HPV檢測(cè)在宮頸未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞中臨床意義

葉延青

資料表明，美國(guó)大約每年有2000萬(wàn)婦女診斷為非典型鱗狀細(xì)胞宮頸病變(ASCUS;atypical squamous cell of undermined significance)。目前我們明確認(rèn)識(shí)到人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌及癌前病變密切相關(guān)，HPV是導(dǎo)致宮頸癌的主要發(fā)病病因之一［1、2］。本文擬通過(guò)對(duì)200例陰道脫落細(xì)胞TBS分類檢查結(jié)果為ASC-US的女性患者行HPV-DNA檢測(cè)，探討HPV檢測(cè)對(duì)ASC-US分流監(jiān)測(cè)的臨床價(jià)值。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選我院2005年1月1日至2009年12月31日在我院就診的陰道脫落細(xì)胞學(xué)TBS分類檢查結(jié)果為ASCUS婦女患者，共200例，其年齡介于19～54歲之間，平均年齡為(35.50±10.35)歲。其中20例為未婚有性生活史婦女，已絕經(jīng)24例，余為已婚婦女。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 ASCUS的診斷與操作方法 本研究采用2001年TBS(the bethesda system)分級(jí)系統(tǒng)。官頸外口和頸管的脫落細(xì)胞經(jīng)Thinprep 2000系統(tǒng)自動(dòng)制片機(jī)處理后，制成直徑為2cm薄層細(xì)胞涂片(TCT)后固定、染色等處理。同時(shí)采用2001年國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)(NCI)推薦的新TBS分類標(biāo)準(zhǔn)分為未見(jiàn)上皮內(nèi)病變細(xì)胞或惡性細(xì)胞(negative for intraepithelial or malignancy，NILM)、其他(子宮內(nèi)膜細(xì)胞出現(xiàn)在40歲以后婦女的涂片)和上皮細(xì)胞異常(鱗狀上皮異常和腺上皮異常)。鱗狀上皮異常分為非典型鱗狀細(xì)胞，其中包括非典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cell，ASC)、不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變的不典型鱗狀細(xì)胞(a-typical squamous cells，ASC.H)，統(tǒng)稱 ASCUS。ASCUS的診斷標(biāo)準(zhǔn)為:①細(xì)胞核增大，是正常中層細(xì)胞核的2.5～3.0倍，核漿比例輕度增大;②可能有細(xì)胞核形態(tài)改變或有雙核;③核染色質(zhì)輕度增加，但仍均勻分布，無(wú)顆粒片中的異常細(xì)胞僅有1～2個(gè)，不足以診斷鱗狀上皮內(nèi)病變(SIL)。二代雜交捕獲試驗(yàn)檢測(cè)HPV高危型(HC2)，高危型HPV檢測(cè)值≥1 pg/ml為HPV陽(yáng)性;＜1 pg/ml為HPV陰性。

1.2.2 HPV DNA(13種高危型)檢測(cè)方法 系采用二代雜交捕獲法{HC2法}，如Hybrid CaptureⅡ Systems(HCⅡ，Digene Corp.，USA)。這是利用一種非同位素信號(hào)放大系統(tǒng)并基HPV-DNA雜交到溶液中標(biāo)記 RNA探針的方法。結(jié)合后DNA-RNA雜交體被微孔板所捕獲并被隨后所加的特異性單克隆抗體和化學(xué)發(fā)光底物所檢測(cè)。該法可對(duì)HPV-DNA進(jìn)行定量分析。此系統(tǒng)應(yīng)用兩組不同的混合探針(即所謂的雞尾酒探針)，一組含有 HPV-6、HPV-11、HPV-42、HPV-43 和 HPV-44型5種LR探針，而另一組則含有 HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-56、HPV-58、HPV-59和HPV-68型13種HR探針。HCⅡ?yàn)槟壳拔ㄒ灰陨唐沸问教峁┑?，且有足夠的科學(xué)正據(jù)支持其應(yīng)用于臨床的檢測(cè)系統(tǒng)。該方法得到美國(guó)FDA認(rèn)證，已成為許多國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)方法并被廣泛應(yīng)用于臨床研究中。

2 結(jié)果

本資料200例ASC-US患者中，高危型HPV陽(yáng)性者54例(27%)。這與別人的研究相一致［2］。結(jié)果見(jiàn)下表1。

表1 200例ASCUS患者中UPV陽(yáng)性數(shù)與點(diǎn)比例(例，%)

3 討論

未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞(AS-cus)的定義為:介于正常鱗狀細(xì)胞與異常鱗狀細(xì)胞之間的一組細(xì)胞，其鱗狀細(xì)胞的異常是指明顯超過(guò)細(xì)胞反應(yīng)性改變但在數(shù)量與質(zhì)量上又沒(méi)達(dá)到鱗狀上皮內(nèi)瘤變的診斷標(biāo)準(zhǔn)。大量資料表明，未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞的發(fā)病原因主要有可能與炎癥發(fā)生相關(guān)，與刺激有關(guān)，與宮內(nèi)節(jié)育器有關(guān);與刮片采取固定不好有關(guān);可能有癌前病變;可能有癌存在等［2］。由于細(xì)胞涂片缺乏完整的組織形態(tài)，所提供的信息有限，難以對(duì)一些輕微的細(xì)胞病變明確是正?；蚴趋[狀上皮內(nèi)瘤變(SIL)［3］。

近年來(lái)，美國(guó)陰道鏡與宮頸病理協(xié)會(huì)科學(xué)家們提出5種AS-cus的治療方案:重復(fù)細(xì)胞學(xué)檢查，立即陰道鏡檢查，高危型HPV檢測(cè)(眾所周知，HPV是小型雙鏈DNA病毒。其感染具有種屬特異性，主要引起高級(jí)脊椎動(dòng)物的上皮細(xì)胞發(fā)生增殖以及乳頭瘤樣改變。HPV有多種類型，常見(jiàn)的低危型是6，11，42，43，44;常見(jiàn)的高危型是 16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，59，68。大量的研究發(fā)現(xiàn)，HPV高危感染常引起生殖道惡性腫瘤，特別與宮頸癌之間有著密切的聯(lián)系)。高危型HPV檢測(cè)具有分流作用，陰性者繼續(xù)隨診，陽(yáng)性者則需立即陰道鏡檢查，從而可降低陰道鏡檢查率而又有較高的宮頸病變的檢出率。根據(jù)篩查結(jié)果進(jìn)行定向分流，篩查高風(fēng)險(xiǎn)人群，便于進(jìn)行有效監(jiān)控，以便臨床醫(yī)生早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌變［4］。如果只有HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果陰性，表明尚未引起病變，可暫不予處理，但要隨訪觀察，6～12個(gè)月后復(fù)查細(xì)胞學(xué)和HPV-DNA檢測(cè)，如二者均為陰性，可3年后再進(jìn)行篩查，對(duì)于細(xì)胞學(xué)和HPV檢查異常者應(yīng)積極行陰道鏡檢查和宮頸活體組織學(xué)檢查。

本研究200例ASC-US女性患者中，高危型HPV陽(yáng)性者54例(27%)。這與別人的研究相一致［2］。本研究進(jìn)一步證實(shí)HPV檢查對(duì)ASCUS可提高官頸病變篩查的陽(yáng)性率，減少癌前病變的漏診，有一定的臨床檢測(cè)意義。

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［2］陳棠嬌.156例未明確診斷意義的宮頸鱗狀細(xì)胞HPV感染分析.現(xiàn)代醫(yī)院，2006，6(4):52-53.

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［4］魯菊英，李國(guó)輝.宮頸細(xì)胞學(xué)未明確意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞的診斷.中國(guó)生育健康雜志，2009，20(3):172-175.