鈣調(diào)磷酸酶的抑制促進(jìn)腎小球旁細(xì)胞分泌腎素

為檢測鈣/鈣調(diào)蛋白依賴的鈣調(diào)磷酸酶在腎素釋放上的調(diào)節(jié)作用，本研究采用全細(xì)胞膜片鉗記錄單個培養(yǎng)的腎小球旁細(xì)胞腎素的分泌。在單個腎小球旁細(xì)胞中，鈣調(diào)磷酸酶抑制劑環(huán)孢菌素A（CsA）顯著增加了腎小球旁細(xì)胞的膜電容，即確定細(xì)胞表面區(qū)域腎素分泌的檢測方法。這種作用的誘導(dǎo)可以通過細(xì)胞內(nèi)給予鈣調(diào)磷酸酶抑制肽，鈣螯合劑乙二醇雙（2－氨基乙基）四乙酸（EGTA）或鈣調(diào)蛋白抑制劑W-13。同時給予EGTA和CsA無疊加作用。蛋白激酶A（PKA）阻斷劑RpcAMPs對CsA引起的膜電容增加無影響。細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外給予他克莫司無膜電容的改變。在培養(yǎng)的腎小球旁細(xì)胞，卡米達(dá)佐（calmidazolium，一種鈣調(diào)蛋白拮抗劑）和CsA可以顯著地刺激腎素分泌，但是卡米達(dá)佐和他克莫司沒有此作用。腎小球旁細(xì)胞表達(dá)鈣調(diào)磷酸酶同工型A-β和A－γ，但是沒有A－α。血漿腎素濃度在野生型、敲除鈣調(diào)磷酸酶A-α或A-β的小鼠中無差異，但是敲除鈣調(diào)磷酸酶A-α的小鼠經(jīng)CsA治療后，血漿腎素濃度增加，而腎素mRNA的表達(dá)受到抑制。研究結(jié)論是鈣調(diào)磷酸酶和鈣/鈣調(diào)蛋白不依賴PKA抑制腎小球旁細(xì)胞分泌腎素。