全自動血細胞分析儀在臨床應(yīng)用中的優(yōu)點和缺點

尚榮華 ，金海甲 ，聶建紅 ，王 瑞 ，王 紅

（1.吉化集團總醫(yī)院檢驗科，吉林吉林 132022；2.吉林醫(yī)藥學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系，吉林吉林 132013）

全自動血細胞分析儀目前已是國內(nèi)外臨床檢驗最常用的篩檢儀器之一，與傳統(tǒng)方法相比，有著精度高，速度快，易操作，功能強的強勁優(yōu)勢，尤其是現(xiàn)有先進血細胞分析儀（如Sysmex XE2100和貝克曼庫爾特LH755）不僅應(yīng)用多項檢測原理對各項血細胞檢測參數(shù)進行分析檢測，而且可與血涂片制備和染色儀有效結(jié)合，進而為臨床不同層次需求提供更有效、精確的血細胞檢測參數(shù)，對疾病的診斷與治療有著重要的臨床意義。但是，即使再先進的血細胞分析儀也存在著自身無法彌補的缺陷，因此血細胞鏡檢和其他手工復(fù)檢還是有必要的。只有全自動血球分析儀和血細胞鏡檢有效結(jié)合才能達到更完美的目的，進而使全自動血細胞分析儀的檢測結(jié)果更有臨床實用價值。

1全自動血細胞分析儀在臨床應(yīng)用中的優(yōu)點

1.1 全自動血細胞分析儀的功能

現(xiàn)代血細胞分析儀除擁有一般三大功能（①全血細胞計數(shù)功能；②白細胞分類計數(shù)功能；③血細胞計數(shù)和分類功能的拓展功能，包括：有核紅細胞計數(shù)；網(wǎng)織紅細胞計數(shù)及其相關(guān)參數(shù)檢測；未成熟粒細胞，幼稚粒細胞，造血干細胞計數(shù)；未成熟血小板比率；淋巴細胞亞型計數(shù)；血細胞免疫表型檢測等）外，其還可得知以往手工常規(guī)檢查無法檢測的參數(shù)，進而為臨床診療提供更有價值的實驗依據(jù)。

1.2 全自動血細胞分析儀的優(yōu)點

在正常生理狀態(tài)下，血常規(guī)檢查時，現(xiàn)代血細胞分析儀各項性能評價均在可接受范圍內(nèi)，且其檢測速度快、精度高、準(zhǔn)度夠，所以現(xiàn)代血細胞分析儀（儀器法）是目前國內(nèi)外公認(rèn)的血常規(guī)篩查手段。

1.2.1 有學(xué)者報道，其以手工鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)，利用雅培CD3700型全血細胞分析儀對醫(yī)院常規(guī)標(biāo)本進行測定并對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析，研究表明 CD3700分析儀對形態(tài)異常細胞檢測功能的特異性為77%、敏感性為100%，檢出有效率高達83.7%。CD3700型全自動血細胞分析儀是應(yīng)用多種原理、多角度對各血細胞參數(shù)進行分析的五分類血細胞分析儀，其對血細胞的檢測具有良好的技術(shù)性能，對形態(tài)異常細胞提示的敏感性高，重復(fù)性好。適用于常規(guī)標(biāo)本的血細胞分析篩查。

1.2.2 有資料表明，貝克曼庫爾特（BECKMAN COULTER）全自動5分類血球分析儀（5DF）可用于一般標(biāo)本常規(guī)檢查的篩查方法。研究者通過其與瑞氏染色鏡檢相比較研究，得出5DF血細胞分析儀對中性粒細胞、嗜酸、嗜堿性粒細胞和淋巴細胞分類計數(shù)無明顯差異（均P>0.05）,僅單核細胞分類計數(shù)儀器法比鏡檢法結(jié)果偏高（P<0.05）。當(dāng)存在血液系統(tǒng)疾病或某種原因引起的細胞結(jié)構(gòu)改變應(yīng)選用鏡檢法進行復(fù)查。

1.2.3 有學(xué)者用邁瑞B(yǎng)C-5500全血細胞分析儀與現(xiàn)代先進Sysmex XE2100全自動血細胞分析儀作對比分析表明，二者各參數(shù)相關(guān)性良好，即二者性能相當(dāng)。同時，邁瑞B(yǎng)C-5500全血細胞分析儀的批內(nèi)、批間精密度及總精密度變異系數(shù)（CV）值均在可接受范圍內(nèi)；且各分析參數(shù)的攜帶污染率小于0.5%。經(jīng)試驗表明，邁瑞B(yǎng)C-5500全血細胞分析儀可用于日常標(biāo)本篩查檢查。

1.2.4 目前，血細胞分析儀有三分群和五分群之分，不僅五分群血細胞分析儀性能良好，三分群血細胞分析儀的性能也很優(yōu)良。相對而言，三分群血細胞分析儀標(biāo)本用量少，尤其適用于兒童末梢血的檢測分析。相關(guān)資料表明，三分類雅培CELL-DYN1800全自動血細胞分析儀各種參數(shù)性能評價良好，測定參數(shù)快速，線性范圍寬，準(zhǔn)確度，精密度良好，各參數(shù)的攜帶污染率小于1%，線性范圍相關(guān)系數(shù)（r2）>0.99，準(zhǔn)確性的偏離指數(shù)（DI）<0.1%；背景計數(shù)低（0）。其可作為醫(yī)院全血細胞分析正常結(jié)果的篩查工具。

1.3 全自動血細胞分析儀的拓展應(yīng)用

現(xiàn)代先進血細胞分析儀擁有幼稚細胞檢測通道，在一定范圍（1~1 600）×106/L內(nèi)，可精確地對造血干細胞計數(shù)，且其檢測結(jié)果與流式細胞術(shù)檢測無明顯差異。有資料表明，某些先進血細胞分析儀（Sysmex XE2100）能快速、高效地檢測出外周血、臍血和采集物中的造血干細胞，且具有方便快捷、標(biāo)本用量少（約 60 μl）、檢測時間短（75 s）、花費少等優(yōu)點。 所以，應(yīng)用自動全血細胞分析儀來檢測造血干細胞，在外周血造血干細胞最佳采集時機的快速判斷、干細胞成功采集的預(yù)測和白血病患者造血功能恢復(fù)觀察等方面，具有良好的臨床應(yīng)用價值。

2 全自動血細胞分析儀在臨床應(yīng)用中的缺點

雖然，全自動血細胞分析儀擁有眾多的優(yōu)勢，但是在實際工作中，其也存在著致命的弱點。

2.1 全自動血細胞分析儀的白細胞分類

因為三分群血細胞分析儀主要利用電阻抗法對血細胞參數(shù)進行檢測分析，所以其存在著分類不精準(zhǔn)的缺點，尤其是對中間型細胞群異常時的檢測及結(jié)果有所出入。有眾多資料表明，三分群ABX MRCRO S60血液分析儀和三分群CD1800型全血細胞分析儀對兒童血標(biāo)本進行檢測，并同時用手工染色鏡檢進行對比分析，研究表明，當(dāng)血細胞分析儀（三分群）檢測的白細胞分類（中間型細胞群）為10%以上時，均應(yīng)做瑞特染色的人工鏡檢復(fù)查，以防止幼稚細胞，異型淋巴細胞，嗜酸性粒細胞等病理性細胞漏檢。

2.2 全自動血細胞分析儀的復(fù)檢體會

即使再先進的五分群血細胞分析儀也存在著一定的假陽性率和假陰性率，尤其是隨著醫(yī)學(xué)檢驗的崛起和發(fā)展，血液學(xué)和血液學(xué)檢驗創(chuàng)建了一個理論-檢驗-疾病相互結(jié)合，緊密聯(lián)系的新體系，且在實踐過程中不斷發(fā)展完善和提高。所以對臨床血液學(xué)常規(guī)篩查也提出更高的要求。

2.2.1 實驗室數(shù)據(jù)表明，根據(jù)實際情況制訂血細胞分析儀復(fù)檢規(guī)則，則可在保證工作量適宜的情況下，提高其檢測準(zhǔn)確率。在一定程度上可降低漏診率和誤診率。有學(xué)者報道，根據(jù)Sysmex XE2100血細胞分析復(fù)檢制定協(xié)作組的23條復(fù)檢規(guī)則和涂片陽性規(guī)則，對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析表明，復(fù)檢率為15.27%，假陽性率6.70%，假陰性率1.86%。Sysmex XE2100血細胞分析儀白細胞復(fù)檢規(guī)則能有效提高檢測準(zhǔn)確率，防止漏診和誤診。因此各血常規(guī)室根據(jù)實際情況制訂自己相應(yīng)的復(fù)檢規(guī)則，可有效降低漏診率和誤診率。

2.2.2 有些學(xué)者，將Sysmex 1800i與血涂片檢查進行對比分析，參照國際血細胞復(fù)檢相關(guān)條款，并對檢測結(jié)果進行分析，得到復(fù)檢率25%，假陽性率為20.4%，假陰性率為1.1%。說明雖然Sysmex 1800i及類似五分群機型，血細胞形態(tài)血檢查，在血常規(guī)分析中具有十分重要的意義，但是儀器法檢測的方法學(xué)具有局限性，對于形態(tài)結(jié)構(gòu)異常的細胞不能作出準(zhǔn)確的判斷和定位。一旦儀器檢查提示異常應(yīng)及時涂片復(fù)查，以保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

2.3 全自動血細胞分析儀的局限

無論三分群血細胞分析儀還是五分群血細胞分析儀都存在著一定的局限性（不能對血細胞形態(tài)學(xué)改變做出準(zhǔn)確檢測）。所以在臨床工作中，由于忽視了血細胞的形態(tài)學(xué)分析，就已造成漏診，甚至誤診的現(xiàn)象。有學(xué)者利用臨床實例證實：儀器分類法不能將患者外周血形態(tài)異常的特征表達出來，故若將儀器的分類計數(shù)結(jié)果報告臨床，則易漏掉重要的診斷信息。對于血象有變化的病例，有其是血細胞分析儀提示異常的病例，若不做鏡檢復(fù)查，則會漏診、漏檢的現(xiàn)象。

2.3.1 白細胞形態(tài)的改變：外周血出現(xiàn)幼稚粒細胞，核左移（中性桿狀核粒細胞比例增高），核右移（中性分葉核比例增高）嗜酸或嗜堿性粒細胞增高，中性粒細胞毒性病變，異型淋巴細胞等。

2.3.2 紅細胞形態(tài)的改變：外周血出現(xiàn)有核紅細胞，成熟紅細胞大小不等（RDW增高）中心淡染，點彩紅細胞，球形紅細胞，淚滴樣紅細胞，紅細胞呈緡錢樣排列。

2.3.3 血小板形態(tài)改變：EDTA依賴性假性血小板減少，血小板大小不等（PDW增高），血小板聚集、堆積和發(fā)生衛(wèi)星現(xiàn)象使全自動血分析儀不能確認(rèn)血小板而使血小板計數(shù)減低。

2.3.4 其他：腫瘤細胞及寄生蟲等。

總之，在臨床實際工作中不能只為了達標(biāo)而提高鏡檢率，鏡檢標(biāo)本的確定一定要依據(jù)臨床實際情況和血細胞分析的提示，兩者結(jié)合起來考慮，不能僅依賴于血細胞分析的提示作為鏡檢標(biāo)本的篩選條件，部分異常形態(tài)，比如異常紅細胞形態(tài)，粒細胞中毒改變，血小板的形態(tài)異常等都是儀器無法提示的。

3 討論

現(xiàn)代血細胞分析儀主要綜合應(yīng)用了電學(xué)（電阻抗法及射頻電導(dǎo)法）和光學(xué)（激光散射法及分光光度法）兩大原理，用以測定血液有形成分（細胞）和無形成分（血紅蛋白）。目前電阻抗法是三分群血液分析儀的主要原理。現(xiàn)在市面上的血細胞分析儀有很多種，但其檢測原理不盡相同：白細胞系列參數(shù)檢測原理主要有5種方法，即：①體積、電導(dǎo)和光散射（VCS）法。②流式細胞術(shù)、電阻抗、射頻和特殊細胞染色法，其有3個檢測通道（4DIFF通道、WBC/BASO通道和未成熟粒細胞信息IMI通道）。③鎢光源、激光散射法，其有過氧化物酶（Pero）通道、嗜堿性粒細胞/核分葉性通道和未染色大細胞計數(shù)（LUC）檢測通道。④多角度偏振光散射法（MAPSS）應(yīng)用固體激光流式細胞熒光技術(shù)多角度檢測白細胞和分類。⑤雙流體（雙鞘流）動力連續(xù)系統(tǒng)（DHSS），其有白細胞計數(shù)通道、嗜堿性粒細胞通道和白細胞分類通道來檢測白細胞和白細胞分類；成熟紅細胞系列檢測原理主要有4種方法，即：①電阻抗法。②流式細胞術(shù)、鞘流電阻抗法。③流式細胞術(shù)激光散射法。④電阻抗法和光散射法。血小板系列參數(shù)檢測原理有4種方法，即：①電阻抗法。②流式細胞激光核酸熒光染色和電阻抗法。③激光散射法。④固體激光散射法、電阻抗法和單克隆抗體熒光染色散射法。血紅蛋白濃度測定檢測原理主要有2種方法，即改良氰化高鐵血紅蛋白法和非氰化高鐵血紅蛋白法。網(wǎng)織紅細胞系列參數(shù)檢測原理主要有2種，即非熒光染料染色法和熒光染料染色法。有核紅細胞系列參數(shù)檢測原理主要有4種，即：①VCS法。②流式激光/熒光染色法。③白細胞計數(shù)和分類通道衍生法。④阻抗法和噻唑橙熒光染色流式細胞術(shù)。

雖然現(xiàn)代血細胞分析儀的功能及檢測原理都在不斷完善和提高。但是，我們必需強調(diào)在臨床工作中復(fù)檢的重要性。因為不同地理環(huán)境、不同檢測人群間，存在個體及群體差異，所以每個血常規(guī)室應(yīng)根據(jù)自己實驗室的具體情況制訂相應(yīng)的血細胞分析儀復(fù)檢原則，但是在臨床實際工作中，我們不能只為了達標(biāo)而一味提高鏡檢符合率。鏡檢復(fù)查標(biāo)本的確定一定要依據(jù)臨床實際情況和血細胞分析儀的提示，兩者結(jié)合起來考慮。

隨著循證醫(yī)學(xué)的不斷完善，根據(jù)循證醫(yī)學(xué)原則，我們應(yīng)該用當(dāng)前最好的檢測技術(shù)、質(zhì)量控制體系和臨床實踐成果，對血液分析儀檢測結(jié)果進行嚴(yán)格評價，才能使血液分析儀為臨床提供最有價值的檢測證據(jù)。

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