青海省西寧地區(qū)雞毒支原體感染的血清學(xué)檢測(cè)*

圈 華,韓志輝

(青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)系,青海西寧 8100016)

青海省西寧地區(qū)雞毒支原體感染的血清學(xué)檢測(cè)*

圈 華,韓志輝

(青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)系,青海西寧 8100016)

應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對(duì)西寧部分縣雞血清中的雞毒支原體抗體(MG-Ab)進(jìn)行了檢測(cè),共檢測(cè)血清286份,檢出陽性樣品146份,平均陽性率為51.08%。

雞毒支原體;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);檢測(cè)

雞毒支原體(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染又稱雞敗血支原體感染,是雞毒支原體引起的雞傳染病。1898年,Nocard和Roux首次報(bào)道成功培養(yǎng)了支原體,20世紀(jì)30年代,Nelson可能首次在雞中發(fā)現(xiàn)了支原體。到目前為止,已被確認(rèn)的致病性禽支原體有雞毒支原體(M.gallisepticum,MG)和滑液支原體(M.synoviae,MS)[1]。其中,雞毒支原體感染對(duì)我國(guó)家禽養(yǎng)殖業(yè)造成的危害最大。

MG感染可引起雞慢性呼吸道病,臨床上主要表現(xiàn)為咳嗽、流鼻涕,嚴(yán)重時(shí)張口呼吸。感染MG的雞抵抗力下降,易并發(fā)或繼發(fā)大腸埃希菌病、新城疫、傳染性支氣管炎和傳染性喉氣管炎等疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì),MG感染后,雛雞的弱雛率增加10%左右,蛋雞的產(chǎn)蛋率下降 10%～20%,肉雞的體重減少38%。MG感染嚴(yán)重影響集約化養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展[2]。

檢測(cè)和診斷雞毒支原體感染的方法有血清平板凝集試驗(yàn)、HI、ELISA、PCR和病原分離培養(yǎng)等,實(shí)驗(yàn)室研究和臨床診斷[3]中以血清平板凝集試驗(yàn)和ELISA方法較為常用。為了了解西寧地區(qū)雞毒支原體的感染及流行情況,用ELISA方法對(duì)來自湟中、湟源、大通等縣的286份雞血清進(jìn)行了雞毒支原體抗體檢測(cè),結(jié)果表明MG的平均抗體陽性率為51.08%,最高為70.0%,最低為4.76%。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清 待檢雞無菌翅下靜脈采血,分離血清,置4℃冰箱保存。

1.1.2 試劑 雞敗血支原體(MG)抗體檢測(cè)試劑盒,含雞毒支原體抗原(MG)包被板、MG陽性對(duì)照血清、MG陰性對(duì)照血清、酶標(biāo)抗體、樣品稀釋液TMP、底物、終止液為北京愛德士元亨生物科技有限公司產(chǎn)品(批號(hào)為:06729-CB476)。

1.2 方法

按試劑盒操作說明書進(jìn)行,檢測(cè)前將待檢血清用樣品稀釋液作500倍稀釋,低溫保存。設(shè)立陽性和陰性對(duì)照,在650 nm波長(zhǎng)測(cè)定和記錄樣本吸光值。樣品的S/P值小于或等于0.5,判為陰性。樣品的S/P值大于0.5,判為陽性。

2 結(jié)果

大通縣檢測(cè)樣本124份,陽性67份,陽性率為50.03%;湟中縣21份,陽性1 份 ,陽性率4.76%;湟源縣21份,陽性3份,陽性率14.29%;西寧市120份,陽性84份,陽性率70.00%;共檢血清樣品286份,其中陽性146份,平均陽性率為50.97%。

3 討論

雞毒支原體(MG)可引起感染雞的慢性呼吸道病,其特征是咳嗽、流鼻涕、呼吸道口羅音和張口呼吸。本病主要通過飛沫和塵埃經(jīng)呼吸道傳播,也可經(jīng)種蛋垂直傳播;本病不但可以在同一雞場(chǎng)的不同雞舍間傳播,也可以在不同雞場(chǎng)之間傳播;一般情況下,該病的死亡率不高,若混合其他病原感染則病情加重,從而導(dǎo)致大批死亡。

感染MG幼雞可致生長(zhǎng)發(fā)育不良;成年雞多為隱性感染,產(chǎn)蛋下降或產(chǎn)軟殼蛋的比例增大,且肉雞酮體品質(zhì)下降;種蛋孵化率明顯降低,孵出的弱雛率增加,可造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,成為當(dāng)前危害養(yǎng)雞業(yè)的重要傳染病之一[4]。

本次檢測(cè)結(jié)果表明,集中飼養(yǎng)的雞感染率較高,如西寧市雞場(chǎng)、大通縣雞場(chǎng)分別為 70.00%和50.03%;散養(yǎng)雞感染率較底,如湟中縣、湟源縣分別4.76%和14.29%?？赡芘c以下因素有關(guān):一是我省多數(shù)雞場(chǎng)自外地引進(jìn)雞苗,這些新引進(jìn)的雞苗本身已感染;二是對(duì)雞群進(jìn)行雞新城疫弱毒疫苗免疫時(shí),采用氣霧和滴鼻法,可誘發(fā)本病的發(fā)生;三是引進(jìn)種蛋時(shí)缺乏對(duì)對(duì)方雞場(chǎng)疫病的了解和種蛋的檢疫,引進(jìn)帶毒種蛋而導(dǎo)致垂直感染;四是有些養(yǎng)雞場(chǎng)雞只飼養(yǎng)密度過大、衛(wèi)生條件較差、通風(fēng)不良、加之我省早晚溫差大,氣溫變化異常,導(dǎo)致雞只抵抗力下降,容易誘發(fā)呼吸道疾病。

根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,建議采取以下措施:

首先雞場(chǎng)要有合理的布局,良好的隔離、防疫和消毒制度,以及良好的飼養(yǎng)環(huán)境;其次加強(qiáng)凈化檢疫,淘汰陽性雞,建立無病原雞群。

對(duì)種蛋進(jìn)行處理是控制雞敗血支原體感染垂直傳播的有效措施。其方法主要有以下3種:①種蛋注射法:將抗生素注入正在孵化的種蛋的氣室。研究表明,聯(lián)合使用林可霉素和壯觀霉素,效果較好。②種蛋浸泡法:將蛋加熱至37.8℃,然后放入抗生素溶液(1.7℃～4.4℃,400 mg/L～1 000 mg/L的泰樂菌素或紅霉素)中20 min～30 min。③種蛋加熱法:將處于室溫的種蛋置于有加壓空氣的孵化器內(nèi)加溫,使溫度升高至46.1℃,保持12 h,然后降至孵化溫度開始孵化。這種方法降低孵化率3%～12%,但這一方法可切斷垂直傳播途徑[5]。

[1]邵國(guó)青.雞支原體的防控現(xiàn)狀及研究新進(jìn)展[J].中國(guó)家禽,2009,31(11):5-9.

[2]馮元璋.雞毒支原體感染和危害[J].中國(guó)家禽,2008,30(12):45-47.

[3]Brown M B,Bradbury J,Davis J K.Molecular and diagnostic procedures in mycoplasmology[M].Academic Press Inc.1996,93-104,283-292.

[4]吳清民.家畜傳染病學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002:282-285.

[5]朱道中,吾紅專.雞敗血支原體的預(yù)防和控制[J].中國(guó)家禽,2002,22(4):45.

Detection ofMycoplasma gallisepticumInfection in Avian in Xining of Qinghai Province

JUAN Hua,HAN Zhi-hui

(College of Agriculture and Animal Sciences,Qinghai University,Xining,Qinghai,810016,China)

The seral antibodies ofMycoplasmagallisepticum were detected from 286 samples collected from the area of Huangzhong,Huangyuan,Datong and Xining by ELISA.The results showed the positive samples were 146,and the average positive rate was 51.08%(146/286).

Mycoplasma gallisepticum;ELISA;detection

S852.62

B

1007-5038(2010)09-0126-02

2010-03-27

圈 華(1964-),女(藏族),青海西寧人,副教授,主要從事動(dòng)物疾病研究與防治工作。