中藥復(fù)方口服液體外抗雞新城疫病毒的試驗(yàn)研究

周廣生 江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇泰州 225300

新城疫(ND)作為禽類(lèi)重要疫病之一,從發(fā)現(xiàn)至今已有80多年的歷程,給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)不可估量的經(jīng)濟(jì)損失，因而人們對(duì)ND的預(yù)防、控制、撲滅采取了大量的措施，但其仍然給集約化養(yǎng)殖帶來(lái)威助。雞新城疫發(fā)病后，抗生素、磺胺類(lèi)藥物無(wú)治療作用。為了探討中藥抗雞新城疫病毒的作用，我們依據(jù)中獸醫(yī)的辯證施治理論，對(duì)中藥進(jìn)行篩選，選出了以貫葉連翹、香薷兩味中藥的方劑，進(jìn)行抗雞新城疫病毒的體外實(shí)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)雞胚：10日齡非免雞胚，購(gòu)自南京藥械廠。

1.1.2 雞新城疫毒株：由江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)教研室提供，雞胚尿囊液的HA效價(jià)為8log2。

1.1.3 藥品：中藥復(fù)方制劑由貫葉連翹、香薷組成，制成含生藥2g/ml的口服液，所用中藥購(gòu)自泰州仁濟(jì)中藥飲片有限公司；金剛烷胺，由江蘇倍康藥業(yè)公司提供，配成0.2mg/ml濃度，滅菌后備用。

1.2 試驗(yàn)分組：10日齡雞胚60個(gè)，隨機(jī)分為4組。

具體分組情況見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)分組情況

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 測(cè)定半數(shù)致死量：將尿囊液稀釋不同倍數(shù)，接種非免雞胚，得出胚胎半數(shù)致死量。經(jīng)過(guò)測(cè)定，尿囊液半數(shù)致死量的稀釋度為1:1000，正式試驗(yàn)的接種稀釋度用1:500的尿囊液。

1.3.2 藥物毒性試驗(yàn)：將中藥原藥液用生理鹽水作倍比稀釋?zhuān)瑢⒃幰杭安煌瑵舛鹊乃幰悍謩e接種于4枚10日齡雞胚的尿囊腔中，每只0.2m L，置37℃恒溫箱孵育72小時(shí)，每天觀察存活情況，雞胚全部存活的最高藥物濃度為正式試驗(yàn)的起始濃度。同時(shí)設(shè)生理鹽水對(duì)照組。

1.3.3 中藥復(fù)方口服液對(duì)雞新城疫病毒增殖的抑制作用測(cè)定：按1.3.1尿囊液的稀釋度和表2的藥物濃度做為接種的依據(jù)。

1.3.3.1 中藥組：每個(gè)雞胚尿囊腔同時(shí)接種中藥0.2m L，病毒稀釋液 0.1m L。

1.3.3.2 西藥組：每個(gè)雞胚尿囊腔同時(shí)接西藥0.2m L，病毒稀釋液0.1m L。

1.3.3.3 生理鹽水對(duì)照組：每個(gè)雞胚尿囊腔同時(shí)接種生理鹽水0.2m L，病毒稀釋液0.1m L。

上述雞胚在37℃恒溫箱中孵育，每天照蛋2～3次，棄去24小時(shí)內(nèi)死胚。收取72小時(shí)內(nèi)活胚和24～72小時(shí)死胚尿囊液，低溫保存?zhèn)溆?。以血凝（HA）試驗(yàn)檢測(cè)每組雞胚尿囊液的病毒滴度。

2 結(jié)果

2.1 藥物毒性實(shí)驗(yàn)：經(jīng)過(guò)2次重復(fù)試驗(yàn)，中藥復(fù)方制劑的原藥液及其不同稀釋度均對(duì)雞胚無(wú)明顯致死作用。其存活情況見(jiàn)表2。故用原液濃度為正式試驗(yàn)的起始濃度。

表2 藥物對(duì)雞胚毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=4）

2.2 中藥復(fù)方制劑對(duì)雞新城疫病毒增殖的影響，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 中藥復(fù)方制劑對(duì)雞新城疫病毒增殖的抑制作用測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 雞新城疫是由新城疫病毒感染引起的傳染病，由于疫苗的廣泛應(yīng)用，使該病多以慢性或散發(fā)為特點(diǎn)。雞新城疫發(fā)病以后，目前還無(wú)有效療法。用中藥治療畜禽病毒性疾病，已有很多成功經(jīng)驗(yàn)，本試驗(yàn)就是為臨床治療雞新城疫提供理論依據(jù)。

3.2 中藥復(fù)方制劑能明顯抑制雞新城疫病毒增殖，降低雞胚死亡率。分析中藥配方的作用，貫葉連翹具有抗抑郁、抗病毒、鎮(zhèn)痛等作用。香薷具有發(fā)汗解表，利水消腫的作用。中藥復(fù)方制劑的效果明顯高于金剛烷胺。

3.3 本試驗(yàn)對(duì)中藥復(fù)方制劑在雞胚內(nèi)抗雞新城疫病毒的效果進(jìn)行了觀察，在動(dòng)物上的效果如何以及作用機(jī)理有待進(jìn)一步的試驗(yàn)研究。

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