不同殺菌劑對紅麻炭疽病菌的室內(nèi)毒力測定

王會芳，王三勇，芮 凱，吉訓(xùn)聰，陳綿才

（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境與植物保護研究所，?？?571100 ）

紅麻炭疽病是紅麻生產(chǎn)上的主要病害，在紅麻整個生育期只要溫度、濕度適宜，其嫩葉、嫩莖、側(cè)芽、花蕾等均可受害。在病害流行季節(jié)，常常造成莖折或爛頭，嚴(yán)重影響了紅麻的產(chǎn)量和質(zhì)量[1]。筆者對采自福建漳州紅麻上的炭疽病樣本進行了組織分離及回接實驗，通過形態(tài)學(xué)觀察，確認(rèn)誘發(fā)病害的病原菌為印度炭疽（Colletotrichuml indicum Dast.）[2]。殺菌劑應(yīng)用是控制病害發(fā)生和蔓延的有效途徑，但近十多年來國內(nèi)未見該病的藥劑篩選和防治研究的報道。本文選用了不同作用機理和不同作用方式的殺菌劑對該病原菌進行了室內(nèi)毒力測定，旨在為病害的防治和科學(xué)用藥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試病原菌株

病樣采自福建省漳州市，在PDA培養(yǎng)基上按常規(guī)方法進行組織分離和病原菌純化[3]，獲得純培養(yǎng)菌株，實驗室條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 供試藥劑及使用濃度

選擇來自不同農(nóng)藥生產(chǎn)企業(yè)的常規(guī)和新型殺菌劑商品9種，按表1設(shè)計使用濃度。

表1 供試藥劑及使用濃度Table 1 Fungicides and the application concentration

1.3 測定方法

利用生長速率法進行室內(nèi)毒力測定。將上述藥劑分別配成所需濃度50倍，待培養(yǎng)基溶化后，分別用移液器吸取不同濃度的藥液1ml注入49ml培養(yǎng)基中，搖勻后倒入3個直徑為9cm的滅菌培養(yǎng)皿中，使其形成薄厚均勻的含藥培養(yǎng)基平板，以1ml無菌水代替藥液作對照。用直徑為5mm的打孔器將活化好的供試菌種（PCA培養(yǎng)基28℃培養(yǎng)5d）打取菌餅接入培養(yǎng)皿中央位置，置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中。培養(yǎng)5d后用十字交叉法測量菌落直徑，求出相對抑制率[4]。用DPS軟件進行統(tǒng)計分析，求出各藥劑對紅麻炭疽病菌的毒力回歸方程、抑制中濃度（EC50）及相關(guān)系數(shù)（R）。

2 結(jié)果與分析

試驗表明，供試藥劑均對紅麻炭疽病菌表現(xiàn)出一定的抑制作用。不同殺菌劑或同一殺菌劑的不同濃度之間表現(xiàn)不同的抑菌效果（見表2）。其中50%咪鮮胺錳鹽WP的抑制效果最好，其EC50和EC90分別為0.0443μg/ml和0.8077μg/ml。25%吡唑醚菌酯EC和10%的苯醚甲環(huán)唑WG也表現(xiàn)了良好的抑制效果，其EC50分別為0.1410μg/ml和0.4098μg/ml，EC90分別為954.8009μg/ml和207.7769μg/ml。12.5%的腈菌唑EC在高抑菌率上表現(xiàn)較好，其EC90為53.7855μg/ml，僅次于50%咪鮮胺錳鹽WP。相對于幾種新型藥劑，兩種常規(guī)藥劑75%百菌清WP和70%甲基托布津WP對菌絲生長的抑制效果偏差，其EC90分別達(dá)到了17509.4735μg/ml和1987.3312μg/ml。而50%醚菌酯WG雖EC50僅為1.1790μg/ml，但隨著藥量的增加，抑制率增長并不顯著。25%嘧菌酯SC和50%硫磺SC未能做出合適的毒力回歸曲線。但從菌落生長的直徑來看，在設(shè)計的濃度范圍內(nèi)，25%嘧菌酯SC也表現(xiàn)出較好的抑菌效果，而50%硫磺SC抑菌效果較差。

表2 9種藥劑對紅麻炭疽病菌菌絲生長抑制效果Table 2 Result ofcontrollinganthracnose pathogen with nine fungicides

3 結(jié)論與討論

殺菌劑應(yīng)用是目前防治紅麻炭疽病的重要措施之一。利用生長速率法對9種藥劑的室內(nèi)毒力測試表明，50%咪鮮胺錳鹽WP對紅麻炭疽病的抑菌效果最好，其EC50和EC90均小于1μg/ml。25%吡唑醚菌酯EC、10%苯醚甲環(huán)唑WG及12.5%腈菌唑EC也表現(xiàn)了較好的抑菌效果。而常規(guī)藥劑75%百菌清WP和70%甲基托布津WP對紅麻炭疽病的防治效果偏差，可能與其在大田中的長期大量使用，使該菌產(chǎn)生了抗藥性有關(guān)。

25%嘧菌酯SC和50%硫磺SC經(jīng)過多次的實驗均未能出現(xiàn)合適的毒力回歸曲線，表明生長速率法并不太適用于這兩種藥劑的室內(nèi)毒力研究。而50%硫磺SC在高濃度下抑菌效果依然不佳。

本實驗為藥劑對菌絲生長的室內(nèi)毒力測定結(jié)果，基于這些殺菌劑的作用機理和作用方式的不同，有待于進行其對孢子萌發(fā)與侵入的抑制效果測定。另外，運用篩選出的新型高效低毒殺菌劑咪鮮胺錳鹽、吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑和腈菌唑進一步實施大田試驗和驗證其防治效果極為必要。

[1] 熊和平，喻春明，王玉富，等．麻類技術(shù)100問[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2009，3：56-57．

[2] 戎文治，徐珊．我國紅麻上的幾種真菌病害[J].浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1983，9（1）：47-53．

[3] 方中達(dá)．植病研究方法[M]，北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998：122-125．

[4] 涂勇，姚昕，余前媛，等.不同殺菌劑對青棗炭疽病菌的室內(nèi)毒力測定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，2：136-137．