對照品50mg,置100ml棕色容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得(每ml含沒食子酸0.05mg)。

    2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。精密量取對照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml,分別置25ml棕色瓶中,各加入磷鉬鎢酸試液1ml,再分別加入11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml,用29%碳酸鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,放置30分鐘以相應(yīng)的試劑為空白,照紫外-可見分光光度法在760nm的波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    y=69.9041X-0.0057,r=0.9994。

    3.供試品溶液的制備。取南五味子粉末約2g,精密稱定,置250ml棕色量瓶中,加水150ml,放置過夜,超聲處理10分鐘,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,靜置(使固體物沉淀),濾過,棄去初濾液50ml,精密量取續(xù)濾液20ml,置100ml棕色量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,即得。

    4.測定法:總酚。精密量取供試品溶液2ml,置25ml棕色瓶容量中,照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法,自“加入磷鉬鎢酸試液1ml”起,加水10ml,依次測定吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出供試品溶液中沒食子酸的量(mg),計(jì)算,即得。

    不被吸附的多酚。精密量取供試品溶液25ml,加至已盛有干酪素0.6g的100ml具塞錐形瓶中,密塞,置30℃水浴中保溫1小時(shí),時(shí)時(shí)振搖,取出,放冷,搖勻,濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液2ml,置25ml棕色量瓶中,照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法,自“加入磷鉬鎢酸試液1ml”起,加水10ml,依次測定吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出供試品溶液中沒食子酸的量(mg),計(jì)算,即得。按下式計(jì)算鞣質(zhì)的含量:

    鞣質(zhì)含量=總酚量-不被吸附的多酚量。

    5.精密度試驗(yàn)。精密量取沒食子酸對照品溶液2.0ml,置25ml棕色瓶容量中,加入磷鉬鎢酸試液1ml,加水10ml,用29%碳酸鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,放置30分鐘以相應(yīng)的試劑為空白,照紫外-可見分光光度法在760nm的波長處測定吸光度,連續(xù)測定5次,測得RSD值為0.29%,表明樣品的精密度良好。

    6.穩(wěn)定性試驗(yàn)。精密量取沒食子酸對照品溶液2.0ml,置25ml棕色瓶容量中,加入磷鉬鎢酸試液1ml,加水10ml,用29%碳酸鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,分別在5min,10min,15min,30min,45min,60min放置時(shí)間點(diǎn),測定其吸光度,測得RSD值為1.28%,表明樣品的穩(wěn)定性良好。

    7.重復(fù)性試驗(yàn)。取南五味子粉末約2g,精密稱定,按2.3項(xiàng)下方法制備樣品液,用第4節(jié)方法進(jìn)行分析,測定樣品中鞣質(zhì)的含量,測得RSD值為0.64%,表明樣品的重復(fù)性良好。

    8.加樣回收率試驗(yàn)。取南五味子粉末約2g,精密稱定,按第3節(jié)方法制備樣品液,加入一定量的沒食子酸對照品,進(jìn)行紫外-可見分析,計(jì)算加樣回收率,測得RSD值為1.36%,表明樣品的加樣回收率良好。

    三、測定結(jié)果

    以紫外-可見分光光度法結(jié)合干酪素法分別測定生長期為9月15日,9月25日,10月5日,10月15日,10月25日,11月5日的南五味子樣品。結(jié)果見表1。

    表1 貴州GAP基地南五味子不同生長鞣質(zhì)的含量

    四、討論

    1.以紫外-可見分光光度法結(jié)合干酪素法測定不同生長期南五味子鞣質(zhì)含量的變化趨勢是相同的,在青果時(shí)鞣質(zhì)的含量最高,隨著南五味子果實(shí)的成熟,鞣質(zhì)含量的含量逐漸降低。

    2.紫外-可見分光光度法結(jié)合干酪素法測定南五味子中鞣質(zhì)的含量與2000版《中華人民共和國藥典》中皮粉法相比,具有樣品取樣量少,快速,靈敏等特點(diǎn)。但影響其準(zhǔn)確性的主要因素是干酪素中微量雜質(zhì)的含量

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