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    子宮內(nèi)膜異位癥患者 survivin蛋白的表達(dá)及臨床意義

    2010-04-18 05:29:36胡玉紅
    黑龍江醫(yī)藥科學(xué) 2010年2期
    關(guān)鍵詞:月經(jīng)周期存活異位

    胡玉紅,石 瑾,張 燕

    (佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003)

    子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EM T)簡(jiǎn)稱(chēng)內(nèi)異癥。指具有活性的子宮內(nèi)膜組織(腺體和間質(zhì))出現(xiàn)在子宮內(nèi)膜以外的部位[1]。它雖為良性疾病,但卻具有類(lèi)似惡性腫瘤的“惡性”行為,至今無(wú)特效療法,發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。survivin是最近被發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白 (IAP)基因家族中的新成員,細(xì)胞凋亡與內(nèi)異癥的關(guān)系逐漸成為近年的研究熱點(diǎn)。本研究通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)三組內(nèi)膜組織中 survivin蛋白的表達(dá)情況,并探討在 EM T發(fā)病機(jī)制中的作用及臨床意義。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    所有研究樣本均來(lái)自 2008— 03~ 2009— 03期間在我院婦產(chǎn)科行開(kāi)腹手術(shù),且術(shù)后病理檢查證實(shí)為 EM T的患者。選取36例異位內(nèi)膜組織 (異位內(nèi)膜組),增生期 20例,分泌期16例。另選取36例因 EM T行子宮切除手術(shù)的在位子宮內(nèi)膜組織 (在位內(nèi)膜組 ),增生期 18例 ,分泌期 18例 ,。選擇 25例正常子宮內(nèi)膜組織 (正常內(nèi)膜組 )作為對(duì)照組,標(biāo)本均取自同期因?qū)m頸癌手術(shù)且術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)為正常子宮內(nèi)膜的患者,增生期 12例,分泌期13例。所有病例均月經(jīng)周期規(guī)律,術(shù)前6個(gè)月無(wú)激素治療史。月經(jīng)周期劃分根據(jù)末次月經(jīng)及子宮內(nèi)膜病理檢查結(jié)果確定。

    1.2 主要試劑

    鼠抗人 survivin單克隆抗體,SP試劑盒及 DAB顯色試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    所有標(biāo)本均于術(shù)后取材,用10%福爾馬林液固定;石蠟包埋;連續(xù)切片,厚約4μm。切片常規(guī)脫蠟水洗。采用免疫組化 SP法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。陰性對(duì)照用磷酸鹽緩沖液代替一抗,陽(yáng)性對(duì)照為已知陽(yáng)性切片。

    1.4 結(jié)果判斷

    按照試劑盒說(shuō)明,以細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或褐色顆粒為判斷標(biāo)準(zhǔn);根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞顯色深淺分級(jí):不顯色或顯色不清為陰性(-);淺黃色為弱陽(yáng)性(+ );棕黃色為中度陽(yáng)性(++);深褐色為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用 SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行結(jié)果分析,計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果

    2.1 survivin蛋白在三組內(nèi)膜中的表達(dá)

    根據(jù)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,三組內(nèi)膜中均有 survivin蛋白的表達(dá),異位內(nèi)膜組和在位內(nèi)膜組表達(dá)高于正常內(nèi)膜組 (P<0.01或P<0.05),而異位內(nèi)膜組陽(yáng)性表達(dá)率高于在位內(nèi)膜組 (P< 0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 survivin蛋白在三組內(nèi)膜中的表達(dá)

    2.2 Survivin蛋白在三組內(nèi)膜中的表達(dá)與月經(jīng)周期的關(guān)系

    Survivin蛋白在異位內(nèi)膜組和在位內(nèi)膜組中,分泌期與增生期陽(yáng)性表達(dá)均較強(qiáng),在位內(nèi)膜組分泌期強(qiáng)于增生期(P<0.05);異位內(nèi)膜組各期表達(dá)差異無(wú)顯著性(P> 0.05);正常內(nèi)膜組中,分泌期與增生期陽(yáng)性表達(dá)表達(dá)均較低,兩者差異無(wú)顯著性 (P> 0.05)。見(jiàn)表2。

    表2 survivin蛋白在三組內(nèi)膜中的表達(dá)與月經(jīng)周期的關(guān)系

    3 討論

    Survivin蛋白是最近新被發(fā)現(xiàn)的一種結(jié)構(gòu)獨(dú)特 IAP族的凋亡抑制因子,與細(xì)胞分裂、增殖有關(guān),在胚胎組織和惡性腫瘤中表達(dá),正常成年分化組織一般不表達(dá)或弱表達(dá)[2]。survivin作為 IAP家族的特殊成員,具有細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞凋亡的雙重作用,在內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能起著重要作用。更多的研究證實(shí),凋亡是子宮內(nèi)膜細(xì)胞保持周期性結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定的關(guān)鍵因素,異位內(nèi)膜細(xì)胞得以在宮腔外種植并繼續(xù)存活,與其對(duì)凋亡的抵抗力增強(qiáng)有關(guān)。并且隨著 EM T的嚴(yán)重程度增加而進(jìn)一步降低,推測(cè)異位內(nèi)膜細(xì)胞在盆腔內(nèi)得以繼續(xù)存活及種植,很可能與其對(duì)凋亡的抵抗力增強(qiáng)有關(guān)[3]。Garcia-Velasco等[4]研究發(fā)現(xiàn),子宮內(nèi)膜凋亡呈規(guī)律的周期變化,分泌期的凋亡活動(dòng)顯著比增殖期活躍,并與正常子宮內(nèi)膜作比較,推測(cè) EM T患者的在位內(nèi)膜可能因抑制凋亡能力增強(qiáng),從而在其逆流入腹腔后出現(xiàn)異常存活現(xiàn)象,支持逆流種植學(xué)說(shuō)。本研究發(fā)現(xiàn),三組內(nèi)膜中均有 survivin蛋白的表達(dá),異位內(nèi)膜組和在位內(nèi)膜組 survivin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于正常內(nèi)膜組 (P<0.01或P<0.05),而異位內(nèi)膜組陽(yáng)性表達(dá)率高于在位內(nèi)膜組 (P<0.05)。異位內(nèi)膜組中survivin蛋白在的高表達(dá),在提示 survivin蛋白可能是通過(guò)抑制異位內(nèi)膜細(xì)胞的凋亡使其增殖失控,進(jìn)而促進(jìn)內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展。另外分析在三組內(nèi)膜的不同月經(jīng)周期(增生期和分泌期 )中 survivin蛋白表達(dá)情況,在正常內(nèi)膜組中,分泌期與增生期陽(yáng)性表達(dá)表達(dá)均較低 ,兩者差異無(wú)顯著性 (P> 0.05)。在異位內(nèi)膜組和在位內(nèi)膜組中,分泌期與增生期陽(yáng)性表達(dá)均較強(qiáng),在位內(nèi)膜組分泌期強(qiáng)于增生期 (P<0.05);而異位內(nèi)膜組各期表達(dá)差異無(wú)顯著性 (P> 0.05)。這與 Konno等[5]研究結(jié)果一致。異位內(nèi)膜組織中,survivin蛋白在各期均有表達(dá)且顯著高于對(duì)照組,無(wú)周期性變化。提示,survivin蛋白表達(dá)升高導(dǎo)致異位內(nèi)膜細(xì)胞的抑制凋亡能力明顯增強(qiáng),使得細(xì)胞增殖和凋亡的失衡,有利于經(jīng)期反流到腹腔的異位內(nèi)膜細(xì)胞在盆腔內(nèi)繼續(xù)存活、種植,從而促進(jìn)了 EMT的發(fā)生。因此,我們可以針對(duì) survivin在異位內(nèi)膜中高表達(dá)的特性,應(yīng)用survivin抑制劑來(lái)促進(jìn)異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡 ,延緩復(fù)發(fā),在治療EM T中可能會(huì)具有一定臨床意義,為 EMT的治療提供新的途徑。

    [1]樂(lè)杰.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008,325

    [2]Chawla Sarkar M,Bae SI,Reu FJ,et al.Downregnlation of Bcl-2,FLIP or IAPs(XIAP and snrvivin)by siRN As sensitizes resistant melanoma cells to Apo2L/TRAIL- induced apoptosis[J].Cell Death Differ,2004,30:1160-1175

    [3]郭悅慈,章漢旺.survivin與子宮內(nèi)膜異位癥 [J].國(guó)外醫(yī)學(xué)計(jì)劃生育分冊(cè),2004,23(3):144-146

    [4]Garcia-Velasco J A,Arici A.Apoptosis and the pathogenesis of endometriosis[J].Semi Reprod M ed,2003,21(2):165-172

    [5]Konno R,Yanakwa H,U tsunanomiya H,et al.Ex pression of survivin and Bcl-2 in the nomal human endom etrium[J].Mol Hum Reprod,2000,6:529-534

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