氣相色譜法測(cè)定陳皮中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量

高新花 李延團(tuán) 張鳳梅 鄭爽爽

(1.中國(guó)海洋大學(xué) 山東青島 266003; 2.山東省煙臺(tái)哈博生物技術(shù)有限公司 山東煙臺(tái) 264006)

在全球的草藥銷售額中,我國(guó)中藥出口份額僅占5%左右,這與我國(guó)中醫(yī)藥大國(guó)的地位極不相稱[1]。其中的首要因素應(yīng)該是藥品質(zhì)量,而農(nóng)藥殘留和重金屬污染則是影響藥品質(zhì)量的重要因素[2]。歐美等許多國(guó)家對(duì)傳統(tǒng)藥和草藥制定了非常嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)[3]。中藥農(nóng)藥殘留問題是中藥出口的瓶頸,必須制定出相應(yīng)的限量標(biāo)準(zhǔn)。陳皮作為一種常用藥材,國(guó)際國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的需求量很大。然而在橘(陳皮為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥成熟果皮)的種植過程中,為了防治病蟲害,有機(jī)磷農(nóng)藥的使用較普遍,因此由有機(jī)磷農(nóng)藥殘留引起的污染不容忽視,本實(shí)驗(yàn)采用毛細(xì)管氣相色譜法對(duì)不同產(chǎn)地陳皮中的14種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行了含量測(cè)定,操作簡(jiǎn)便,重現(xiàn)性好,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

GC6890N型氣相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司);FPD檢測(cè)器;HP-5毛細(xì)管色譜柱(30m×0.32mm×0.25μm);METTLERTOLEDO AL104電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);低噪音空氣泵SGK-2LB(北京精華苑技術(shù)研究所);SGH-300高純氫氣發(fā)生器(北京精華苑技術(shù)研究所);DS-1高速組織搗碎機(jī)(上海標(biāo)本模型廠);WH-866渦旋混合器(江蘇太倉(cāng)科教儀器廠)。

試劑:有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)混合溶液儲(chǔ)備液(pg.mL-1):敵敵畏(1.96),甲胺磷(1.02),甲拌磷(2.00),樂果(2.00),敵殺磷(4.00),二嗪磷(3.47),甲基立枯磷(2.00),甲基對(duì)硫磷(2.04),馬拉硫磷(6.00),對(duì)硫磷(2.00),水胺硫磷(2.00),殺撲磷(3.43),丙溴磷(3.20),三唑磷(4.00)(以上標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自Dr.Ehrenstorfer GmbH);丙酮(重蒸分析純,煙臺(tái)三和化學(xué)試劑有限公司);乙腈(分析純,天津市博迪化工有限公司);氯化鈉(140℃烘烤4h);水為蒸餾水。陳皮藥材為主產(chǎn)地收集及安國(guó)市售商品藥材。

表1 14種有機(jī)磷農(nóng)藥的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢測(cè)限

圖1 14種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱選擇HP-5毛細(xì)管色譜柱(30m×0.32mm×0.25μm)。柱溫采用程序升溫,初溫50℃,保持1min,然后以20℃/min升至140℃,再以13℃/min升至250℃,保持10min;進(jìn)樣口溫度220℃,檢測(cè)器溫度250℃;載氣為高純氮(純度>99.999%),流量:3.0mL/min;氫 氣(純 度 >99.999% )流 量 :75mL/min;空 氣 流 量 :100mL/min;不分流進(jìn)樣。

2.2 供試品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取陳皮樣品于60℃干燥4h,準(zhǔn)確稱重計(jì)算樣品含水量。將干燥過的樣品粉碎過20目篩,準(zhǔn)確稱取5.000g粉末于100mL具塞錐形瓶中,準(zhǔn)確加水20mL浸泡過夜。將浸泡過夜的樣品倒入勻漿機(jī)中,加入50mL乙腈,高速勻漿2min(12000r/min)后用濾紙過濾,收集濾液至裝有5g氯化鈉的100mL具塞量筒中,蓋上塞子,劇烈振蕩1min,靜置15min,使乙腈相和水相充分分層,準(zhǔn)確吸取10.0mL乙腈溶液,轉(zhuǎn)入15mL的刻度離心管中,緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)?蒸發(fā)近干,最后用丙酮溶解并準(zhǔn)確定容至5.0mL,并在渦旋混合器上混勻,作為供試品溶液待測(cè)。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取一定量的有機(jī)磷混標(biāo)溶液,用丙酮分別稀釋成2,4,6,8,10倍的混標(biāo)溶液,按“2.1”中的分析條件進(jìn)行測(cè)定,以含量(μg/mL)為橫坐標(biāo)(X),峰面積為縱坐標(biāo)(Y),繪制14種有機(jī)磷的標(biāo)準(zhǔn)曲線,并確定最低檢測(cè)限,見表1。相關(guān)系數(shù)為0.9989～0.9999,以3倍信噪比計(jì)算,最低檢測(cè)限為0.003～0.02mg.kg-1。結(jié)果表明,各農(nóng)藥的質(zhì)量濃度(X)與峰面積(Y)呈良好的線性關(guān)系。14種有機(jī)磷農(nóng)藥的氣相色譜圖見圖1。

2.4 回收率試驗(yàn)

在陳皮中添加14種有機(jī)磷農(nóng)藥3個(gè)含量水平,3個(gè)含量水平儲(chǔ)備溶液稀釋2,5,10倍的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,每個(gè)含量水平重復(fù)3次,按照“2.2”提取、凈化方法和“2.1”的檢測(cè)條件,計(jì)算加樣回收率,平均回收率分別為敵敵畏(86.7%),甲胺磷(84.6%),甲拌磷(84.8%)樂果(84.2%),敵殺磷(84.4%),二嗪磷(89.4%),甲級(jí)對(duì)硫磷(97.4%),甲級(jí)立枯磷(85.0%),馬拉硫磷(93.5%),對(duì)硫磷(90.1%),水胺硫磷(84.8%),殺撲磷(92.5%),丙溴磷(91.3%),三唑磷(87.7%)。符合多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分析要求。

2.5 樣品測(cè)定

依照上述實(shí)驗(yàn)方法對(duì)主產(chǎn)地收集及安國(guó)市售陳皮藥材的10個(gè)批次的樣品進(jìn)行分析,結(jié)果見表2。經(jīng)過對(duì)10批陳皮藥材的檢測(cè),有3個(gè)批次檢出有機(jī)磷殘留(表2),其余7個(gè)批次未檢出。14種有機(jī)磷農(nóng)藥有10種未檢出,檢出的4種為馬拉硫磷、水胺硫磷、丙溴磷和三唑磷。

表2 3個(gè)批次陳皮中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留(mg.kg-1)

3 結(jié)語(yǔ)

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出使用HP-5毛細(xì)管柱在上述條件下對(duì)中草藥中14種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行分析,使14種化合物達(dá)到很好的分離。方法最低檢測(cè)限為0.003～0.02mg.kg-1,加樣回收率84.2%～97.4%,本實(shí)驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)單,靈敏度高,分離效果好,且能夠節(jié)約大量時(shí)間和有機(jī)溶劑,適合大批量樣品農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。

[1]薛健,楊世林,陳建明,等.我國(guó)中藥材農(nóng)藥殘留污染現(xiàn)狀與對(duì)策[J].中國(guó)中藥雜志,2001,26(9):637.

[2]陳建存.輸美中成藥重金屬/化學(xué)品污染及違反FDA規(guī)定情況[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2000,7(8):90.

[3]何迎春,吳新正.我國(guó)中藥材農(nóng)藥污染狀況研究[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,15(3):41.