賴型鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡Ca2+信號通路機制

吳秉婷,孫 湛,李道坤,鮑 朗

(四川大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院病理生理,四川成都610000.E-m ail:baolang@scu.edu.cn)

賴型鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡Ca2+信號通路機制

吳秉婷,孫 湛,李道坤,鮑 朗

(四川大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院病理生理,四川成都610000.E-m ail:baolang@scu.edu.cn)

目的:探討賴型鉤端螺旋體外膜蛋白Loa22對人肺泡II型上皮細(xì)胞(A549)[Ca2+]i影響造成的細(xì)胞凋亡,初步揭示該蛋白作用細(xì)胞可能的信號機制。方法:采用特異阻斷劑U73122預(yù)處理A549,阻斷PLC-γ1激活細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放的信號通路,以Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡,Fluo 3/AM標(biāo)記流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)游離鈣,評估[Ca2+]i變化與細(xì)胞凋亡的關(guān)系;以FITC-鬼筆環(huán)肽熒光染色,觀察F-actin排列結(jié)構(gòu)影響;檢測鈣調(diào)素(Ca M)mRNA表達(dá)量變化。結(jié)果:直接以Loa22成熟肽作用A549能引發(fā)[Ca2+]i上升,細(xì)胞凋亡率升高;阻斷PLC-γ1信號通路后以Loa22成熟肽作用A549,[Ca2+]i較不阻斷時降低,凋亡率減小,CaM mRNA表達(dá)量降低(P＜0.01)。結(jié)論:Loa22成熟肽作用機制可能通過PLC-γ1信號通路觸發(fā)細(xì)[Ca2+]i升高,導(dǎo)致F-actin重排,促使Ca M mRNA表達(dá)增加,提示該基因參與鉤端螺旋體侵襲細(xì)胞引發(fā)細(xì)胞凋亡的病理過程。