美國大學的動物實驗的準入制管理

汪思應

(安徽(省)醫(yī)科大學實驗動物中心，安徽 合肥 230032)

美國大學的動物實驗的準入制管理

汪思應

(安徽(省)醫(yī)科大學實驗動物中心，安徽 合肥 230032)

在美國，動物實驗管理早就進入法制化軌道。任何大學、科研院所等部門進行動物實驗都必須遵守美國實驗動物一系列法規(guī)和規(guī)定。比如經(jīng)美國國會授權，農(nóng)業(yè)部(USDA)首先制定的《動物福利法》(Animal Welfare Act)、隨后衛(wèi)生部(PHS)制定的“檢驗、研究和教學中飼養(yǎng)管理和使用脊椎動物的法規(guī)”(US Government Principles for the Utilization and Care of Vertebrate Animals Used in Testing，Research and Training)及“人道使用和飼養(yǎng)管理實驗動物的法規(guī)”(Public Health Service Policy on Humane Care and Use of Laboratory Animals)。尤其政府部門如NIH、FDA、CDC及DoD等資助或批準的科學研究、藥物研發(fā)等課題中的動物實驗，除遵守上述法規(guī)外，還必須符合這些部門頒布的一些規(guī)范如FDA的GLP規(guī)范(Good Laboratory Practice)及NIH“實驗動物飼養(yǎng)管理和使用指南”(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)等。上述法律法規(guī)的監(jiān)督主管部門還針對法規(guī)編寫了相應工作指導手冊指導各級管理機構進行具體的實驗動物管理。在這些管理機構中，最基層、與科研人員關系最密切的就是各單位如大學、研究所等根據(jù)聯(lián)邦法規(guī)必須成立的實驗動物管理委員會(Institutional Animal Care and Use Committee，IACUC)(有些小的單位可以利用其上級單位的IACUC)。所以對于一所大學的科研人員，動物實驗準入的全部具體工作由IACUC管理。

IACUC一般由分管科研的副校長負責，3～5人組成，隸屬學校，但根據(jù)聯(lián)邦法規(guī)開展工作。其最基本的功能就是確定本單位所有動物實驗都按照聯(lián)邦法律、條例和規(guī)則來進行。主要工作包括:(1)接受審核并批準PI動物實驗申請(Animal protocol)及年審(renewal);(2)制定動物試驗中各種 SOP、指南及規(guī)程;(3)強制執(zhí)行對操作人員進行動物實驗前各種培訓并發(fā)證;(4)討論并審核本單位研究人員進行動物實驗時遇到的各種法規(guī)中不明確的特殊情況并對本單位動物實驗指南等進行修訂;(5)檢查本單位動物設施及動物實驗規(guī)范管理情況，接受本單位一切違反動物實驗規(guī)程的舉報并處罰等，有時也對本校研究人員(主要是PI)申報課題時標書中動物實驗部分進行合理性規(guī)范性預審。所以，要在美國大學進行動物實驗，PI必須熟悉三個人:第一是IACUC主任或執(zhí)行秘書獲得對課題及animal protocol有用信息;第二是單位或動物中心獸醫(yī)師為你提供技術幫助;第三是動物中心主任，在你獲得批準后為你安排實驗時間和空間等。

筆者相繼在美國 CaseWesternReserve University(CWRU，私立)及 University of Kentucky(UK，公立)大學進行過小鼠動物實驗，根據(jù)本人經(jīng)歷及與美國IACUC人員探討后認為:要在美國進行動物實驗，首先是 PI有經(jīng)費且其 animal protocol獲準通過，隨后就是實驗人員進行一系列培訓并獲得通過，最后才能進入相應的動物室進行動物實驗。本文就PI的animal protocol及強制培訓等部分內(nèi)容做簡單介紹，僅供國內(nèi)同行參考并歡迎批評指正。

1 PI的Animal Protocol

Animal Protocol表格可以由學校實驗動物室網(wǎng)頁上獲得，填好后網(wǎng)上遞交，時限根據(jù)研究課題一般為2～3年，但每年必須 renewal。主要內(nèi)容包括:(1)Protocol Title:即動物實驗名稱，必須與本單位已經(jīng)存在的名稱不同，防止重復實驗(renewal的除外);(2)PI Contact Record:PI的信息，除了聯(lián)系信息外，還要提供 PI有多長時間的動物實驗經(jīng)歷;(3)Funding:經(jīng)費來源情況包括你在學校的賬號;(4)Synopsis:研究摘要，要求簡明扼要的寫出研究目標、主要研究內(nèi)容及研究意義，要求科普化，因為任何IACUC成員中必有一名外行人員，必須讓他們看懂。不允許將研究標書中的摘要復制過來。要強調(diào)你將在動物身上做些什么，怎樣有效人道地使用動物及保證其福利。(5)Background:研究背景，主要是簡短介紹本研究的必要性和研究假設(Hypothesis)形成的主要論據(jù)。Renewal的 protocol還必須包括已經(jīng)取得進展。(6)Literature Search:這部分相當于查新，要求至少檢測2個數(shù)據(jù)庫并在一定范圍內(nèi)進行調(diào)查，提供出三個方面的信息即本研究是否是不必要的重復;是否可以用其他研究方法替代動物實驗;能否有方法讓實驗動物免受或少受痛苦。(7)Experimental Design:實驗設計，主要介紹課題標書中動物實驗設計部分，包括怎樣的步驟及何時來處理動物，對動物怎樣操作。不要敘述研究目的及實驗動物的數(shù)量。文字多少依賴于實驗的復雜程度。(8)Hazardous Agents:生物危害物，主要闡明動物實驗中試劑等是否對人或動物產(chǎn)生危害，如有無放射性物質(zhì)、有無重組核酸類物質(zhì)、有無人類及動植物病原體、有無急性毒物或化學致癌物及其他有害物。如果有需要分別填寫相應的等級表。(9)Species Usage:動物種類的使用，這部分要求填寫的內(nèi)容很多，包括選哪種脊椎動物;動物是否通過公共區(qū)域運輸及其運輸方式;是否在臨床區(qū)使用動物及其組織器官等;種類選擇及使用動物數(shù)的依據(jù);動物實驗室具體地點及是否對動物進行手術;活體動物是否帶離動物實驗室12或24 h，如果是，說明理由及措施;對動物有害的試劑或藥物包括麻醉劑的用量等詳細信息(每種藥物包括麻醉劑或試劑均需分別填寫);動物實驗過程中可能遭受的痛苦及解決方案;動物的安樂死等。(10)Personnel Information:實驗人員信息，包括 PI在內(nèi)的動物實驗人員詳細信息，其中要說明已有的動物實驗經(jīng)歷及本次實驗中任務等。一份Animal Protocol提交后，經(jīng)過IACUC的審核，到通過約需1～3個月時間。如果動物實驗人員違反操作規(guī)程被發(fā)現(xiàn)或被人舉報(網(wǎng)上設有匿名舉報免費電話)被證實，將被取消實驗動物資格或趕出大學，PI的Animal Protocol將被取消。重新申請的審核時間是6～12個月。

2 網(wǎng)絡化的動物實驗培訓

當一名研究人員如博士后進入一所大學或其他研究機構，辦完必須的手續(xù)獲得 ID后，第一件事就是進行生物安全培訓，獲得通過后，才能進入實驗室進行實驗，需要進行動物實驗的，就必須通過強制性的網(wǎng)上實驗動物培訓和考核(這時你的電子鑰匙即key將自動激活，能夠進入動物實驗室大門)，最后進入動物房實地培訓。獲得動物實驗室人員認可即可以進行動物實驗。如果涉及動物輻照或特殊危害性處理還需要放射生物學等培訓。

動物培訓一般分為兩種，一種是僅在本單位培訓(CWRU采用)，即本單位動物實驗室網(wǎng)頁上展示的PPT形式的培訓內(nèi)容，詳細介紹了動物實驗中應該遵循的法規(guī)、各種規(guī)范和安全條例等，同一單位不同的動物實驗室要求不同，基本包括基礎訓練(如CWRU的 Wolstein Research Building動物實驗的 Wolstein Orientation)，和嚙齒類的 microisolator technique、大動物手術、GLP實驗室的 GLP、P3實驗室的ABSL3等特殊的部分，最后網(wǎng)上考核，考核通過后，相應動物中心負責人會通知你去動物中心進行現(xiàn)場培訓?，F(xiàn)場培訓主要是介紹動物實驗室的結構，各種安全條例，常規(guī)操作包括一般動物操作等。第二種要求更嚴格(UK采用)，除本單位培訓外，還委托美國實驗動物科學協(xié)會即 AALAS(American Association of Laboratory Animal Science，為民間組織，提供資質(zhì)認證和培訓，美國官方承認)來培訓。一般由你本人或系秘書首先向本單位IACUC申請培訓，單位 IACUC會在 AALAS為你申請一個賬戶(AALAS Learning Library Account)首先進行網(wǎng)上培訓并考核，AALAS網(wǎng)上培訓課程(Animal Care and Use Courses Library)有很多，UK要求的內(nèi)容由兩部分即Euthanasia of Research Animals-AVMAGuidelines及 Workingwiththe IACUC-non VA version，通過考核(每部分20～25個選擇題，80分及格)后，獲得2個證書及積分。隨后在本單位進行 Occupational Health Training考核及填表完成Animal Worker Questionnaire。再等待通知進入動物室進行現(xiàn)場培訓獲得動物實驗資格。

進行動物實驗時必須嚴格按照規(guī)則和你自己的Animal protocol進行。不得隨意更改如實驗設計，動物處理方式、劑量、時間等。也不得將活的動物帶離動物實驗室在自己實驗室放置超過24 h。一切違法規(guī)則的事均可能被匿名舉報，IACUC設有舉報信箱。查實后即可能被取消動物實驗資格或實驗室工作資格。Animal protocol也有可能被取消，重新申請需6個月以上的時間。所以，一般美國的PI不輕易進行動物實驗室。不僅價格昂貴，手續(xù)復雜，還有被吊銷資格的風險。這些都是IACUC的工作范疇。

我國的實驗室生物安全包括動物實驗安全日益受到重視，我國各研究單位也設有類似于美國IACUC的動物試驗管理機構，但多數(shù)尤其是落后地區(qū)沒有很好地開展實質(zhì)性的工作，這于我們的經(jīng)濟發(fā)展水平相關，還可能于我國有關實驗動物的法規(guī)不成熟，沒有具體細則、可操作性不強等諸多因素有關。這依賴于廣大實驗動物領域的專家們的進一步努力。

致謝:感謝UK的 Xianglin Shi及 Jia Luo教授慷慨提供其 Animal protocol。感謝 UCLA Transgenic Facility主任Meisheng Jiang教授關于美國實驗動物的介紹和討論，感謝CWRU Chengkui Qu教授的指點。

2010-02-24