地黃葉揮發(fā)油GC-MS分析

翟彥峰,邢煜軍,王先友,李 欽*

(1.河南大學(xué) 中藥研究所,河南 開封 475004;2.河南大學(xué)藥學(xué)院,河南 開封 475004)

地黃葉揮發(fā)油GC-MS分析

翟彥峰1,2,邢煜軍2,王先友1,2,李 欽1,2*

(1.河南大學(xué) 中藥研究所,河南 開封 475004;2.河南大學(xué)藥學(xué)院,河南 開封 475004)

目的:用GC-MS法對(duì)地黃葉揮發(fā)性成分進(jìn)行鑒別研究。方法:采用水蒸氣蒸餾法從地黃葉中提取揮發(fā)油,經(jīng)GC-MS進(jìn)行分離鑒定,用歸一化法計(jì)算含量。色譜條件:DB-17石英毛細(xì)管柱(0.544 mm×30 m,膜厚1.0 μ m)。柱溫:起始溫度100℃,保持3min,后以15℃/min升溫至250℃,并保持20min,FID檢測(cè)器。結(jié)果:地黃葉揮發(fā)油中鑒定出38個(gè)成分。結(jié)論:本法可用于地黃葉揮發(fā)性成分的鑒別和測(cè)定。

地黃葉;揮發(fā)油;GC-MS

玄參科植物地黃(Rehmahnia glutinosa Libosch.)的新鮮、干燥塊根和干燥葉,分別習(xí)稱鮮地黃、生地黃和地黃葉。鮮地黃、生地黃為常用大宗中藥材,歷版《中國(guó)藥典》均有收載。《中國(guó)藥典:一部》2005年版收載的成方制劑中有近1/5(約百余種)選用了地黃[1]。大量文獻(xiàn)報(bào)道[2-3]表明:地黃對(duì)免疫、血液、內(nèi)分泌、心腦血管、神經(jīng)系統(tǒng)及抗菌、抗炎等方面均有一定的作用。地黃葉收載于《北京市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1998年版,而對(duì)地黃葉的研究,鮮有報(bào)道。研究[4]發(fā)現(xiàn),地黃葉中梓醇的含量遠(yuǎn)高于地黃根,梓醇是地黃的有效成分之一。為了深入研究地黃葉的化學(xué)成分,本文采用GC-MS法對(duì)地黃葉揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行了分析。

1 儀器和材料

T RACE DSQ GC-MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)熱電公司);地黃葉樣品(北京三號(hào))于2008年11月采自河南省溫縣,在收獲地黃根之前,選取葉片完整、無黃葉的地黃葉作為實(shí)驗(yàn)用樣品,經(jīng)河南大學(xué)藥學(xué)院生藥教研室李欽教授鑒定為玄參科植物地黃(Rehmahnia glutinosa Libosch.)的干燥葉,通風(fēng)自然陰干;實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純。

2 方法

2.1 揮發(fā)油的提取

稱取地黃葉500 g,采用水蒸氣蒸餾法提取,蒸餾時(shí)間5 h,蒸出液按1∶1體積比用乙醚萃取3次,合并萃取液,用無水硫酸鈉干燥后過濾,蒸餾回收乙醚,得黃色揮發(fā)油,避光保存。

2.2 氣相色譜-質(zhì)譜計(jì)算機(jī)聯(lián)用條件

色譜條件:DB-17毛細(xì)管柱(0.544 mm×30 m,膜厚 1.0 μ m),柱子初始溫度 100 ℃,保持 3min,以15℃/min升溫至250℃,保留20min;進(jìn)樣溫度280℃,進(jìn)樣量 2 μ L,質(zhì)譜接口溫度250℃,分流比 1∶200,載氣為氮?dú)?。質(zhì)譜條件:EI 70eV。

3 結(jié)果與討論

分析進(jìn)樣33min,用GC-MS聯(lián)用儀計(jì)算機(jī)對(duì)總離子流色譜圖進(jìn)行分析和處理,經(jīng)NIST05質(zhì)譜庫檢索,人工譜圖解析和查對(duì)有關(guān)資料,共鑒定出38個(gè)化學(xué)成分,結(jié)果見圖 1和表1。

圖1 水蒸氣蒸餾提取地黃葉揮發(fā)油成分GC-MS總離子流圖

表1 地黃葉揮發(fā)油化學(xué)成分及相對(duì)含量

續(xù)表1

本文鑒定出了38個(gè)化合物的結(jié)構(gòu),占揮發(fā)油總量的53.53%,其中葉綠醇 (23.15%)、二十七烷(7.81%)、十六碳酸(5.89%)、六氫法呢基丙酮(5.88%)、十八碳三烯酸甲酯(5.17%)、十六碳酸甲酯(4.87%)、四甲基-2-十六烯醇 (4.64%)、二十九烷(3.67%)、二十五烷(2.75%)、二十八烷(2.28%)、異葉綠醇(1.94%)、二十六烷(1.45%)、二十三烷(1.11%)、十二硫醇(1.14%)和十氫熒蒽(1.27%)為主要成分,相對(duì)含量最高者為葉綠醇。

[1]李更生,于震,王慧森.地黃化學(xué)成分與藥理研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué):中醫(yī)中藥分冊(cè),2004,26(2):74-76.

[2]梁愛華,薛寶云,王金華,等.鮮地黃與平地黃止血和免疫作用比較研究[J].中國(guó)中藥雜志,1999,24(11):663-666.

[3]張汝學(xué),賈正萍,謝景文,等.老年大鼠糖代謝變化及地黃寡糖對(duì)其的改善作用[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2002,22(5):408-409.

[4]孫利偉,李欽.正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選地黃葉中梓醇的提取工藝[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2008,19(1):34.

[責(zé)任編輯 姬 荷]

GC-MS analysis of essential oils from Folium Rehmahnia

ZHAI Yan-feng1,2,XING Yu-jun2,WANG Xian-you1,2,LI Qin1,2*(1.Institute of Chinese Medicine ofHenan University,K ai feng,Henan 475004;2.Pharmaceutical College Henan University,Kaifeng,Henan 475004)

Objective:To analyze the essential oil constituents of Folium Rehmahnia.Methods:The essential oil was extracted by water-steam distillation and separated by gas chromatography with capillary column.The components were determined with area normalization method,and were identified by MS.Chromatographic with DB-17 quartz capillary column(0.544 mm ×30 m,1.0 μ m)and column temperature conditions:initial temperature of 100℃maintain 3min,15℃/min up to 250℃maintained 200min,MS detector.Results:38 compounds have been identified.Conclusion:The method is reliable,stable and can be applied to identify the volatile oil from folium rehmahnia.

Folium Rehmahnia;Essential oils;GC-MS

R284.1

A

1672-7606(2010)02-0113-03

2010-03-01

河南省教育廳自然科學(xué)基金(2006360001)

翟彥峰(1986-),男,河南洛陽人,碩士研究生,從事生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)與新藥研究工作。

*通訊作者:李 欽(1965-),男,教授,河南中牟人,博士,碩士生導(dǎo)師,從事中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)和中藥炮制工藝的教學(xué)和科研工作。