復方中藥制劑對人工感染腎型IBV的蛋雛雞血清免疫球蛋白的影響的研究

賈 丹，陳書明，王志強，賀毅鑫

（1.北京農(nóng)學院，北京 102206；2.山西農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山西 太谷 030801）

雞傳染性支氣管炎（IB）是由雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）引起的雞的一種急性，高度接觸傳染的呼吸道疾病。本病以呼吸道癥狀、腎臟病變、腸道損害、產(chǎn)蛋下降為主要特征。該病的廣泛流行給養(yǎng)雞業(yè)帶來嚴重危害。目前，在藥物治療和疫苗免疫方面均無有效方法，而中草藥在藥物研究和應(yīng)用上具有多效性、雙向調(diào)節(jié)和適應(yīng)性作用等優(yōu)勢。許多滋陰、補血、益氣、助陽的中草藥物均能提高機體的免疫功能，對動物機體體液免疫、細胞免疫及非特異性免疫功能均有一定的促進作用。

本實驗中藥復方含有保肝護腎的熟地、山茱萸、茵陳，抗菌抗病毒的板藍根、甘草，以及提高機體免疫功能的各種藥物。本實驗通過研究此復方中藥對感染腎型傳染性支氣管炎雛雞血清球蛋白的影響，以期為中藥復方治療禽病毒性疾病提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

1日齡健康海蘭褐蛋雛雞400羽，購自山西省太谷縣韓村種雞場。

1.1.2 傳染性支氣管炎病毒

IBV標準T株，購自中國獸藥監(jiān)察所。

1.1.3 實驗藥品

中藥復方（方劑由熟地、山茱萸、板藍根、茵陳、甘草等組成），采用傳統(tǒng)中藥煎煮方法將中草藥制成水煎液，并濃縮成1 g/mL，作為實驗藥劑。由山西偉業(yè)生物技術(shù)有限責任公司提供。病毒靈、電解多維、安腎靈。

1.1.4 主要儀器

酶標儀、漩渦振蕩器、電熱鼓風干燥箱、自動雙重純水蒸餾器、手提式滅菌器、超低溫冰箱、生物潔凈工作臺、微量可調(diào)移液器等。

1.2 試驗方法

1.2.1 IBV抗體測定（雙向瓊擴試驗）

將雛雞飼養(yǎng)至18日齡時，每組隨機取5羽，心臟采血，離心，取血清進行IBV抗體檢測。

1.2.2 動物分組及處理

在雛雞21日齡時挑選360羽健康、體重均勻的雛雞，隨機分成6組，每組60羽，分別是空白對照組、攻毒對照組、復方中藥高劑量組、中劑量組、低劑量組、西藥治療組。除空白組外，其余組當天氣管攻毒（0.2 mL/羽）。攻毒后48 h～72 h在多數(shù)出現(xiàn)臨床癥狀后飲水給藥，每日2次，連續(xù)給藥6天。高、中、低劑量組以及西藥治療組的給藥劑量分別為1.5%，1.0%，0.5%，1g/L。

1.2.3 樣本的采集與處理

分別于給藥后 3、6、9、14、19 d 時，每組隨機取雞 5 羽，無菌心臟采血，用肝素鈉抗凝。

1.2.4 血清中IgG、IgA、IgM的測定

按免疫球蛋白試劑盒說明操作。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

測定結(jié)果以“平均數(shù)±標準差”表示，用SPSS12.0進行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 各組雞血清IgG含量測定結(jié)果

見表1，統(tǒng)計結(jié)果顯示，血清IgG含量，攻毒對照組在給藥后3 d、6 d、9 d高于空白對照組，在給藥后14 d、19 d低于空白對照組，但差異都不顯著（P＞0.05）。給藥后 3 d、6 d、9 d、14 d 各治療組與攻毒對照組血清IgG含量差異顯著（P＜0.05），給藥后19 d高劑量組和攻毒對照組差異顯著（P＜0.05）。給藥后3 d，高、低劑量組之間差異顯著（P＜0.05）；給藥后6 d高、低劑量組和西藥組差異顯著（P＜0.05），中、低劑量組之間差異顯著（P＜0.05）；給藥后9 d高、中劑量組與低劑量組差異顯著（P＜0.05）；給藥后14 d高、中劑量組與低劑量組和西藥組差異顯著（P＜0.05）；給藥后19 d高劑量組與其它治療組差異顯著（P＜0.05）。

2.2 各組雞血清IgA含量測定結(jié)果

見表2，統(tǒng)計結(jié)果顯示，攻毒對照組與空白對照組在給藥后6 d血清IgA含量差異顯著（P＜0.05）。給藥后3 d、9 d、14 d各治療組與攻毒對照組血清IgA含量差異顯著（P＜0.05），給藥后6 d、19 d高劑量治療組與攻毒對照組差異顯著（P＜0.05）。給藥后3 d各治療組之間差異不顯著（P＞0.05）；給藥后6d高劑量組與低劑量治療組和西藥治療組差異顯著（P＜0.05）；給藥后9 d、14 d高劑量治療組與低劑量治療組和西藥治療組差異顯著（P＜0.05）；給藥后19 d高劑量組與低劑量組和西藥治療組差異顯著（P＜0.05）。

表1 各組雞血清IgG含量測定值（單位：g/L）

表2 各組雞血清IgA含量測定值（單位：g/L）

表3 各組雞血清IgM含量測定值（單位：g/L）

2.3 各組雞血清IgM含量測定結(jié)果

見表3，統(tǒng)計結(jié)果顯示，攻毒對照組除了在給藥后19 d血清IgM含量低于空白組，其它時間均高，但差異不顯著（P＞0.05）。給藥后3 d、6 d、9 d、14 d各治療組與攻毒治療組血清IgM含量差異顯著（P＜0.05），給藥后19 d高劑量治療組與攻毒對照組之間差異顯著（P＜0.05）。給藥后3 d高劑量組與低劑量組差異顯著（P＜0.05）；給藥后6 d、9 d高劑量治療組與低劑量組和西藥治療組差異顯著（P＜0.05）；給藥后14 d高劑量組與低劑量組和西藥治療組差異顯著（P＜0.05）；給藥后19 d高劑量組與低劑量治療組和西藥治療組差異顯著（P＜0.05）。

3 討論與結(jié)果

復方中藥制劑對人工感染腎型傳染性支氣管炎病毒雛雞外周血免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）的影響血清中IgG、IgA、IgM的含量是機體免疫器官組織中的體液免疫活性細胞產(chǎn)生的體液免疫分子，在血液中的體現(xiàn)，是體液免疫系統(tǒng)功能狀態(tài)的重要指標[9]。

本實驗結(jié)果顯示，攻毒對照組免疫球蛋白含量高于空白對照組，其中，IgA含量在給藥后6 d與空白對照組差異顯著（P＜0.05）。IgG含量除給藥后19d各治療組與攻毒對照組差異顯著（P＜0.05），高、中劑量組之間差異不顯著（P＞0.05），但高劑量組高于中劑量組，高劑量組與低劑量組和西藥組在給藥后6 d、14 d差異顯著（P＜0.05），中、低劑量組與西藥組差異不顯著（P＞0.05）。IgA含量各治療組都高于攻毒對照組；高、中劑量組差異不顯著（P＞0.05），高劑量組與低劑量組和西藥組在給藥后6 d、9 d、14 d差異顯著（P＜0.05），中、低劑量組與西藥組差異不顯著（P＞0.05）。IgM含量除給藥后19 d各治療組與攻毒對照組差異顯著（P＜0.05）；各治療組之間在給藥后3 d差異不顯著，隨后高劑量組與低劑量組和西藥組差異顯著（P＜0.05），中、低劑量組和西藥組差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)果表明，實驗中藥復方可以促進機體免疫球蛋白含量增加，提高攻毒機體的體液免疫功能，高、中劑量治療組效果優(yōu)于低劑量組和西藥治療組。

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