牛病毒性腹瀉病毒感染對豬瘟免疫的影響

張慧英

（上海市松江區(qū)食用農(nóng)產(chǎn)品安全監(jiān)督檢測中心，上海 松江 201611）

牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）和豬瘟病毒（CSFV）同屬黃病毒科瘟病毒屬成員。BVDV除侵害牛引起牛病毒性腹瀉、急性或慢性黏膜病、免疫耐受和持續(xù)性感染、免疫抑制和母畜流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎外，還可感染豬、綿羊、山羊以及其他反芻動物。豬感染BVDV不表現(xiàn)牛病毒性腹瀉的臨床癥狀而呈亞臨床感染，其癥狀和病理變化類似溫和型豬瘟，并可產(chǎn)生豬瘟病毒的交叉中和抗體，這給常規(guī)的血清學診斷帶來一定困難，同時豬感染BVDV產(chǎn)生的抗BVDV抗體對豬瘟病毒有一定的抑制作用，因此豬感染BVDV后對豬瘟疫苗的免疫有干擾作用，會降低豬瘟疫苗的免疫效果。為了解本地區(qū)豬源牛病毒性腹瀉病毒的感染狀況及其對豬瘟免疫豬體內(nèi)抗體水平的影響，我們進行了本次調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清 來自本區(qū)域13個鎮(zhèn)（街道）9個規(guī)?；i場、60戶散戶的368份豬瘟免疫豬血清樣本。

1.1.2 檢測試劑 美國IDEXX牛病毒性腹瀉病病毒抗原檢測試劑盒和豬瘟病毒抗體檢測試劑盒均購于北京愛德士元亨生物科技有限公司，批號分別為43810-Q381、43220-R941。豬瘟正向間接血凝診斷液、標準陽性血清、標準陰性血清及稀釋液均為中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號：081201。

1.2 方法 牛病毒性腹瀉病病毒抗原檢測及豬瘟病毒抗體檢測參照試劑盒操作說明書進行；豬瘟免疫抗體檢測采用正向間接血凝試驗的方法。

2 結果

2.1 368份被檢豬血清樣品中，牛病毒性腹瀉病病毒抗原檢測結果呈陽性的有7份，陰性有361份，總檢出率1.90%，詳見表1、表2。

表1 牛病毒性腹瀉病病毒抗原檢測結果

表2 牛病毒性腹瀉感染分類匯總表

2.2 牛病毒性腹瀉病病毒抗原檢測呈陽性的7份豬血清經(jīng)美國IDEXX豬瘟病毒抗體檢測，結果有3份呈陽性，4份呈陰性。經(jīng)豬瘟IHA檢測（根據(jù)上海市豬瘟免疫抗體效價≥1∶64為判定合格標準）其中4份合格，3份不合格，結果詳見表3。兩種方法的檢測結果符合率為71%。

表3 豬瘟抗體檢測結果

3 分析與討論

3.1 對于畜群BVDV感染可通過單克隆抗體ELISA技術、RT-PCR法等進行診斷，但目前國內(nèi)對畜群中BVDV感染方面的研究相對較少。王新平等對內(nèi)蒙古、吉林、寧夏等不同地區(qū)的牛、羊、鹿進行了病原學調(diào)查,結果發(fā)現(xiàn)感染率分別為16.5%～89.0%、14.6%～83.3%、19.6%～44.4%。吳文輝等對2007年1月～2008年12月期間上海市各區(qū)縣送檢的184份豬場樣品進行BVDV ELISA法檢測，其檢出率高達50%。本次調(diào)查區(qū)域的368份豬血清樣品中，牛病毒性腹瀉病毒感染率為1.90%，相對而言感染率較低，其中規(guī)模場的感染率2.47%，散養(yǎng)豬感染率1.46%。通過已有的報道可知，在我國畜群中BVDV感染情況已比較普遍，應引起獸醫(yī)工作者的重視。

3.2 由于CSFV和BVDV同屬黃病毒科瘟病毒屬，兩者在病毒粒子結構、基因組結構和抗原特性等方面均很接近，在免疫學上存在廣泛的交叉性。CSFV和BVDV能在豬體和牛體之間交互感染。Fernelius等（1973）首次從自然感染發(fā)病的豬體內(nèi)分離到BVDV，從而在病原學上證明BVDV可以自然感染豬。豬感染BVDV后可能不表現(xiàn)出臨床癥狀，呈持續(xù)性感染，以溫和型、母豬繁殖障礙及新生仔豬死亡的豬瘟為多見，且常發(fā)生于“免疫”豬群。目前出現(xiàn)的這種非典型或溫和型豬瘟與豬BVDV感染，單憑臨床癥狀、病理變化及常規(guī)的血清學方法是難以鑒別的，這給豬病的診斷和防治帶來新的難題。

3.3 對豬瘟免疫抗體效價的測定有多種方法，常見的有ELISA法和IHA法。ELISA法是針對豬瘟結構蛋白E2（不含BVDV基因片段）建立的血清學抗體檢測方法，能區(qū)分出BVDV、CSFV抗體，特異性強，但成本高；IHA法成本低，但無法區(qū)分兩種抗體。本次試驗對7份BVDV陽性豬血清分別采用ELISA法和IHA法來檢測豬瘟免疫抗體，結果符合率為71%,說明常用的兩種方法在豬瘟免疫抗體檢測中可能存在誤判的問題，采用何種更合理的抗體檢測方法有待進一步探討。

3.4 對豬瘟免疫失敗原因的探討，除了從免疫程序、疫苗質(zhì)量、免疫劑量、病毒變異等方面去分析外，BVDV的感染問題也應引起人們的重視。持續(xù)感染的豬在接種豬瘟疫苗后往往表現(xiàn)出免疫無應答狀態(tài)，導致免疫失敗，免疫率低下。目前認為牛是豬感染BVDV的主要傳播來源，尤其是BVDV感染耐過牛已形成免疫耐受，可終生向外界排出大量感染性病毒。如給豬喂乳清和牛奶，豬與牛病毒性腹瀉病毒牛接觸，人員和工具流動往來于豬場和牛場之間等，均可造成豬群感染牛病毒性腹瀉病毒。另外，使用污染的牛組織制造的生物制品或直接被BVDV污染的疫苗，都存在著BVDV感染的可能。Wensvoort等（1988）曾報道，荷蘭使用有BVDV污染的疫苗而引起仔豬BVDV的先天性感染，并出現(xiàn)了類似豬瘟的癥狀。因此,在疫苗生產(chǎn)過程中應加強血清及其相關制品、所用細胞系BVDV的檢測，以防止疫苗污染造成損失；同時豬場應該禁止用牛奶或牛廢棄物等作為豬的飼料添加劑。通過檢測淘汰帶毒豬,嚴禁豬與牛接觸或混養(yǎng),選擇無BVDV污染風險的豬瘟疫苗免疫等措施可以預防和控制豬群的BVDV感染。

[1]王新平，涂長春，李紅衛(wèi)，等.從豬瘟病料中檢出牛病毒性腹瀉病毒[J].中國獸醫(yī)學報，1996，（4）：341-345.

[2]吳文輝，余紅梅，劉婧怡.對生豬感染BVDV的實驗檢測[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2009，（4）：25.

[3]Fernelius A L，AmtowerW C，Malmquist W A，et al.Bovine viral diarrhea virus in swine:chracteristics of virus recovered from naturally and experimentally infected swine[J].Can J Comp Med.，1973，37：96-102.

[4]Wensvoort G，Terpstra C.Bovine viral diarrhea virus infection in piglets born to sow vaccinated against swine fever with a contaminated vaccine[J].Res Vet Sci.，1988，45：143-148.