兩種測(cè)定血清肌酐方法偏倚的比較

陳雪梅，王亞平，王 芳

(江陰市疾病預(yù)防控制中心，江蘇 江陰 214431)

肌酐是一種低分子量的含氮化合物，是肌酸代謝的終末產(chǎn)物。血中肌酐濃度主要與腎小球?yàn)V過(guò)率相關(guān)，因而血清肌酐測(cè)定是臨床常規(guī)腎功能之一[1]。常規(guī)實(shí)驗(yàn)室血清肌酐的檢測(cè)方法主要是堿性苦味酸法和酶法[2]。為了解我單位常規(guī)標(biāo)本用酶法和Jaffe＇s速率法檢測(cè)肌酐的結(jié)果是否一致，本文依據(jù)美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)批準(zhǔn)的《用患者樣本進(jìn)行方法學(xué)對(duì)比及偏差評(píng)估EP9-A2指南文件》，對(duì)兩種方法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比分析及預(yù)期偏倚評(píng)估，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 日立 7020(日本)全自動(dòng)生化分析儀與貝克曼DXC600(美國(guó))全自動(dòng)生化分析儀。

1.2 試劑 酶法：試劑日本協(xié)和批號(hào)：R004APA、R004APB，校準(zhǔn)品 CFAS 批號(hào)：150885-07，質(zhì)控品貝克曼批號(hào)： M807742、M807743。 Jaffe＇s速率法：試劑貝克曼批號(hào)：M811566，貝克曼多項(xiàng)定標(biāo)液批號(hào)：M907396，貝克曼質(zhì)控品批號(hào)：M807742、M807743。

1.3 測(cè)定及分析方法 (1)酶法X采用協(xié)和試劑在日立7020儀器上測(cè)定；Jaffe＇s速率法Y采用貝克曼試劑在貝克曼DXC600儀器上測(cè)定。(2)每天隨機(jī)抽取8份臨床患者樣本，分別用兩種方法按順序1→8進(jìn)行測(cè)定，再按相反順序8→1重復(fù)測(cè)定，共測(cè)定5天。(3)記錄測(cè)定結(jié)果(Xij和Yij),計(jì)算每個(gè)樣本測(cè)定結(jié)果的均值(Xi和Yi)、樣本重復(fù)測(cè)定值間差值的絕對(duì)值(Dxi和Dyi)及兩種方法測(cè)定結(jié)果均值間的差值(Yi-Xi)。 (4)以 Yi對(duì) Xi作散點(diǎn)圖。(5)以(Yi-Xi)對(duì) Xi作偏差圖。(6)目測(cè)離群點(diǎn)。計(jì)算：計(jì)算樣本重復(fù)測(cè)定值間差值(Dxi和Dyi)的平均數(shù)。計(jì)算兩種方法測(cè)定結(jié)果均值間差值(Yi-Xi)的平均數(shù)。判斷超出平均數(shù)4倍時(shí)，檢驗(yàn)結(jié)果視為無(wú)效。

2 結(jié)果

2.1 部分病人樣本檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，Yi對(duì)Xi均值散點(diǎn)圖見(jiàn)圖1，偏差圖見(jiàn)圖2。

表1 病人樣本檢驗(yàn)結(jié)果

表2 預(yù)期偏差的計(jì)算

2.2 所有樣本重復(fù)測(cè)定值間的差值均未超過(guò)兩種方法測(cè)定結(jié)果均值間差值的平均數(shù)，所有結(jié)果均有效。

圖1 Yi-Xi均值散點(diǎn)圖

圖2 (Yi-Xi)-Xi偏倚圖

2.3 計(jì)算兩種方法測(cè)定病人血清樣本肌酐濃度結(jié)果的線性回歸方程為：Y=0.9987X+15.953，相關(guān)系數(shù)為 r2為 0.9979。

3 討論

肌酐是肌酸代謝的最終產(chǎn)物,它是由磷酸肌酸通過(guò)脫磷酸基，并閉合成環(huán)而形成的內(nèi)脫水物。肌酐是肌肉組織代謝產(chǎn)生的物質(zhì)，它僅僅由腎小球排泄，不被腎小管重吸收，所以血清肌酐濃度是評(píng)價(jià)腎小球?yàn)V過(guò)功能的重要指標(biāo)[2]。

肌酐的測(cè)定方法主要有化學(xué)法和酶法。大多數(shù)化學(xué)法是根據(jù)Jaffe堿性苦味酸法建立起來(lái)的，是測(cè)定肌酐的經(jīng)典方法，但受許多假肌酐物質(zhì)干擾，結(jié)果不夠準(zhǔn)確[3]。肌酐酶法受基質(zhì)效應(yīng)影響小，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好，酶法的線性范圍寬，是比較理想的方法，而苦味酸法在肌酐濃度高于一定范圍的時(shí)候就難以準(zhǔn)確測(cè)定了。有文獻(xiàn)報(bào)道，酶法測(cè)定肌酐的線性濃度可高達(dá)8840μmmol/L，而堿性苦味酸法的線性上限僅為2210μmmol/L[1]。

我們依據(jù)NCCLS EP9-A文件，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室采用的兩種不同方法測(cè)定臨床標(biāo)本中肌酐含量的結(jié)果進(jìn)行了方法學(xué)比較和偏倚評(píng)估。以酶法為對(duì)比方法，對(duì)Jaffe＇s速率法進(jìn)行了評(píng)估，其回歸線性方程為：Y=0.9987X+15.953，二者具有良好的正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為r2為0.9979)；相對(duì)預(yù)期偏倚隨著肌酐的濃度增大而減小，當(dāng)肌酐濃度為 40.00μmmol/L、100.00μmmol/L、600.00μmmol/L 時(shí)，Jaffe＇s速率法的偏倚分別為39.75% 、15.82%、2.53%，這與文獻(xiàn)[4]報(bào)道的相一致，單點(diǎn)定標(biāo)基于全自動(dòng)分析的肌酐Jaffe苦味酸動(dòng)力學(xué)雙試劑測(cè)定結(jié)果與真值有偏差，當(dāng)SCr<100μmmol/L，結(jié)果假性偏高5～10%，高于200μmmol/L時(shí)則偏低10～15%。鑒于以上的結(jié)果，由于肌酐檢測(cè)有不同的方法，不同的檢測(cè)方法測(cè)定同一份標(biāo)本時(shí)，方法學(xué)之間存在變異，測(cè)定的結(jié)果并不一致[5]。因此，應(yīng)該對(duì)不同的方法建立不同的參考范圍，對(duì)兩種不同的方法進(jìn)行比對(duì)校正，給臨床提供準(zhǔn)確性一致的報(bào)告。

[1]張東玲.肌酐測(cè)定的方法學(xué)進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,27(6):521-523.

[2]張建平,王治國(guó).肌酐檢測(cè)的準(zhǔn)確性問(wèn)題研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,29(6):501-503.

[3]武 強(qiáng),王龍武,申春梅.肌氨酸氧化酶法測(cè)定健康成人血清肌酐參考值的建立[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,24(1):69-70.

[4]徐國(guó)賓,李志艷.應(yīng)重視實(shí)驗(yàn)室檢查在慢性腎病早期診斷中的應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,29(11):961-965.

[5]張建平,王治國(guó).肌酐檢測(cè)的準(zhǔn)確性問(wèn)題研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,29(6):501-503.