甘肅馬鈴薯晚疫病菌對(duì)霜脲氰的敏感性測(cè)定

呂偉，李惠霞，王生榮

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院植物病理系，甘肅 蘭州 730070)

馬鈴薯是甘肅省主要糧食作物，種植面積和產(chǎn)量均位居全國(guó)前列。近年來(lái)，馬鈴薯晚疫病發(fā)生日趨嚴(yán)重，已成為制約甘肅省馬鈴薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要因素之一。在甘肅省，晚疫病發(fā)病期與7、8、9月的雨季和馬鈴薯的生長(zhǎng)期相吻合，短期內(nèi)可引發(fā)晚疫病的大發(fā)生，葉片焦黃，植株枯死，產(chǎn)量銳減，損失嚴(yán)重。為了有效抑制晚疫病的肆虐，在各級(jí)政府行政和技術(shù)部門指導(dǎo)下，在高產(chǎn)創(chuàng)建和農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化項(xiàng)目的實(shí)施過(guò)程中，對(duì)病害地區(qū)及時(shí)下?lián)芰藢ｍ?xiàng)防治配套費(fèi)用，并取得了明顯的防治成效。在生產(chǎn)中，普遍常用甲霜靈類藥劑防治馬鈴薯晚疫病，但該藥劑由于過(guò)于頻繁使用，抗藥性問(wèn)題日顯突出[1-3]，其防效也逐漸下降。目前，霜脲氰是唯一的替代藥劑，在全省的推廣使用正逐年擴(kuò)大。為了做好甘肅省馬鈴薯晚疫病的防治工作，保護(hù)好馬鈴薯品牌，減少抗藥性風(fēng)險(xiǎn)，筆者檢測(cè)了甘肅省馬鈴薯晚疫病菌對(duì)霜脲氰的敏感性，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 供試菌株

從2009年采自甘肅省馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)的馬鈴薯晚疫病菌中隨機(jī)選取15個(gè)菌株，對(duì)其進(jìn)行霜脲氰的敏感性測(cè)定，菌株信息見(jiàn)表1。其中14株從葉片上分離得到，1株從薯塊上分離得到。

表1 供試馬鈴薯晚疫病菌株

1.2 供試藥劑及含藥培養(yǎng)基的制備

霜脲氰原藥，甘肅省隴東農(nóng)藥公司生產(chǎn)，市購(gòu)。先用丙酮將霜脲氰溶解，再用滅菌蒸餾水配成系列不同的濃度，并使各濃度中所含丙酮的量一致，待黑麥培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)將其加入，搖勻后倒入培養(yǎng)皿中，即制成霜脲氰的系列濃度含藥培養(yǎng)基平板。

1.3 馬鈴薯晚疫病對(duì)霜脲氰敏感性測(cè)定

先經(jīng)預(yù)備實(shí)驗(yàn)，以確定測(cè)試藥劑的濃度。最終設(shè)定0.01、0.025、0.05、0.125、0.25、0.5、1μg/mL 7個(gè)濃度梯度進(jìn)行霜脲氰敏感性測(cè)定。將培養(yǎng)好的各供試菌株用打孔器在菌落邊緣打取Φ5 mm的菌塊，分別接種在霜脲氰不同濃度的含藥培養(yǎng)基上，每處理重復(fù)3次，18℃下黑暗培養(yǎng)15 d，用垂直交叉法測(cè)定菌落直徑，計(jì)算抑制率，求出各菌株毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)和EC50值。按王文橋[4]的方法將菌株敏感性類型分為抗性（EC50值＞10μg/mL）、中間型（0.1μg/mL≤EC50值≤10μg/mL）、敏感（EC50值＜0.1 μg/mL）。

2 結(jié)果與分析

馬鈴薯晚疫病菌對(duì)霜脲氰的敏感性檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。從中可以看出，測(cè)定的EC50值為0.0766～0.4063μg/mL。根據(jù)抗性分類標(biāo)準(zhǔn)，2株為敏感性菌株，占13.3%，13株為中間型類型，占86.7%，沒(méi)有抗性菌株。由圖1可以看出，15株菌株中只有一株菌株的EC50值離其余菌株較遠(yuǎn)，其他14株菌株對(duì)霜脲氰的敏感性呈單峰分布，所以馬鈴薯晚疫病菌對(duì)霜脲氰的敏感性較高。這表明霜脲氰對(duì)致病疫霉的活性較高，不同敏感性的菌株頻率呈連續(xù)的單峰曲線分布，可以作甘肅省馬鈴薯晚疫病菌對(duì)霜脲氰的敏感性基線。

表2 測(cè)試菌株對(duì)霜脲氰的敏感性

圖1 馬鈴薯晚疫病菌對(duì)霜脲氰敏感性分布

3 結(jié)論與討論

甘肅馬鈴薯晚疫病菌對(duì)殺菌劑霜脲氰是敏感的。測(cè)定結(jié)果表明，15株代表性菌株的EC50值為0.0766～0.4063μg/mL，平均EC50值為0.1506±0.08μg/mL，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)抗性菌株，其中2株屬于敏感類型，13株屬于中間類型，與其他研究者的結(jié)果一致。車興壁[6]的研究表明，在霜脲氰使用多年后未發(fā)現(xiàn)抗藥性下降的菌株，敏感性基線為:0.1647±0.0255μg/mL；楊志輝[7]等的研究表明:各菌株均對(duì)霜脲氰敏感，敏感性基線為:0.027μg/mL；袁善奎[8]等測(cè)得內(nèi)蒙古和黑龍江的菌株敏感性沒(méi)有下降，平均EC50值為0.20±0.06μg/mL。由此可見(jiàn)，甘肅省馬鈴薯晚疫病菌對(duì)霜脲氰具有很高的敏感性。

甲霜靈作為防治馬鈴薯晚疫病的主要藥劑，在中國(guó)馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)連續(xù)使用的年份較長(zhǎng)，已出現(xiàn)抗藥性問(wèn)題。因此，可以采用藥效較好的霜脲氰作為替代藥劑，用于防治馬鈴薯晚疫病，也可以和甲霜靈類藥劑交替使用，延緩抗藥性的產(chǎn)生。

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[3]陳良華，楊志輝，丁明亞，等.河北、吉林兩省馬鈴薯晚疫病菌對(duì)3種殺菌劑的敏感性測(cè)定[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2009，25（13）:171-174.

[4]王文橋，馬志強(qiáng)，張小風(fēng)，等.致病疫霉抗藥性、交配型和適合度[J].植物病理學(xué)報(bào)，2002，32（3）:278-283.

[5]朱桂寧，黃福新，馮蘭香，等.番茄晚疫病菌對(duì)甲霜靈、霜脲氰和烯酰嗎啉的敏感性檢測(cè)[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，41（5）:1355-1365.

[6]車興壁，畢朝位，王中康.馬鈴薯晚疫病病菌對(duì)四種殺菌劑的交互抗性[J].中國(guó)馬鈴薯，2003，17（1）:8-10.

[7]楊志輝，桂秀梅，朱杰華，等.馬鈴薯晚疫病菌對(duì)甲霜靈的抗性及與霜脲氰和霜霉威交互抗藥性的研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào).2008，24（5）:335-338.

[8]袁善奎，趙志華，劉西莉，等.馬鈴薯晚疫病菌對(duì)甲霜靈和霜脲氰的敏感性檢測(cè)[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2005，7（3）:237-241.