犬布魯氏菌病

王興龍，楊艷玲

（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所，吉林省人獸共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130062）

布魯氏菌屬分為6個(gè)種19個(gè)生物型，除了綿羊附睪種布魯氏菌（B.ovis）和沙林鼠種布魯氏菌（B.neotomae）兩個(gè)種外，其余4個(gè)種包括羊種布魯氏菌（B.melitensi），牛種布魯氏菌（B.abortus），豬種布魯氏菌（B.suis），犬種布魯氏菌（B.canis）均可以感染犬［1］。這種由牛、羊、豬種布魯氏菌引起的犬布魯氏菌病，稱為轉(zhuǎn)移型。最早在1931年就報(bào)道了豬布魯氏菌（B.suis）感染犬的病例。1966～1967年，犬布魯氏菌病原體從犬流產(chǎn)組織和陰道分泌物中分離出來(lái)。這種由犬種布魯氏菌引起的犬布魯氏菌病稱為最適寄生型。犬布魯氏菌不僅能感染各種犬，而且能感染其它動(dòng)物和人，是一種人獸共患的自然疫源性疾病。犬布魯氏菌與綿羊附睪種布魯氏菌具有相似的抗原物質(zhì)，后來(lái)該抗原物質(zhì)用于快速平板凝集試驗(yàn)（RSAT）。犬布魯氏菌病多為接觸性感染，一般犬?dāng)z食了牛布魯氏菌感染家畜的流產(chǎn)胎兒或陰道分泌物而感染牛布魯氏菌，還可以通過(guò)與帶菌犬交配，口鼻接觸等方式感染犬布魯氏菌。感染后有的無(wú)明顯臨床癥狀，呈現(xiàn)隱形帶菌狀態(tài)。有的出現(xiàn)典型的臨床癥狀，如淋巴結(jié)炎、睪丸炎、附睪炎、死胎、流產(chǎn)以及睪丸萎縮等。在治療上單一的抗生素效果不明顯，要多種抗生素聯(lián)合應(yīng)用。然而該病在治療后還會(huì)復(fù)發(fā)，因此，對(duì)于犬布魯氏菌病的根除多采取撲殺的方法。對(duì)進(jìn)出口犬的檢疫是至關(guān)重要的，在輸入和繁殖前進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，將會(huì)降低犬布魯氏菌病的發(fā)生［2-5］。我國(guó)上?？诎队?983年首次報(bào)道，從美國(guó)引進(jìn)的32只小型獵兔犬（Beagle比格）中，發(fā)現(xiàn)血清學(xué)陽(yáng)性1只，此后中國(guó)科學(xué)院流行病研究所從該只狗的血液及臟器中均分離到犬布魯氏菌。近幾年來(lái)，上海口岸又在出口的實(shí)驗(yàn)用犬中，時(shí)有發(fā)現(xiàn)血清學(xué)陽(yáng)性。

1 流行病學(xué)

所有的犬都是犬布魯氏菌的寄生宿主，歷史上犬布魯氏菌是在70年代中期在美國(guó)比格犬中最早發(fā)現(xiàn)的，隨后我國(guó)于1983年尚德秋等在上海從1只進(jìn)口的比格犬和1只中國(guó)草狗中也分離到了犬種布魯氏菌［6-9］。從此比格犬也成為了最重要的研究犬布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并用其進(jìn)行臨床試驗(yàn)。隨后犬布魯氏菌先后又在拉布拉多獵犬、德國(guó)牧羊犬、獅子犬等多個(gè)品種犬中發(fā)現(xiàn)。盡管純種犬具有很高的染病率，但是雜交犬或是性成熟犬以及具有繁殖能力的犬都是易感者［10-11］。流浪犬和野生犬也是主要的傳播宿主［12-16］。

一個(gè)最主要的傳播途徑是交配，因?yàn)椴剪斒暇谏车婪置谖锢锎罅考纳?。有研究發(fā)現(xiàn)同性別的犬即使在同一籠內(nèi)飼養(yǎng)也不會(huì)發(fā)生犬布魯氏菌的傳播［17］。然而還有的研究表明健康的雄性犬與患布魯氏菌病的雄性犬在一起飼養(yǎng)一段時(shí)間后卻發(fā)生犬布魯氏菌的感染［18，19］。尿雖然在布魯氏菌自然傳播過(guò)程中不是最主要的感染源，但是在感染后第1周到3個(gè)月內(nèi)尿中都可以檢測(cè)到少量的細(xì)菌［18，20，21］。從解剖學(xué)上講，尿是膀胱、前列腺和附睪等器官的感染載體。

犬布魯氏菌病在多個(gè)國(guó)家和地區(qū)暴發(fā)，已經(jīng)報(bào)道的有美國(guó)、墨西哥、英國(guó)、歐洲、巴西、加拿大、日本、俄羅斯、中國(guó)等。據(jù)中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所專家介紹，我國(guó)從南到北，犬群普遍存在布魯氏菌病，南方犬布魯氏菌病抗體陽(yáng)性率可達(dá)20％左右，北方牧區(qū)陽(yáng)性率可達(dá)90％以上。目前我國(guó)犬品種繁雜，來(lái)源廣泛，有來(lái)自本國(guó)的犬，也有非法入境的外國(guó)犬種，所以疫病較為復(fù)雜［22］。

無(wú)癥狀的犬是犬布魯氏菌的隱形攜帶者。細(xì)菌從感染到定居在生殖組織大約需要3周的時(shí)間，然后開始繁殖并不斷排泄，可以持續(xù)幾個(gè)月到幾年的時(shí)間。雄犬的前列腺和附睪被認(rèn)為是布魯氏菌寄生和繁殖的最佳靶器官。對(duì)于具有生殖能力的雄性犬來(lái)說(shuō)，這兩個(gè)組織是細(xì)菌廣泛傳播的病灶區(qū)。感染后的頭兩個(gè)月精液里能檢測(cè)到大量的細(xì)菌。

在犬飼養(yǎng)場(chǎng)，流產(chǎn)母犬是最主要的傳染源。流產(chǎn)后4～6周，在陰道分泌物和子宮內(nèi)容物仍可以分離到大量的布魯氏菌［20］。在感染的母犬乳汁中也能檢測(cè)到犬布魯氏菌［6，23］，這將會(huì)引起哺乳幼犬的感染。同時(shí)一些客觀因素也可以引起布魯氏菌的傳播，如輸血，陰道鏡檢查，人工受精以及污染的注射器等［6］。

2 病理學(xué)

布魯氏菌通過(guò)感染后，侵入組織，并在組織細(xì)胞內(nèi)增值，2～4周內(nèi)出現(xiàn)菌血癥。犬布魯氏菌靶向定居在繁殖相關(guān)的組織（皮質(zhì)類甾醇依賴的組織）。在雄性犬，主要定居的組織是前列腺、睪丸和附睪。在雌性犬，主要定居的組織是胎兒、妊娠子宮和胎盤。布魯氏菌在雌性犬的胎兒胃內(nèi)容物中也被發(fā)現(xiàn)［20］。

組織病理學(xué)表現(xiàn)主要是在淋巴結(jié)內(nèi)出現(xiàn)網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞異常增生，同時(shí)在皮膚、睪丸或其他器官形成肉芽腫［20］。流產(chǎn)的胎盤可見(jiàn)壞死灶、壞死性動(dòng)脈炎，并且在滋養(yǎng)層上皮細(xì)胞內(nèi)可以檢測(cè)到大量的細(xì)菌。在發(fā)炎的睪丸，可見(jiàn)精子肉芽腫，促使抗原物質(zhì)移出，造成抗精子抗體形成［24，25］。

犬感染布魯氏菌后的自然恢復(fù)要在感染后1～5年的時(shí)間，此時(shí)病犬無(wú)癥狀，血清抗體滴度在1：25～1：50［20，26］。再次攻毒，抗體滴度也不再增加，并且不會(huì)發(fā)生再次感染。

在病理學(xué)上主要表現(xiàn)是淋巴結(jié)和脾臟腫大、陰囊水腫、皮炎、附睪炎、睪丸炎、睪丸萎縮等。

3 臨床癥狀

犬布魯氏菌感染一般多為隱性或僅表現(xiàn)為淋巴結(jié)炎，有的亦可潛伏2周或半年以后出現(xiàn)全身性的臨床癥狀。犬布魯氏菌病的臨床表現(xiàn)有多種，但共同癥狀是母犬流產(chǎn)和不育，公犬發(fā)生睪丸炎、附睪炎、陰囊炎。部分患病母犬在妊娠后45～55d出現(xiàn)流產(chǎn)癥狀，但也有更早的出現(xiàn)流產(chǎn)，體溫不高。陰唇和陰道黏膜紅腫，陰道內(nèi)流出淡褐色或灰綠色分泌物。流產(chǎn)胎兒有皮下水腫、淤血、出血，部分組織發(fā)生自溶。部分感染母犬在懷孕早期即配種后10～20d，發(fā)生胚胎死亡并被吸收，不出現(xiàn)流產(chǎn)癥狀，但出現(xiàn)子宮內(nèi)膜發(fā)炎，臨床表現(xiàn)屢配不孕。感染公犬出現(xiàn)睪丸炎、附睪炎、陰囊水腫及包皮炎等癥狀。患病犬除發(fā)生生殖器官疾病以外，還可能出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎、腱鞘炎等癥狀。犬布魯氏菌病的另一個(gè)重要特點(diǎn)是菌血癥期長(zhǎng)，有的犬菌血癥期可持續(xù)1～2年之久。病犬偶爾出現(xiàn)腦膜炎、非化膿性病灶性腦炎。犬感染后還常伴有復(fù)發(fā)性眼葡萄膜炎，在眼前房液中?？煞蛛x到犬種布魯氏菌。

4 診斷

臨床癥狀不宜作為犬布魯氏菌病診斷的依據(jù)。但母犬有流產(chǎn)史或公母犬的繁殖機(jī)能低下時(shí)就應(yīng)考慮本病。流行病學(xué)、病理學(xué)也只能作為診斷的參考依據(jù)。唯一可靠的診斷方法是從血液中，或是從流產(chǎn)胎兒、陰道分泌物等材料中分離到布魯氏菌。但因分離菌陽(yáng)性率低及技術(shù)條件所限，故常用的診斷方法是血清學(xué)方法。

4.1 細(xì)菌的分離培養(yǎng)鑒定

布魯氏菌感染后，對(duì)于疑似布魯氏菌感染的動(dòng)物，做血液細(xì)菌分離培養(yǎng)是最具診斷性的檢測(cè)方法［32］。布魯氏菌感染后2～4周便出現(xiàn)菌血癥，可持續(xù)1～3年。白細(xì)胞中的細(xì)菌數(shù)量相對(duì)較少，因此需要采集全血樣本進(jìn)行培養(yǎng)。也可采取流產(chǎn)胎兒、胎盤、陰道分泌物等進(jìn)行分離培養(yǎng)。培養(yǎng)后，按常規(guī)方法進(jìn)行鑒定，也可用PCR方法、定量PCR方法鑒定。

4.2 血清學(xué)診斷

犬布魯氏菌與牛、羊、豬布魯氏菌不同的是其抗原類型為粗糙型而不是平滑型［27］。常用的血清學(xué)檢測(cè)方法有快速平板凝集實(shí)驗(yàn)（RSAT或ME-RSAT）、試管凝集試驗(yàn)（TAT），其他方法，如間接免疫熒光（IFA）、瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散、ELISA等則較少應(yīng)用。

4.2.1 RSAT和ME-RSAT：快速平板凝集實(shí)驗(yàn)（RSAT）是一種快速的檢測(cè)方法，1974年在美國(guó)就開始使用，并制成了商業(yè)化的檢測(cè)卡。檢測(cè)速度快，2分鐘就可以完成。感染后34周便可出現(xiàn)凝集現(xiàn)象［28］。ME-RSAT是在RSAT的基礎(chǔ)上做了改進(jìn)，加入了2-巰基乙醇（2-ME），增加了試驗(yàn)的特異性。ME-RSAT用來(lái)復(fù)檢RSAT檢出的陽(yáng)性血清［29］。用RSAT檢查犬布魯氏菌病迄今無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，墨西哥以1∶100++為陽(yáng)性，美國(guó)采用1∶200++為判定標(biāo)準(zhǔn)，日本取1∶320++作為分離犬種菌的標(biāo)準(zhǔn)。我國(guó)由尚德秋提出以1∶80～100++為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。以≥1∶80++為標(biāo)準(zhǔn)剖殺犬分離菌的陽(yáng)性率為47.6％，以≥1∶320++為準(zhǔn)分離菌的陽(yáng)性率為79.2％［30］。

4.2.2 試管凝集試驗(yàn)（TAT）：試管凝集試驗(yàn)也是用來(lái)復(fù)檢經(jīng)RSAT或ME-RSAT確定的犬布魯氏菌陽(yáng)性血清。陽(yáng)性反應(yīng)的抗體滴度出現(xiàn)在感染后的2～4周?？乖羌訜釡缁畹娜剪斒暇??？贵w滴度在1∶200就可判定為陽(yáng)性。當(dāng)抗體滴度大于1∶200時(shí)，在血液培養(yǎng)時(shí)就可以檢測(cè)到細(xì)菌。當(dāng)檢測(cè)的滴度低于1∶200時(shí)，2周后要進(jìn)行一次復(fù)檢。TAT檢測(cè)是敏感的，但是不夠特異，可能會(huì)有假陽(yáng)性的結(jié)果［33］。

5 治療

目前還沒(méi)有理想的犬布魯氏菌病治療的方法和藥物。布魯氏菌寄生在細(xì)胞內(nèi)，并周期性的繁殖，時(shí)常會(huì)出現(xiàn)菌血癥，從而給藥物治療帶來(lái)了困難。單一的抗生素治療效果不佳，也不被推薦使用［26，32］。最好的治療方法是四環(huán)素類抗生素與鏈霉素聯(lián)合使用?？股刂委熞话阈枰委?～3個(gè)療程，大約需要1～2個(gè)月的時(shí)間?？股刂委煷嬖诘膯?wèn)題是，細(xì)菌容易產(chǎn)生耐藥性，而且容易復(fù)發(fā)。

6 預(yù)防

在發(fā)情前期或發(fā)情期的血清學(xué)檢測(cè)是比較準(zhǔn)確的，因?yàn)榇藭r(shí)布魯氏菌數(shù)量在激素的影響下會(huì)上升。檢測(cè)出的所有布魯氏菌陽(yáng)性犬應(yīng)撲殺。同時(shí)犬飼養(yǎng)場(chǎng)應(yīng)該至少隔離一個(gè)月以上［18，33］。檢測(cè)為布魯氏菌陽(yáng)性的犬將不能用于繁殖。健康犬與感染的犬要嚴(yán)格分離［34］。感染布魯氏菌的母犬能夠?qū)⒉剪斒暇鞑ソo其后代。患病犬多數(shù)實(shí)施卵巢摘除或閹割手術(shù)，但是手術(shù)后的犬仍然可以帶菌多年。布魯氏菌病雖不能引起犬的死亡，但是因其引起的繁殖障礙，卻能帶來(lái)很大的經(jīng)濟(jì)損失。家養(yǎng)寵物犬可以通過(guò)散養(yǎng)犬或是野犬意外的交配而感染布魯氏菌。目前還沒(méi)有犬的疫苗可以應(yīng)用。種犬場(chǎng)需要每年檢測(cè)一次。犬舍內(nèi)一旦發(fā)現(xiàn)犬布魯氏菌病，所有的犬都要接受檢疫。布魯氏菌陽(yáng)性犬要隔離，并且每月都要復(fù)檢一次，直到無(wú)陽(yáng)性犬存在。處理死亡的動(dòng)物或感染的組織時(shí)要帶手套并穿工作服。常用的消毒藥有季銨鹽、1％次氯酸鈉或漂白粉、強(qiáng)力碘溶液、70％的乙醇或甲醛。當(dāng)前預(yù)防和控制犬布魯氏菌病應(yīng)做好如下工作：（1）淘汰全部陽(yáng)性犬（以血清學(xué)檢測(cè)為標(biāo)準(zhǔn)）；（2）加強(qiáng)國(guó)內(nèi)狗肉市場(chǎng)的監(jiān)管力度，做好監(jiān)督和管理工作；（3）加強(qiáng)對(duì)進(jìn)口犬和種犬的檢疫；（4）做好伴侶犬的定期檢疫工作；（5）相關(guān)的職業(yè)人群加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)。

7 公共衛(wèi)生安全

自60年代末期，人們分離到犬布魯氏菌以來(lái)，全世界已經(jīng)報(bào)道了30多例犬布魯氏菌引起人布魯氏菌病的病例［2-5］。人和其他靈長(zhǎng)類動(dòng)物對(duì)犬種布魯氏菌有相對(duì)的抗力。感染犬種布魯氏菌者主要是專業(yè)實(shí)驗(yàn)室人員、動(dòng)物管理技術(shù)人員、將犬作為伴侶動(dòng)物的飼養(yǎng)者、以及其他與犬有密切接觸的職業(yè)人群。

人感染犬布魯氏菌發(fā)病后的癥狀是多種多樣的，主要表現(xiàn)為波浪熱、寒戰(zhàn)、不適、體重減輕。其他癥狀有頭痛、惡心、肌肉以及關(guān)節(jié)酸痛、淋巴結(jié)腫大等。還可引起人的眼睛損傷和心內(nèi)膜炎。所有的病人凝集素抗體效價(jià)高于1∶100，在病人發(fā)燒期間可從血液中分離到犬種布魯氏菌［35］?；加忻庖呷毕莶〉膫€(gè)體更容易感染布魯氏菌，如癌癥病人、HIV患者以及接受移植的患者，同時(shí)兒童、孕婦等都容易感染布魯氏菌病。由此看來(lái)，犬布魯氏菌病對(duì)人的影響一時(shí)難以消除，檢疫、凈化是項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的工作。

8 展望

一是加強(qiáng)布魯氏菌病的基礎(chǔ)研究。未來(lái)很長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)，布魯氏菌病仍將是世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題，我國(guó)的布魯氏菌病防制仍面臨著巨大的挑戰(zhàn)?？陀^技術(shù)條件的制約以及細(xì)菌的特殊性和復(fù)雜性，導(dǎo)致布魯氏菌的基礎(chǔ)研究嚴(yán)重滯后。有關(guān)防制實(shí)踐的一系列重大問(wèn)題長(zhǎng)期懸而未決，包括：不同種屬感染宿主的遺傳基礎(chǔ)和分子機(jī)制；同種屬內(nèi)不同菌株間生物學(xué)表型高度多樣性的分子遺傳基礎(chǔ)及其機(jī)制；毒力相關(guān)基因及其功能機(jī)制；弱毒（疫苗）株的致弱分子基礎(chǔ)及其機(jī)制；病原與宿主間互動(dòng)機(jī)制，包括病理發(fā)生的分子機(jī)制，布魯氏菌在體內(nèi)巨噬細(xì)胞內(nèi)存活、增殖及逃避免疫攻擊的分子機(jī)制；免疫保護(hù)機(jī)制及保護(hù)性免疫原基因和功能蛋白等等。伴隨著基因組—蛋白組相關(guān)技術(shù)、基因芯片技術(shù)和基因組隨機(jī)、定向突變技術(shù)的成熟與突破，以及細(xì)菌“毒力島”、“代謝島”相關(guān)功能基因組和功能蛋白組比較研究的興起，特別是布魯氏菌基因組工作的相繼完成，為這些基礎(chǔ)問(wèn)題的解決提供了重大契機(jī)。

二是加強(qiáng)我國(guó)犬布魯氏菌病的流行病學(xué)調(diào)查，開展犬布魯氏菌病監(jiān)測(cè)和預(yù)防研究。由于犬飼養(yǎng)數(shù)量的增多以及與人類的密切接觸，使得犬布魯氏菌病將成為未來(lái)人類感染布魯氏菌病的主要傳播方式之一。我國(guó)對(duì)犬布魯氏菌病的分布、流行情況還不是十分了解，缺乏有效的監(jiān)測(cè)手段，疫苗研究幾乎為零，這樣既不利于犬的繁殖和飼養(yǎng)，也影響了人和家畜布魯氏菌病的防控。因此，加大投入力度，廣泛開展犬布魯氏菌病流行病學(xué)調(diào)查，研究簡(jiǎn)便快速、高通量的監(jiān)測(cè)技術(shù)，研制適合犬應(yīng)用的疫苗，對(duì)于犬、家畜和人類布魯氏菌病的防控均具有重要的意義。

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