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    豆醬生產(chǎn)中HACCP體系的應(yīng)用效果評(píng)價(jià)*

    2010-06-04 05:12:14張景亮江連洲韓翠萍王鵬
    大豆科技 2010年1期
    關(guān)鍵詞:體系產(chǎn)品

    張景亮江連洲**韓翠萍王鵬

    (1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué),哈爾濱150030;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)綏化學(xué)院,綏化152000)

    豆醬是我國(guó)的傳統(tǒng)調(diào)味品,深受消費(fèi)者喜愛(ài),在國(guó)內(nèi)有著廣闊的市場(chǎng)前景和生產(chǎn)價(jià)值。但長(zhǎng)期以來(lái)我國(guó)制醬企業(yè)在生產(chǎn)中仍存在自動(dòng)化程度低、設(shè)備簡(jiǎn)陋、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)重滯后,產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定,衛(wèi)生狀況堪憂(yōu)等問(wèn)題[1]。HACCP(Hazard Analysis and Critical Control Point,即危害分析與關(guān)鍵控制點(diǎn))是目前國(guó)際上廣泛認(rèn)可的最具有權(quán)威性的食品安全質(zhì)量保證體系,可充分保障“從田野到餐桌”的全過(guò)程食品鏈的食品安全[2]。HACCP方法是國(guó)際上公認(rèn)的控制由食品引起疾患的最有效方法。為了與國(guó)際接軌并進(jìn)一步提高我國(guó)豆醬產(chǎn)品的質(zhì)量,提高制醬企業(yè)的質(zhì)量管理水平,提升產(chǎn)品市場(chǎng)準(zhǔn)入程度,增強(qiáng)企業(yè)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,在豆醬生產(chǎn)中應(yīng)用HACCP體系具有重要的戰(zhàn)略意義[3]。

    本實(shí)驗(yàn)選擇了哈市一家豆醬加工廠作為研究試點(diǎn)單位,該企業(yè)于2006年6月建立HACCP體系并試運(yùn)行,在HACCP體系監(jiān)控下生產(chǎn)的豆醬產(chǎn)品于2007年1月份投放市場(chǎng)。通過(guò)對(duì)HACCP體系實(shí)施前后該廠生產(chǎn)的醬醅及豆醬產(chǎn)品的理化指標(biāo)和微生物指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),分析HACCP體系在豆醬生產(chǎn)中的重要作用,為工業(yè)生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 樣品的采集

    試點(diǎn)單位的產(chǎn)品均采用機(jī)械化生產(chǎn),保質(zhì)期18個(gè)月,生產(chǎn)條件符合《食品企業(yè)通用衛(wèi)生規(guī)范》的要求。試驗(yàn)每月15號(hào)定期對(duì)醬醅及豆醬產(chǎn)品進(jìn)行采集。

    1.2 理化指標(biāo)的測(cè)定

    鹽分的測(cè)定:采用GB/T 12457-90的方法;pH值的測(cè)定:采用pH計(jì)直接測(cè)定;水分活度的測(cè)定:采用微量擴(kuò)散法。

    1.3 微生物檢驗(yàn)的樣品處理

    首先,在無(wú)菌條件下稱(chēng)取樣品25g,加入含0.1%(v/v)吐溫-80的滅菌生理鹽水225mL,搖勻后浸泡15min,稱(chēng)取該液體1mL加入試管中,再加入9mL滅菌生理鹽水,振蕩后在無(wú)菌操作臺(tái)上稀釋至10-7作為致病菌檢測(cè)和細(xì)菌計(jì)數(shù)的待測(cè)液。

    1.4 致病菌的測(cè)定

    大腸菌群測(cè)定:參照GB/T4789.3-2003;志賀氏菌檢驗(yàn):參照GB/T4789.5-2003;臘樣芽孢桿菌檢驗(yàn):參照GB/T 4789.14-2003;細(xì)菌總數(shù)測(cè)定:參照GB/T 4789.2-2003;沙門(mén)氏菌檢驗(yàn):參照GB/T 4789.4-2003;金黃色葡萄球菌檢驗(yàn):參照GB/T 4789.10-2003;肉毒梭菌檢驗(yàn):參照GB/T 4789.12-2003。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 實(shí)施HACCP體系前后豆醬產(chǎn)品理化指標(biāo)變化

    表1顯示的是HACCP體系實(shí)施前后部分樣品各項(xiàng)理化指標(biāo)的數(shù)值。參照國(guó)標(biāo)可知樣品的各項(xiàng)指標(biāo)均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),可見(jiàn)HACCP體系的實(shí)施對(duì)產(chǎn)品理化指標(biāo)的影響并不顯著。

    2.2 實(shí)施HACCP體系前后醬醅菌落總數(shù)的變化

    菌落總數(shù)是衡量豆醬產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標(biāo),它能夠客觀地反映HACCP體系的運(yùn)行效果。鹽水發(fā)酵后期,細(xì)菌會(huì)隨著鹽分的增加迅速死亡。故本實(shí)驗(yàn)僅針對(duì)微生物活動(dòng)最為旺盛的醬醅制作過(guò)程進(jìn)行分析。圖1表示的是醬醅在實(shí)施HACCP體系前后的菌落總數(shù)變化。由圖1可知:菌落總數(shù)的變化受溫度的影響較大,1月至7月菌落總數(shù)隨著溫度的升高逐漸增加,7月溫度最高,HACCP實(shí)施前后的樣品菌落總數(shù)均達(dá)到最高值(≥40000cfu/mL以上)。7月以后隨著溫度的下降,菌落總數(shù)呈下降趨勢(shì)。

    由圖1還可以看出,1月至7月雖然樣品的菌落總數(shù)都在升高,但同時(shí)期HACCP實(shí)施后的樣品菌落總數(shù)均低于實(shí)施前樣品的菌落總數(shù)。7月份由于溫度過(guò)高,細(xì)菌繁殖加快,體系對(duì)菌落總數(shù)的控制效果不太明顯。8月份以后,隨著溫度的降低,HACCP體系對(duì)菌落總數(shù)的控制效果明顯增強(qiáng),相同時(shí)期HACCP控制下的樣品比未控制樣品的菌落總數(shù)顯著降低。2007年9月的菌落總數(shù)已達(dá)到2006年12月的水平,10月以后菌落總數(shù)基本穩(wěn)定。體系的實(shí)施對(duì)菌落總數(shù)的控制效果較明顯,對(duì)產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量的提高起到了很大作用。

    表1 實(shí)施HACCP體系過(guò)程中各項(xiàng)理化指標(biāo)

    圖1 成品豆醬在實(shí)施HACCP體系前后的菌落總數(shù)變化

    2.3 實(shí)行HACCP體系前后醬醅中大腸菌群的變化

    大腸菌群一般只在醬醅發(fā)酵階段可以檢出,進(jìn)入鹽水發(fā)酵階段以后,環(huán)境不再利于大腸菌群的生長(zhǎng),大腸菌群的MPN值急劇減少,但是在醬醪中仍然存在一些小環(huán)境,大腸菌群可以繼續(xù)存活一段時(shí)間[4]。隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),醬醪逐漸趨于均勻,最終的豆醬產(chǎn)品中沒(méi)有大腸菌群的檢出,達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB2718-1996中的規(guī)定,所以控制醬醅的大腸菌群就可以有效地控制產(chǎn)品的大腸菌群。

    圖2表示的是HACCP體系建立前后醬醅中大腸菌群的變化。由圖2可知:HACCP體系實(shí)施前生產(chǎn)的醬醅產(chǎn)品污染較嚴(yán)重,大腸菌群全部高于國(guó)標(biāo)規(guī)定的30MPN/100mL,其中6月份醬醅大腸菌群達(dá)到了24000MPN/100mL以上。而在HACCP體系控制下的醬醅,7、8月份的產(chǎn)品大腸菌群數(shù)量略高于國(guó)標(biāo)但顯著低于HACCP體系實(shí)施前的產(chǎn)品,其他月份的醬醅產(chǎn)品全部達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。由此可知HACCP體系對(duì)于醬醅產(chǎn)品的控制效果較顯著。

    圖2 醬醅在實(shí)施HACCP體系前后的大腸菌群變化

    2.4 實(shí)行HACCP體系前后醬醅和豆醬產(chǎn)品中沙門(mén)氏菌的分析

    對(duì)實(shí)施HACCP體系前后的醬醅和豆醬樣品進(jìn)行增菌處理后,接種于選擇性瓊脂平板:亞硫酸鉍瓊脂(BS)和選擇性瓊脂培養(yǎng)基SS(Salmonella-Shigella)上,培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)體系實(shí)施前的醬醅中2月、3月和5月樣品中分離得到5株可疑菌株,將沙門(mén)氏菌的可疑菌落進(jìn)行生化試驗(yàn)和常規(guī)鑒定試驗(yàn),具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 4789.4-2003,經(jīng)過(guò)菌落形態(tài)觀察,革蘭氏染色觀察和生化試驗(yàn)證實(shí),可疑菌株中1、2、3號(hào)菌為沙門(mén)氏菌,4號(hào)和5號(hào)為大腸埃希氏菌。由此可見(jiàn),企業(yè)實(shí)施HACCP前沙門(mén)氏菌對(duì)醬醅產(chǎn)品的污染較為嚴(yán)重,實(shí)施HACCP之后的醬醅產(chǎn)品并無(wú)沙門(mén)氏菌的檢出,產(chǎn)品的質(zhì)量顯著提高。鹽水發(fā)酵階段的微生物環(huán)境并不適合沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng),所以在豆醬成品中并無(wú)沙門(mén)氏菌檢出。

    表2 沙門(mén)氏可疑菌株試驗(yàn)鑒定結(jié)果

    2.5 實(shí)行HACCP體系前后豆醬產(chǎn)品中蠟樣芽孢桿菌的分析

    將實(shí)施HACCP體系前后采集的樣品稀釋不同濃度,直接涂布在MYP培養(yǎng)基上,在HACCP實(shí)施前的醬醅樣品培養(yǎng)物中產(chǎn)生了粉紅色菌落,且有疑似蠟樣芽孢桿菌的可疑菌落。分別挑取做進(jìn)一步試驗(yàn)證實(shí),如下表3所示。由表3可以看出分離得到的5個(gè)可疑菌落中,4號(hào)和5號(hào)兩株菌為蠟樣芽孢桿菌,而且在平板中的數(shù)量很低,僅可達(dá)到103個(gè)數(shù)量級(jí)。在實(shí)施HACCP之后的樣品中無(wú)蠟樣芽孢桿菌檢出。

    表3 蠟樣芽孢桿菌的可疑菌株鑒定試驗(yàn)結(jié)果

    2.6 實(shí)行HACCP體系前后醬醅和豆醬產(chǎn)品中志賀氏菌的分析

    將含有待測(cè)樣品的志賀氏菌的革蘭氏陰性(GN)增菌液在選擇性瓊脂平板 (SS)和伊紅美蘭瓊脂(EMB)上劃線培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)可疑志賀氏菌菌落,挑取可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的生化試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)可以菌落并非志賀氏菌。所以,體系實(shí)施前后的醬醅和豆醬產(chǎn)品中均無(wú)志賀氏菌檢出。

    2.7 實(shí)行HACCP體系前后醬醅和豆醬產(chǎn)品金黃色葡萄球菌的分析

    將醬醅和豆醬的稀釋液經(jīng)過(guò)7.5%氯化鈉肉湯培養(yǎng)基的前期特異性增菌后,在Baird-Parker培養(yǎng)基上挑取淡灰色及有透明暈的金黃色葡萄球菌的可疑菌落,做進(jìn)一步的生化鑒定,發(fā)現(xiàn)豆醬生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)有金黃色葡萄球菌的存在,因此不需再進(jìn)行金黃色葡萄球菌毒素的檢測(cè)。

    2.8 實(shí)行HACCP體系前后醬醅和豆醬產(chǎn)品中肉毒梭菌分析

    根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,對(duì)實(shí)施HACCP體系前后的樣品進(jìn)行增菌產(chǎn)毒培養(yǎng)試驗(yàn),將樣品做了3種不同處理,接種物培養(yǎng)5d沒(méi)有生長(zhǎng),延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間10d后,仍然沒(méi)有生長(zhǎng)。接種卵黃瓊脂平板,分別在有氧和厭氧條件下培養(yǎng)后,沒(méi)有特征性菌落的出現(xiàn),因此認(rèn)為不存在肉毒梭菌。

    2.9 實(shí)行HACCP體系前后醬醅和豆醬產(chǎn)品中黃曲霉毒素分析

    分別取HACCP實(shí)施前后的醬醅和豆醬樣品,用酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)黃曲霉毒素B1。結(jié)果表明在HACCP實(shí)施前后的樣品中并無(wú)黃曲霉毒素檢出。

    3 結(jié)論

    豆醬在發(fā)酵過(guò)程中細(xì)菌總數(shù)始終保持在一個(gè)較高的數(shù)量級(jí),這其中有些是對(duì)發(fā)酵有益的,但是也存在一些對(duì)豆醬的風(fēng)味和衛(wèi)生質(zhì)量產(chǎn)生不良影響的細(xì)菌。通過(guò)上述檢測(cè)分析可以看出,試點(diǎn)單位實(shí)施HACCP體系前污染的主要致病菌為沙門(mén)氏菌和蠟樣芽孢桿菌,大腸桿菌嚴(yán)重超標(biāo)。而且這些致病菌主要集中在醬醅的制作階段,他們都屬于腸道致病菌,既不耐鹽也不耐熱,會(huì)在鹽水發(fā)酵階段由于食鹽的大量添加而死亡[5],所以在豆醬成品中并無(wú)檢出。HACCP體系實(shí)施后,通過(guò)對(duì)醬醅生產(chǎn)過(guò)程中浸泡、蒸煮和發(fā)酵等關(guān)鍵控制點(diǎn)的溫度、濕度和時(shí)間等關(guān)鍵因素的控制[6],基本上可以在醬醅的制作過(guò)程中消除沙門(mén)氏菌、蠟樣芽孢桿菌等治病菌產(chǎn)生的危害,大大提高豆醬產(chǎn)品的食用安全性,通過(guò)比較發(fā)現(xiàn),HACCP體系控制下的產(chǎn)品報(bào)廢率大幅度下降,大大降低了生產(chǎn)成本。

    [1]李博,李里特.中國(guó)傳統(tǒng)豆制品生產(chǎn)工業(yè)化過(guò)程中存在的問(wèn)題[J].食品科技,2003,1:1-4.

    [2]姜南,張欣.危害分析和關(guān)鍵控制點(diǎn)(HACCP)及再生品生產(chǎn)中的應(yīng)用[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2003.

    [3]勵(lì)建榮.中國(guó)傳統(tǒng)豆制品及其工業(yè)化對(duì)策[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2005,20(1):41-44.

    [4]蔣立文,周傳云,李宗軍.傳統(tǒng)發(fā)酵大豆制品的質(zhì)量與安全控制探討[J].中國(guó)釀造,2006,1:1-3.

    [5]Untermann F.Risk assessment and risk management according to the HACCP(Hazard Analysis and Critical Control Point)concept:a concept for safe foods[J].Zentralbl Hyg Umweltmed,1996,199(2-4):19-30.

    [6]曾慶孝,許喜林.食品生產(chǎn)的危害分析與關(guān)鍵控制點(diǎn)(HACCP)原理與應(yīng)用[M].華南理工大學(xué)出版社,2001.

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