膠體金單克隆抗體法與鄰聯(lián)甲苯胺法聯(lián)合檢測(cè)糞便隱血的臨床意義

江 華,黃 毅 ,鄭 暉

(福建省立醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建 福州 350001)

糞便隱血是診斷消化道出血性疾病的重要指標(biāo)之一,對(duì)早期發(fā)現(xiàn)與診斷消化道出血性疾病具有重要的臨床意義。糞便隱血的檢測(cè)方法有多種,傳統(tǒng)上較常應(yīng)用的是鄰聯(lián)甲苯胺法,但近年來(lái),在臨床上膠體金單克隆克體法被廣泛應(yīng)用。本文對(duì)這兩種方法進(jìn)行比較,現(xiàn)報(bào)道如下:

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2009年 4-8月收集的 36例柏油樣便標(biāo)本來(lái)自我院上消化道出血住院患者,33例血便標(biāo)本來(lái)自我院下消化道出血住院患者,所有患者消化道出血之診斷均經(jīng)胃鏡、腸鏡及手術(shù)證實(shí);38例正常對(duì)照糞便標(biāo)本來(lái)自我院健康體檢者。

1.2 方法 鄰聯(lián)甲苯胺法的操作嚴(yán)格按第三版全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行[1]。膠體金單克隆抗體法試劑采用萬(wàn)華普曼生物有限公司生產(chǎn)的“消康寶”膠體金試紙條,主要成分為膠體金、抗 Hb2單克隆抗體、抗 Hb1單克隆抗體和羊抗鼠 IgG多克隆抗體。檢測(cè)時(shí)用采便棒多點(diǎn)采取糞便,將采便棒放回采便容器內(nèi),將蓋擰緊,充分混勻,取 2-3滴滴于試紙條一側(cè),10 min后觀察結(jié)果。膠體金單克隆抗體法結(jié)果判斷:控制線(xiàn)(C)與反應(yīng)線(xiàn)(T)同時(shí)出現(xiàn)一條色帶時(shí)結(jié)果為陽(yáng)性,表明標(biāo)本有隱性出血;只有控制線(xiàn)(C)出現(xiàn)一條色帶,反應(yīng)線(xiàn)(T)無(wú)色帶出現(xiàn)時(shí)結(jié)果為陰性,表明標(biāo)本無(wú)隱性出血;只有控制線(xiàn)(C)和反應(yīng)線(xiàn)(T)均無(wú)色帶出現(xiàn),或只在反應(yīng)線(xiàn)(T)出現(xiàn)一條色帶,表明試驗(yàn)無(wú)效,應(yīng)用新條重新測(cè)試。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均在SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包上進(jìn)行。

2 結(jié) 果

膠體金單克隆抗體法與鄰聯(lián)甲苯胺法糞便隱血檢驗(yàn)結(jié)果的比較見(jiàn)表 1。由表 1可見(jiàn),膠體金單克隆抗體法在 33例血便中的陽(yáng)性率為 84.8%(28/33),低于鄰聯(lián)甲苯胺法的陽(yáng)性率[100%(33/33)];膠體金單克隆抗體法在 36例柏油樣便和 38例正常對(duì)照糞便中的陽(yáng)性率分別為 61.1%(22/36)、0%(0/38),均明顯低于鄰聯(lián)甲苯胺法的陽(yáng)性率 [100%(36/36)、23.7%(9/38)](P＜0.01)。

表1 膠體金單克隆抗體法與鄰聯(lián)甲苯胺法糞便隱血檢驗(yàn)結(jié)果的比較

3 討 論

臨床上常規(guī)采用鄰聯(lián)甲苯胺法檢測(cè)糞便隱血,其原理是利用血紅素有過(guò)氧化物酶的特性,通過(guò)血紅素催化分解過(guò)氧化氫,釋放出新生態(tài)氧,使鄰聯(lián)甲苯胺氧化呈色,從而達(dá)到檢測(cè)隱血的目的。由于糞便中的成份很復(fù)雜,常存在一些類(lèi)似過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)如鐵劑、鉍劑、某些中藥及治療幽門(mén)螺桿菌的藥物,各種動(dòng)物的肉、血、肝臟和富含葉綠素的食品等均可產(chǎn)生此化學(xué)反應(yīng),干擾檢測(cè)結(jié)果而造成假陽(yáng)性。有文獻(xiàn)報(bào)道鄰聯(lián)甲苯胺法檢測(cè)糞便隱血假陽(yáng)性率高達(dá) 30%[1],本研究 38例正常對(duì)照糞便鄰聯(lián)甲苯胺法的陽(yáng)性率為 23.7%(9/38),結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道相近,提示鄰聯(lián)甲苯胺法檢測(cè)糞便隱血存在特異性低的缺陷。

相比鄰聯(lián)甲苯胺法,膠體金單克隆抗體法采用抗人體血紅蛋白的單克隆抗體和多克隆抗體,特異性針對(duì)糞便樣品中的人血紅蛋白。該法不受動(dòng)物血紅蛋白和藥品的干擾,實(shí)驗(yàn)前不須禁食肉類(lèi)及其他有過(guò)氧化物酶的藥品及食品,具有高度的特異性和準(zhǔn)確性,能確診消化道是否有出血[2-3]。但該法易出現(xiàn)標(biāo)本中抗原血紅蛋白(Hb)濃度過(guò)高所致的“后帶”現(xiàn)象[4],本研究膠體金單克隆抗體法在 33例下消化道出血患者血便和 36例上消化道出血患者柏油樣便中的陽(yáng)性率分別為 84.8%(28/33)、61.1%(22/36),均低于鄰聯(lián)甲苯胺法,提示膠體金單克隆抗體法存在一定程度假陰性的問(wèn)題。對(duì)這些假陰性標(biāo)本進(jìn)行稀釋后重新檢測(cè),5例假陰性血便的隱血結(jié)果均陽(yáng)性,14例假陰性柏油樣便中有 11例隱血結(jié)果陽(yáng)性,但有 3例隱血結(jié)果仍陰性,提示造成柏油樣便隱血假陰性的原因除與“后帶”現(xiàn)象有關(guān)外,還存在其他的影響因素,推測(cè)可能與上消化道出血后,Hb經(jīng)胃、胰、腸等不同 PH值消化液及腸道菌蛋白酶的作用,約 24 h后才隨糞便排出體外,期間 Hb易變性或降解有關(guān)。

綜上所述,本研究認(rèn)為鄰聯(lián)甲苯胺法檢測(cè)糞便隱血敏感性高,但存在較高的假陽(yáng)性;膠體金單克隆抗體法檢測(cè)糞便隱血不受飲食限制,特異性高,但在敏感性上不如鄰聯(lián)甲苯胺法,兩種方法聯(lián)合使用,可有效保證臨床糞便隱血檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和敏感性。

[1] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006∶310-311.

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[4] 寇麗筠,陳宏礎(chǔ),叢玉隆,等.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1999∶144.