胚胎移植技術(shù)生產(chǎn)SPF豬概述

戴 琦

（四川省遂寧市安居區(qū)畜牧食品局，四川 遂寧 629006）

豬肉長期以來是我國居民主要的肉食品，隨著人民生活水平的提高，其質(zhì)量問題已經(jīng)成為消費(fèi)者關(guān)注的焦點(diǎn)。SPF豬群消除了一些危害嚴(yán)重的慢性傳染病，保持豬群健康狀態(tài)，從根本上提高豬肉制品的質(zhì)量，從而保障群眾的健康；另外據(jù)有關(guān)資料報(bào)道，在生產(chǎn)性能上SPF豬群與普通豬群相比：耗料增重比降低10%，而日增重提高10%，同時(shí)獸醫(yī)費(fèi)用降低30%，由疾病所致的屠體折扣量減少70%，大大提高了養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟(jì)效益；因此建立SPF豬群對(duì)保障人民健康和促進(jìn)養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展有重要意義。

1 SPF豬的定義

SPF是英文 Specific Pathogen Free的縮寫，意為“無特定病原體”，SPF豬即指從出生到育成都無特定病原體的豬。1885年，法國動(dòng)物學(xué)家巴斯得首先進(jìn)行無病動(dòng)物的研究，1951年，美國Yong博士按無病動(dòng)物的生產(chǎn)原理進(jìn)行SPF豬的生產(chǎn)試驗(yàn)，并創(chuàng)立了SPF豬生產(chǎn)計(jì)劃，其技術(shù)路線是：在健康母豬妊娠末期通過外科手術(shù)獲取仔豬，在無菌隔離環(huán)境中人工飼喂超高溫消毒牛奶，并給仔豬接種乳酸桿菌以增強(qiáng)其消化功能，21 d后轉(zhuǎn)入環(huán)境適應(yīng)間飼養(yǎng)4～6周，待逐步適應(yīng)環(huán)境后轉(zhuǎn)入衛(wèi)生嚴(yán)格管理的豬場育成，這樣育成的豬稱為初級(jí)SPF豬。初級(jí)SPF豬正常配種繁殖生產(chǎn)的后代稱為二級(jí)SPF豬，不管是初級(jí)還是二級(jí)SPF豬，只要不感染所控制的疾病，統(tǒng)稱為SPF豬。

2 國內(nèi)外SPF豬生產(chǎn)方法

養(yǎng)豬發(fā)達(dá)的歐美國家大都建立了SPF豬生產(chǎn)繁育系統(tǒng)，但基于防疫體系不同所采取的方法也不同。美國主要通過無菌剖腹取胎獲得SPF仔豬，并于1959年建立SPF豬基地進(jìn)行培育SPF豬的研究；丹麥自1970年建立SPF豬生產(chǎn)繁育系統(tǒng)并實(shí)施SPF豬的生產(chǎn)計(jì)劃，在1987年采用胚胎移植培育SPF豬試驗(yàn)效果不理想后，廣泛采用無菌剖腹產(chǎn)手術(shù)和無菌接產(chǎn)方法來獲取初級(jí)SPF豬；日本于1963年組織SPF豬研究班，最初采用自然分娩法，隨后采用外科手術(shù)法生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)用SPF豬，但1984年后胚胎移植技術(shù)代替外科手術(shù)法成為生產(chǎn)SPF豬群的主要方法。我國大陸地區(qū)SPF豬研究起步較晚，上世紀(jì)70年代初主要采用自然分娩和人工哺乳的方法進(jìn)行小量試驗(yàn)，直到1988年才從丹麥引進(jìn)SPF豬生產(chǎn)技術(shù)探索SPF豬培育技術(shù)；近年來，有關(guān)人員等致力于采用胚胎移植技術(shù)培育實(shí)驗(yàn)用SPF的研究工作，并取得了一定效果，但至今未建立起SPF種豬群。

3 胚胎移植技術(shù)生產(chǎn)SPF豬的技術(shù)方案

盡管Kvasnickii在1951年就完成世界首例豬胚胎移植試驗(yàn)，但由于豬生理特征以及其受精卵低溫抵抗力較弱等特點(diǎn)，直到1975年Cumock將豬胚移植技術(shù)運(yùn)用于實(shí)際后，這項(xiàng)技術(shù)作為一種豬群凈化手段才被世界所關(guān)注。

為將這項(xiàng)技術(shù)用于豬群凈化，世界國際胚胎移植聯(lián)合會(huì)與國際獸醫(yī)檢疫局制定了具體的操作規(guī)程：在無菌環(huán)境下回收胚胎，并在50倍顯微鏡下進(jìn)行胚胎鑒定；要求用于移植的胚胎必須具有完整的透明帶，將胚胎用含有雙抗和抗真菌素的新鮮培養(yǎng)基清洗至少10次后進(jìn)行移植；清洗過程所使用器械必須無菌。因此，胚胎移植技術(shù)生產(chǎn)SPF豬基本方案是選用優(yōu)良母豬作供、受體，將供體早期胚胎進(jìn)行處理后植入受體，自然分娩仔豬，母豬哺乳，即可獲得SPF豬；在給SPF豬群引入外血時(shí)，可以給SPF母豬移植受精卵，使其自然分娩，即可達(dá)到目的。

4 胚胎移植技術(shù)生產(chǎn)SPF豬的主要依據(jù)

在胚胎移植過程中用含雙抗的新鮮培養(yǎng)基清洗具有完整透明帶的胚胎10次以上，能有效地除去病原體。早期胚胎受病原感染一般是由于胚胎的外環(huán)境中存在病原體，如在體內(nèi)子宮內(nèi)、輸卵管或在體外沖洗夜、清洗液中的病原體可感染胚胎。家畜胚胎的透明帶是一道天然屏障，能有效地防止病原侵入，胚胎在供體體內(nèi)一般只有5～7 d，許多病原體不能穿過透明帶，僅存于透明帶表面，可以通過沖洗的方法除去病原。Eaglesome和Wrathall實(shí)驗(yàn)報(bào)道豬細(xì)小病毒、偽狂犬病病毒、豬瘟病毒和口蹄疫病毒雖然能附著在胚胎透明帶上，但不能穿過透明帶進(jìn)入胚胎感染早期胚胎；而非病毒性病原體由于其本身體積大，一般不能穿過透明帶，Singh和Stringfellow分別報(bào)道清洗可清除附著在豬胚胎透明帶上的細(xì)小病毒、豬瘟病毒、口蹄疫病毒、布氏桿菌病毒和偽狂犬病病毒。另外，胚胎移植的一些操作過程也有助于減弱或消除病原體的活力，如沖洗胚胎使可能存在的病原體得以稀釋，從而增大了對(duì)疾病凈化的可能性。

5 胚胎移植技術(shù)生產(chǎn)SPF豬的前景

目前，許多國家都在進(jìn)行豬病凈化生產(chǎn)SPF豬群的相關(guān)研究，傳統(tǒng)SPF豬群主要通過剖腹產(chǎn)仔和子宮切除產(chǎn)仔隔離器飼養(yǎng)的方法來培育。剖腹產(chǎn)的豬盡管能恢復(fù)繁殖性能，有再利用的可能，但通常被淘汰掉；子宮切除的母豬則完全喪失繁殖能力，不能再利用，而且這兩種方法得到的仔豬數(shù)有限，生產(chǎn)SPF豬的經(jīng)濟(jì)代價(jià)也相當(dāng)大。胚胎移植技術(shù)應(yīng)用于SPF豬生產(chǎn)則可以很大程度上改變傳統(tǒng)方法的缺陷。研究表明胚胎移植妊娠率都在80%以上，相當(dāng)于自然配種或人工輸精受胎率，且手術(shù)沖卵不影響母豬繁殖性能，供體母豬可重復(fù)利用5～6次。所以通過胚胎移植技術(shù)不僅大大降低生產(chǎn)成本，還能大大增加特定母豬的SPF仔豬數(shù)，加快培育進(jìn)程。

國外多個(gè)國家先后開展了利用胚胎移植技術(shù)培育SPF豬的研究，并證實(shí)胚胎移植技術(shù)對(duì)豬群疾病具有良好的凈化效果，且傳播疾病的危險(xiǎn)性相當(dāng)小，根據(jù)國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合已有技術(shù)水平，胚胎移植技術(shù)已成為培育SPF種豬群的有效技術(shù)措施和途徑。盡管豬胚胎移植技術(shù)現(xiàn)階段還主要應(yīng)用于將把新的遺傳物質(zhì)引入小型豬建立無特定病原體豬群的研究，但今后其必定能在凈化豬生產(chǎn)的產(chǎn)業(yè)化與育種改良的效率化方面起到巨大作用。