魚腥草提取物體外抑菌實(shí)驗(yàn)研究

王文紅

（江西省腫瘤醫(yī)院 南昌330029）

魚腥草(Houttuynia cordata Thunb)屬三白草科(saurura-cese)蕺菜屬(Houttuynia)野生草本植物，其莖葉搓碎后有魚腥味，故名魚腥草[1、2]。魚腥草分布在長江以南及西藏等省區(qū)，尤以四川、湖北、湖南、江蘇等省居多,常生長于海拔300～2 600m的背陽山地、林邊、路旁、田埂及洼地草叢中。魚腥草資源豐富，具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋的功效，其制劑在醫(yī)療上廣泛用于感染性疾病的治療。魚腥草的主要活性成分為揮發(fā)油和黃酮類化合物，國內(nèi)外關(guān)于魚腥草的研究很多，但主要集中在揮發(fā)油部位。由于揮發(fā)性成分制備的制劑存在應(yīng)用障礙，研究魚腥草非揮發(fā)性成分的抗菌藥效作用具有實(shí)質(zhì)意義。本研究利用魚腥草不同的提取物進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，用幾種微生物接種，進(jìn)行抑菌作用研究，以期了解魚腥草提取物抗感染效果。

1 資料與方法

1.1 供試菌種 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，大腸桿菌 (Escherichia coli)，肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)，均由江西省臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.2 方法

1.2.1 藥液配制 將魚腥草通過水提取法得到提取液后，超濾純化、濃縮成較濃的水提液。另外通過水蒸氣提取器收集到揮發(fā)油的飽和溶液。利用已經(jīng)處理好的水提液及揮發(fā)油飽和溶液制成生藥量相同兩種樣品供藥理實(shí)驗(yàn)，兩種樣品分別是魚腥草總提取物（揮發(fā)油和水提物混合）、魚腥草揮發(fā)油飽和水溶液。

1.2.2 菌液配制 取一標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)分純的二次傳代的試驗(yàn)細(xì)菌，接種于1mL的培養(yǎng)基中。（1）金黃色葡萄球菌、大腸桿菌在1mL的普通肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)6h，菌液濃度相當(dāng)于9億個(gè)/mL，再用普通肉湯培養(yǎng)基作1:1 000稀釋供用；（2）肺炎鏈球菌在1mL的10%血清肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)18h，菌液濃度相當(dāng)于3億個(gè)/mL，再用10%血清肉湯培養(yǎng)基作1:10稀釋供用。

1.2.3 試驗(yàn)步驟 采用液體培養(yǎng)基試管稀釋法[3、4]。（1）取滅菌的試管10支置于試管架上，再以無菌操作每管加液體培養(yǎng)基1mL；（2）無菌操作吸取抗菌藥物1mL，放入第1管中，混勻后吸取1mL放入第2管中，混勻后吸取1mL放入第3管中，如此作逐管倍量稀釋到第9管，混勻后吸取1mL棄去，第10管不加抗菌藥物作菌液對照；（3）每管加入被檢菌液各0.1mL，但第9管不加菌液作藥物對照；（4）置37℃溫箱中培養(yǎng)18～24h后，轉(zhuǎn)種到相應(yīng)的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果。肉眼觀察，含最小量但轉(zhuǎn)種于固體培養(yǎng)基上不生長細(xì)菌的試管所含抗菌藥物的濃度為最小抑菌濃度（MIC）。

2 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果顯示魚腥草總提取物（揮發(fā)油和水提物混合）對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎鏈球菌的體外抗菌試驗(yàn)的最小抑菌濃度依次為1/16、1/8、1/16，抑菌效果優(yōu)于魚腥草揮發(fā)油飽和水溶液。見表1。

表1 體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 討論

魚腥草中醫(yī)應(yīng)用歷史悠久，藥理作用廣泛，對魚腥草在抗菌消炎、抗病毒、治療呼吸系統(tǒng)疾病、消炎解毒等方面的研究表明其在臨床應(yīng)用上前景廣闊，開發(fā)利用潛力很大。但目前使用揮發(fā)油作為有效成分的制劑在臨床應(yīng)用中碰到困難，國家食品藥品監(jiān)督管理局決定自2006年6月1日起，在全國范圍內(nèi)暫停使用魚腥草注射液等7個(gè)注射劑，暫停受理和審批魚腥草注射液等7個(gè)注射劑的各類注冊申請[5]。為了充分利用好魚腥草資源，除了對揮發(fā)油部分的研究比較深入細(xì)致外，還需對其他部位如水溶性成分系統(tǒng)深入的研究。據(jù)資料，魚腥草揮發(fā)油部分對金黃色葡萄球菌、流感桿菌、卡他球菌、肺炎球菌、大腸桿菌、痢疾桿菌均有較強(qiáng)的抑制作用[6]。本實(shí)驗(yàn)研究顯示，魚腥草總提取物（水提物和揮發(fā)油）在抑菌效果方面優(yōu)于揮發(fā)油，為魚腥草的進(jìn)一步開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

[1]中國科學(xué)院植物研究所.高等植物圖鑒(第一冊)[M].北京：科學(xué)出版社,1972.340

[2]馬林,吳豐,陳若蕓.三白草科植物化學(xué)及生物活性研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志,2003,28(3)：196-198

[3]廖德勝,王敬勉,趙家振,等.魚腥草黃酮的制備及其應(yīng)用研究[J].中國食品添加劑,2002(2)：81-83

[4]戴偉鋒,楊國榮,周強(qiáng),等.魚腥草中總黃酮提取工藝考察[J].云南化工,2006,33（1）：11-14

[5]關(guān)于魚腥草注射液等7個(gè)注射劑有關(guān)處理決定的通知[J].中國醫(yī)藥技術(shù)與市場,2006,6（5）：12-13

[6]全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編(上冊)[M].北京：人民出版社,1978.553-554