紫外分光光度法測定刺五加口服液中總黃酮含量

孫玉艷 崔玉海 張 穎 李紹銘 王萍萍

（哈爾濱仁皇藥業(yè)股份有限公司，黑龍江 哈爾濱150300）

刺五加口服液是以刺五加浸膏、蔗糖、苯甲酸鈉經(jīng)加工而制成口服液體劑型。產品具有增強機體免疫力、緩解體力疲勞的功效。其中所含的功效性成分為刺五加總黃酮，經(jīng)現(xiàn)代藥理學研究表明刺五加總黃酮具有增加紅細胞膜流動性，從而降低血液粘度，改善血液流變學指標[1]；刺五加總黃酮還能提高TGF-131蛋白表達，減少腦缺血區(qū)細胞凋亡的發(fā)生[2]。

1 儀器、試藥與試劑

TU-1901型紫外分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；刺五加口服液（哈爾濱仁皇藥業(yè)股份有限公司，批號：20090801，20090802，20090803）；蘆丁對照品(中國生物制品檢定所，批號：100080-200707，含量92.5%）；試劑均為分析純。

2 方法與結果

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2.1 試驗條件的選擇

2.1.1 標準溶液的制備 精密稱取蘆丁對照品5.40mg，加甲醇溶解并定容至100ml，即得50μg/ml。

2.1.2 測定波長的選擇 取蘆丁對照品溶液2ml置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，于200～400nm范圍內進行紫外掃描，在360nm處有最大吸收。

2.1.3 樣品測定波長的選擇 取2.2.2項下的樣品溶液于200～400nm范圍內進行掃描，在360nm處有最大吸收。

2.2 測定法

2.2.1 標準曲線的制備

量取蘆丁標準溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中，加甲醇至刻度，搖勻，于360nm處測定吸收度，以濃度（μg/ml）為x，吸收度值為y，計算回歸方程為y=0.0265x-0.0021，（r=0.9998，n=5），顯示在5.08μg/ml～25.40μg/ml的范圍內，蘆丁的濃度和吸光度呈良好的線性關系。結果如下表1、表2。

2.2.2 樣品測定

稱取10ml的試樣，加乙醇定容至25ml，搖勻后，超聲提取20min，放置，吸取上清液1.0ml，于蒸發(fā)皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上揮去乙醇，然后轉入層析柱。先用20ml苯洗，苯液棄去，然后用甲醇洗脫黃酮，定容至25ml。此液于波長360nm測定吸收度值。按下述公式計算測定結果。見表3。

2.2.3 加樣回收率試驗

準確稱取已知含量的刺五加口服液5ml（含量為148.30mg/100ml），加入蘆丁標準品適量，按樣品溶液配制方法平行做6次，按樣品測定方法測定吸光度，并求得總黃酮含量。計算加樣回收率，平均回收率為99.43%，RSD為0.7%（n=6），結果見表4。

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2.2.4 重現(xiàn)性試驗

精密量取5份同一批號（批號：20090801）樣品10ml，制成供試液并按含量測定項下操作，結果見表5。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗

取上述供試品溶液每間隔一定時間測定其吸光度，8小時內測定結果見表6。

3 結果與討論

本實驗通過紫外分光光度法測定刺五加口服液中總黃酮的含量，實驗結果表明此方法簡單，穩(wěn)定性與重現(xiàn)性好，可有效控制產品質量。

[1]溫筱煦，程麗靜等.刺五加總黃酮對小鼠紅細胞膜流動性的影響.中國基層醫(yī)藥，2006，13（8）

[2]石學魁，王雅賢等.刺五加總黃酮和針刺對腦缺血后TG一61的影響.牡丹江醫(yī)學院學報，2006，27（6）