藏藥線葉龍膽的生藥鑒定

林 麗 李 碩 晉 玲 杜 弢 尤淑霞 高素芳

甘肅中醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000

線葉龍膽Gentiana farreri Balf．f．為龍膽科龍膽屬植物，以全草入藥，稱高山龍膽。性味苦寒，入肝膽經(jīng)，具有清熱燥濕，清火定驚之功，用于濕熱黃疸、喉痛、眼睛赤目，陰囊腫痛，膽囊炎等證。目前商品流通均為野生品，無栽培品種。市場上多以三江源土特產(chǎn)銷售，商品名：玉美人。廣泛分布于青甘藏高原，生于高山草甸、山谷草灘，海拔3050－4800米。主要產(chǎn)于青海玉樹、剛察、瑪多、瑪沁、澤庫、河南、湟源、互助、祁連、門源;四川阿壩;西藏靈芝、類烏齊縣、八宿、當(dāng)雄;甘肅夏河、甘南、瑪曲、馬銜山等地，在甘南當(dāng)?shù)厝藗兎Q其為龍膽草，喇叭花。目前，對(duì)該藥的生藥學(xué)研究較少，為了對(duì)龍膽科植物進(jìn)一步開發(fā)利用，本文對(duì)線葉龍膽的莖、葉、花從性狀特征、顯微特征和理化鑒定方面進(jìn)行了研究，為線葉龍膽的生藥鑒別與開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料、儀器與方法

1.1 材料與儀器 線葉龍膽采自甘肅馬銜山，并經(jīng)鑒定為龍膽科龍膽屬植物線葉龍膽Gentiana farreri Balf．f．的干燥全草。WFH－2018型紫外透射反射儀 (上海精科實(shí)業(yè)有限公司);BS 224 S型電子天平 (北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);CHK2－F－GS型光學(xué)顯微鏡 (Olympus);顯微成像系統(tǒng) (尼康80i，Basic Research軟件);Power shot650型數(shù)碼相機(jī) (佳能)。

1.2 方法 對(duì)所采集的線葉龍膽進(jìn)行植物形態(tài)觀察，用數(shù)碼相機(jī)拍攝，并對(duì)其器官形態(tài)特征進(jìn)行描述;取線葉龍膽的干燥莖、葉，用水浸泡，待軟化后做徒手切片及葉的表皮制片，另取干燥的莖、葉、花分別研粉，按生藥學(xué)常規(guī)方法制成線葉龍膽莖、葉、花的橫切片以及粉末片。將制備好的切片置顯微鏡下觀察，并用顯微成像系統(tǒng)拍攝。

2 結(jié)果

2.1 原植物鑒定［1－2]

對(duì)采集樣品原植物形態(tài)進(jìn)行觀察，并參考相關(guān)資料與文獻(xiàn)，經(jīng)鑒定為龍膽科龍膽屬植物線葉龍膽Gentiana farreri Balf．f．，對(duì)線葉龍膽原植物用數(shù)碼相機(jī)拍攝，如圖1。

圖1 線葉龍膽Gentiana farreri Balf．f．(甘肅馬銜山)

2.2 性狀特征 對(duì)所采集線葉龍膽樣品的性狀進(jìn)行觀察，器官形態(tài)特征見表1。

圖2 線葉龍膽莖粉末特征圖

表1 線葉龍膽植物器官形態(tài)特征

圖3 線葉龍膽葉粉末特征圖

圖4 線葉龍膽花粉末特征圖

2.3 顯微特征

對(duì)線葉龍膽的干燥莖、葉、花進(jìn)行粉末制片并進(jìn)行觀察，粉末特征見圖2～4;對(duì)線葉龍膽的莖、葉組織橫切片及葉的表皮制片進(jìn)行觀察，顯微特征見圖5～7，顯微結(jié)構(gòu)特征總結(jié)如表2。

圖5 線葉龍膽葉組織橫切面簡圖

圖6 線葉龍膽莖組織橫切面詳圖

圖7 線葉龍膽葉表皮顯微特征圖

表2 線葉龍膽顯微結(jié)構(gòu)特征

2.4 薄層色譜鑒別［3－5]

供試品溶液的制備：線葉龍膽、秦艽、關(guān)龍膽三種藥材分別粉碎，取粉末0.5g，加甲醇15ml，回流30min，過濾蒸干，用甲醇轉(zhuǎn)移，定容于1m l容量瓶中，供點(diǎn)樣用，對(duì)照品龍膽苦苷濃度為0.376mg/ml。

展開：采用GF254－CMC－Na板，分別取甲醇提取液及對(duì)照品溶液點(diǎn)樣，展開劑為氯仿：甲醇：水 (13：3：0.2)，揮干溶劑，置紫外燈下觀察。見圖8。

圖8 硅膠薄層色譜 (GF254)

計(jì)算Rf值：Rf(對(duì)照品) =0.341，Rf(線葉龍膽)=0.325，Rf(關(guān)龍膽) =0.318，Rf(秦艽) =0.334。三種藥材及對(duì)照品Rf值相近，且斑點(diǎn)在紫外分光儀下顯同一種顏色—黃棕色，說明三種藥材均含有龍膽苦苷，另外，線葉龍膽中還有一棕色斑點(diǎn)，即有未知成分存在，其Rf值=0.208，極性大于龍膽苦苷的極性。對(duì)該藥材中存在的有效化學(xué)成分的定量分析，有待于進(jìn)一步研究。

3 討論

3.1 線葉龍膽藥材粉末特征為念珠狀增厚表皮細(xì)胞、非腺毛、花瓣乳頭狀細(xì)胞和花柱碎片;薄層色譜中，供試品與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，重現(xiàn)性好線葉龍膽中還有一棕色斑點(diǎn)，即有未知成分存在，其Rf值=0.208，極性大于龍膽苦苷的極性。對(duì)該藥材中存在的有效化學(xué)成分的定量分析，有待于進(jìn)一步研究。

3.2 我國龍膽屬植物資源十分豐富，分布面積廣，許多植物在民間都作為藥用，從當(dāng)?shù)匾吧闹参镔Y源中篩選一些具有較高藥用價(jià)值的種類，有針對(duì)性地進(jìn)行人工栽培馴化和開發(fā)利用試驗(yàn)，在取得成熟技術(shù)后，再建立繁育基地和大面積推廣［6]是緩解野生藥用資源匱乏和擴(kuò)大新藥源的有效途徑;線葉龍膽在西藏、甘肅資源較為豐富，有一定的藥用價(jià)值，對(duì)線葉龍膽的有效化學(xué)成分及藥理作用的進(jìn)一步研究，將為我國龍膽屬植物資源的進(jìn)一步開發(fā)利用提供思路。

［1]姚振生．藥用植物學(xué)［M]．中國中醫(yī)藥出版社．2003年1月．

［2]禹信哲．植物學(xué) (形態(tài)解剖部分) ［M]．人民教育出版社．1978年3月．

［3]王寧，周樂．龍膽屬植物化學(xué)成分研究概況．陜西林業(yè)科技［J]．N0．3，2001．pp．71 －78．

［4]曹雯．秦艽的薄層色譜分析．時(shí)珍國醫(yī)國藥 ［J]．2003年第 12期．74．

［5]劉濤，付玉芹，才謙，楊松松，韓立偉，黃學(xué)石．龍膽總裂環(huán)環(huán)烯醚帖苷質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究．云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)［J]．2006年第2期．25．

［6]林玲，羅建．西藏色季拉山龍膽屬植物種植資源及其開發(fā)利用．林業(yè)科技［J]．第27卷，第6期．2002年11月．