輪狀病毒腸炎伴良性驚厥患兒血清及腦脊液白介素檢測意義分析

張 勝,周 濤,付四毛,朱建萍,吳 濤,羅序峰

輪狀病毒 (RV)是世界范圍內(nèi)嬰幼兒腹瀉的重要病原體,1973年澳大利亞學(xué)者 Bishop在非細(xì)菌性胃腸炎患兒的腸黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn) RV,RV感染一直被認(rèn)為是局限于胃腸道內(nèi),然而近 20年來,不斷有 RV腸炎患兒病程中出現(xiàn)各種腸道外臟器損傷的報道[1]。許多學(xué)者推測 RV可以通過病毒血癥逸出胃腸道從而直接造成這些臟器的損傷[2]。目前發(fā)現(xiàn)腸道外神經(jīng)系統(tǒng)病變的發(fā)病率為 6%[1]。近年來 RV感染患兒中相當(dāng)一部分合并無熱抽搐癥狀,臨床上既不能診斷為病毒性腦炎,也不能診斷為中毒性腦病,文獻(xiàn)均以良性驚厥予以診斷,目前對其研究仍然停留在臨床水平。本研究通過對 RV腸炎伴良性驚厥患兒血清及腦脊液白介素的測定,了解其對神經(jīng)系統(tǒng)損傷的輕重及對預(yù)后的影響,為臨床提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2008年 6月—2009年 2月我院住院的25例臨床確診為 RV性腸炎伴良性驚厥的患兒為驚厥組,其中男 15例,女 10例;平均年齡 (1.5±1.1)歲;其中無脫水 5例,輕度脫水 12例,中度脫水 8例。同時選擇同期 25例單純RV腸炎無驚厥的患兒為單純腸炎組,其中男 11例,女 14例;平均年齡 (2.2±0.7)歲。35例外科疾患住院手術(shù)治療需行硬膜外麻醉的患兒為對照組,其中男 26例,女 9例;平均年齡 (1.9±0.3)歲。均排除中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患。家屬均簽署知情同意書。三組患兒男女構(gòu)成、年齡間有均衡性。

1.2 RV腸炎伴良性驚厥診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]高發(fā)年齡 1～2歲;既往體健,無或有驚厥史;驚厥多發(fā)生在 RV腸炎病程的 1～5 d;驚厥以全身性強(qiáng)直 -陣攣發(fā)作為主,一次發(fā)病中可反復(fù)發(fā)作多次;無明顯酸中毒和電解質(zhì)紊亂;血生化、腦脊液、顱腦CT等檢查正常,發(fā)作間期腦電圖正常,大便 RV抗原陽性;預(yù)后良好,一般無復(fù)發(fā)。除外熱性驚厥、顱腦損傷、腦炎、腦膜炎、腦病和已明確為其他類型的癲癇者。

1.3 方法 入院 24 h內(nèi) (急性期)常規(guī)抽取患兒血清標(biāo)本,因單純腸炎組患兒不具備抽取腦脊液指征僅驚厥組及對照組抽取腦脊液標(biāo)本,檢測血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8。驚厥組及單純腸炎組患兒并在恢復(fù)期 (發(fā)病后 5～7 d,無臨床癥狀,RV轉(zhuǎn)陰)再次檢測血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8。SIL-2R、IL-6、IL-8試劑盒由德國西門子公司提供的同批次試劑,采用化學(xué)發(fā)光法檢測。使用西門子公司生產(chǎn)的Immulite 1000化學(xué)發(fā)光儀,檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品結(jié)果監(jiān)測由專人負(fù)責(zé)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 Excel-Xp建立數(shù)據(jù)庫,采用 SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析,計量資料采用 (x ±s)表示,采用方差分析和 t檢驗,以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組對象入院 24 h內(nèi)血清 SIL-2R、 IL-6、IL-8水平比較 驚厥組、單純腸炎組及對照組入院 24 h內(nèi)血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。驚厥組及單純腸炎組入院 24 h內(nèi)血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平較對照組均明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05,見表 1)。

2.2 驚厥組與對照組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8比較驚厥組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平較對照組均明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05,見表 2)。

表1 三組血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 (x ±s)Table 1 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8amorg serum in three groups

表2 驚厥組與對照組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較(x ±s)Table 2 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8 in CSF between seizure group and the colitis group

2.3 驚厥組和單純腸炎組急性期及恢復(fù)期血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 驚厥組和單純腸炎組急性期及恢復(fù)期血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05,見表 3)。

2.4 RV性腸炎伴良性驚厥患兒不同程度脫水組血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 RV性腸炎伴良性驚厥患兒無脫水組、輕度脫水組及中度脫水組血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05);無脫水組、輕度脫水組及中度脫水組腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05,見表 4)。

表3 驚厥組和單純腸炎組急性期及恢復(fù)期血清 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較 (x ±s)Table 3 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8 in serum and CSF between seizure group and the colitisgroup

表4 不同程度脫水血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8水平比較(x ±s)Table 4 Comparison of the levels of SIL-2R,IL-6,IL-8 in patients with varying degrees of dehydration

3 討論

輕度胃腸炎伴良性驚厥是一種以胃腸炎伴驚厥發(fā)作為主要特征的疾病,多發(fā)生在冬春季,以嬰幼兒多見,病因可能與病毒或細(xì)菌感染相關(guān),病毒感染占絕對優(yōu)勢,一半以上為 RV感染,實驗室檢查多正常[4]。急性感染狀態(tài)下患兒的驚厥閾降低是發(fā)病的因素之一。遺傳易感性在疾病發(fā)生中起重要作用[5]。RV腸炎伴良性驚厥患兒中 7%存在熱性驚厥史,6%存在熱性驚厥家族史。目前已經(jīng)證實多種細(xì)胞因子參與 RV炎癥免疫反應(yīng),與發(fā)病及轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)[7-8]。隨著分子免疫學(xué)深入研究,腸炎與免疫功能異常的關(guān)系越來越引起重視,腸道病毒侵犯外周血及腦細(xì)胞,激活免疫系統(tǒng),一方面發(fā)揮抗感染的免疫保護(hù)作用,維持機(jī)體的生理平衡,另一方面也由于免疫失調(diào)而產(chǎn)生對機(jī)體有害的超敏反應(yīng),加重腦組織損傷[6]。本研究留取血清及腦脊液 SIL-2R、IL-6、IL-8并做相關(guān)檢測,以了解疾病發(fā)生過程是否存在免疫功能紊亂及對神經(jīng)系統(tǒng)的損害。

腦脊液 SIL-2R來源于顱內(nèi)病灶,而非外周循環(huán)中 SIL-2R透過血 -腦脊液屏障進(jìn)入腦脊液。SIL-2R可與腦膜 SIL-2R競爭結(jié)合 IL-2,使 IL-2的水平降低,抑制 T細(xì)胞增殖,導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂。SIL-2R與神經(jīng)系統(tǒng)感染關(guān)系的研究中發(fā)現(xiàn),正常人腦脊液中水平較低,不易透過血 -腦脊液屏障,在炎癥情況下,腦脊液內(nèi)的 SIL-2R會出現(xiàn)明顯上升,腦脊液水平的高低可反映神經(jīng)系統(tǒng)的病變情況,其增高的程度與病情的輕重及預(yù)后密切相關(guān)。國內(nèi)學(xué)者認(rèn)為,其水平可作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷預(yù)后的判斷標(biāo)準(zhǔn)之一,其水平高低可以反應(yīng)體液的免疫活性[9]。本研究結(jié)果顯示驚厥發(fā)生時腦脊液 SIL-2R與腸炎脫水輕重水平無相關(guān)性,腸炎脫水程度不同僅改變外周血免疫功能調(diào)控,而腦脊液白介素水平改變無差異。腸炎脫水程度改變并沒有影響腦脊液的白介素水平變化,推測原因:此類患兒在感染狀態(tài)下驚厥閾降低,或具有遺傳易感性特點有關(guān)。本研究證明患兒腦脊液 SIL-2R尚處于低激活狀態(tài),提示其參與體液反應(yīng)的免疫紊亂較輕。

IL-6是一種多功能細(xì)胞因子,在不同的生物學(xué)過程中起主導(dǎo)作用,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)機(jī)體抗損傷防御的重要因素[10]。腦脊液 IL-6主要來源于腦內(nèi)的膠質(zhì)細(xì)胞,IL-6既是T細(xì)胞激活增殖的主要因子,使 T細(xì)胞的免疫和細(xì)胞功能增強(qiáng),又能刺激已激活的 B細(xì)胞分泌特異性抗體[11]。Kamashima等[12]發(fā)現(xiàn) RV血清和腦脊液中一氧化氮 (NO)明顯升高,推測 NO可能通過誘導(dǎo)致炎因子 IL-6參與發(fā)病,血清和腦脊液中 IL-6水平可作為反映腦實質(zhì)損傷程度的重要指征。本研究結(jié)果顯示驚厥組患兒腦脊液 IL-6水平較對照組明顯升高。提示 IL-6參與了本病的免疫應(yīng)答。腦脊液中過量的 IL-6起到神經(jīng)保護(hù)作用,減少興奮神經(jīng)遞質(zhì)毒性對神經(jīng)細(xì)胞的損害,同時也可通過其致炎作用導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的病理過程發(fā)生驚厥[13]。IL-6在免疫失衡過程中起到關(guān)鍵的作用。

IL-8主要是由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種炎癥遞質(zhì),在各種急性或慢性炎癥中起主要作用,IL-8在體內(nèi)的生物學(xué)功能為誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤,增強(qiáng)血管通透性,在感染、創(chuàng)傷的患者血清及組織液中都可以檢測到高水平的 IL-8[14]。腦脊液中 IL-8水平升高與腦脊液病變的病理生理相關(guān),與它們的發(fā)病密切相關(guān),其水平與病情輕重亦相關(guān),本研究結(jié)果顯示驚厥組患兒腦脊液中 IL-8較對照組明顯升高,IL-6很可能是腦脊液感染的共同參與者,但不具有病原學(xué)的特異性。李孟榮等[15]發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染不同致病原之間 IL-8活性沒有顯著區(qū)別,血清中 IL-8活性也沒有升高,僅提示其在炎癥過程中起一定作用,臨床意義不大。

本研究結(jié)果顯示,SIL-2R、IL-6、IL-8均參與了 RV腸炎伴良性驚厥的免疫病理過程,提示嬰幼兒 RV腸炎伴良性驚厥存在免疫失衡并同時導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的病理生理改變。在臨床診斷的同時,通過動態(tài)跟蹤白介素的水平變化,為判斷預(yù)后及病情發(fā)展提供了有效的細(xì)胞學(xué)依據(jù)。

1 黃曉磊,陳潔.輪狀病毒病毒血癥與腸道外臟器損傷的研究 [J].浙江大學(xué)學(xué)報醫(yī)學(xué)版,2005,35(1):69-75.

2 黎明新.輪狀病毒腹瀉嬰幼兒腸道外損害臨床分析 [J].中國誤診學(xué)雜志,2008,8(36):8851.

3 Morooka K.Convulsions and mild diarrhea(in Japanese)[J].Shonika,1982,23(5):131-137.

4 張佩紅,陳嘯洪,王燕,等 .馬蹄香治療嬰幼兒輪狀病毒腸炎作用機(jī)制的初步探討 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2010,13(2):610.

5 Wong V.Acute gastroenteritis-related encephalopathy[J].J Child neurol,2001,16(12):906-910.

6 夏群 .輪狀病毒感染和細(xì)胞因子相關(guān)性研究進(jìn)展 [J].中國當(dāng)代兒科雜志,2009,11(1):78-81.

7 馬小建,王亞強(qiáng),張濤.輪狀病毒性腸炎患兒血清和大便 IL-8水平分析 [J].中國誤診學(xué)雜志,2009,9(1):27.

8 晏曉梅.輪狀病毒感染性腹瀉病并發(fā)多器官功能損害 200例 [J].2009,31(8):956.

9 鄧艷春,吳保仁,楊毅寧.病毒性腦炎患者血清及腦脊液中可溶性白介素Ⅱ受體的水平 [J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,1997,18(5):496.

10 王慧,王立金 .高壓氧治療新生兒缺氧缺血性腦病的療效及其對血清白介素 -6和一氧化氮的影響 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2008,11(12):2213.

11 吳娜.白細(xì)胞介素 6與腦損傷的研究進(jìn)展 [J].國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志,2005,32(4):373-376.

12 Kamashima H,Inage Y,Oginhara M,et al.Serum and cerebrospinal fluid nitrite/nitrate levels in patients with rotavirus gastroenteritis induced convulsion[J].Life Sci,2004,74(1):1397-1405.

13 Hans VH,Kossmann T,Joller H,et al.Interleukin-6 and its soluble receptor in serum and cerebrospinal fluid after cerebralma[J].Neuroreport,1999,10(2):409-412.

14 柳革,劉壯,韓蘊麗,等.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒腦脊液 IL-8含量測定及評價 [J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2006,23(5):761-762.

15 李孟榮,李光乾.小兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染腦脊液時 IL-8和 GCSF的檢測價值 [J].溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2001,31(2):81-82.